江苏省科委社会发展基金(BS2004014)
- 作品数：7 被引量：9H指数：2
- 相关作者：陈明汪莉萍葛国洪郭海燕李红兵更多>>
- 相关机构：徐州医学院附属医院丰县人民医院更多>>
- 发文基金：江苏省科委社会发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 正常人各年龄组外周血TRECs含量的检测被引量：2
- 2007年
- 医学界曾经普遍认为成人胸腺不再具有功能，但随着近半世纪免疫学的进展，人们认识到胸腺在成年后仍具有活性，在人体免疫功能中起着重要作用。胸腺功能的异常与免疫缺陷、自身免疫性疾病、感染、肿瘤等疾病的发生甚至衰老均有一定的关系。由于缺乏直接的标记，以往对胸腺功能的研究主要采用T淋巴细胞转化试验、玫瑰花环形成试验、T细胞表型测定、胸部CT测定胸腺体积及计算胸腺指数等方法来间接地了解胸腺的输出功能，但这些方法均不能准确地反映胸腺近期输出功能的变化。1998年Douek等首先提出通过定量测定T细胞受体重排切除环（TCRrearrangementexcisioncircles，TRECs）的含量来评价胸腺的输出功能，TRECs是T细胞发育早期重排形成T细胞受体α基因时存在于细胞中的染色体外DNA环行删除产物，是初始T细胞（naiveTcell）的特异性标志。目前TRECs定量检测来评价胸腺的输出功能已用于多种疾病的研究。中国尚缺乏正常人各年龄组TRECs含量水平的报告。本研究采用实时荧光定量PCR方法分析正常人各年龄组外周血TRECs的含量，为今后的研究提供参考。
- 葛国洪陈明李红兵郭海燕汪莉萍
- 关键词：TRECS正常人外周血自身免疫性疾病荧光定量PCR方法
- 慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗前后TRECs含量的变化被引量：4
- 2007年
- 观察慢性乙型肝炎(CHB)患者经抗病毒治疗前后T细胞受体重排删除环(TRECs)含量的变化。利用实时荧光定量PCR方法检测15例干扰素、13例阿德福韦酯治疗前后的CHB患者及27例健康体检者外周血单个核细胞(PBMCs)中TRECs的含量。CHB患者中TRECs含量为(7.29±2.26)copies/103PBMCs,低于健康体检者TRECs水平(10.48±6.90)copies/103PBMCs,P<0.05;TRECs含量与HBV载量直线相关分析r=0.06,P=0.975;干扰素组治疗后TRECs含量(12.77±5.25)copies/103PBMCs,高于治疗前(7.14±2.69)copies/103PBMCs,P<0.05;阿德福韦酯组治疗后TRECs含量(8.63±3.26)copies/103PBMCs与治疗前(7.46±1.73)copies/103PBMCs比较,P>0.05,差异无统计学意义。CHB患者组中TRECs含量低于正常对照组,TRECs含量与HBV载量无明显相关性,干扰素治疗能提高CHB患者中TRECs的含量,而阿德福韦酯无此作用。
- 葛国洪陈明李红兵郭海燕汪莉萍
- 关键词：慢性乙型肝炎T细胞受体重排删除环胸腺近期输出功能抗病毒药
- 原发性肝癌和乙型肝炎肝硬化患者胸腺近期输出功能初步探讨被引量：3
- 2007年
- 郭海燕陈明汪莉萍葛国洪潘修成李丽李秀华
- 关键词：肝肿瘤肝硬化胸腺
- 实时荧光定量PCR测定胸腺近期输出功能方法的建立和应用被引量：2
- 2007年
- 目的 建立一种准确、快速的检测胸腺输出功能的方法。方法 根据TCRδ基因序列，设计引物和探针，建立实时荧光定量PCR检测T细胞受体重排切除环（TRECs）的方法；并用于检测正常人及慢乙肝PBMCs中TRECs的含量。结果 建立了测定TRECs含量的实时荧光定量PCR方法，产物与预计长度相符，序列正确；最低可扩增出5 copies的模板；重复五次，Ct值的变异系数为1．06％。正常人21-45岁组的TRECs含量为（7767．4±2369．5）copies／10^6 PBMCs，16-20岁组为（28374．4±7820．4）copies／10^6 PBMCs，21-45岁慢乙肝组（6480．9±2031．2）copies／10^6 PBMCs，正常人21-45岁组分别与16-20岁组、同龄慢乙肝组比较差异均有统计学意义，P〈0．05。结论 实时荧光定量PCR检测TRECs的方法特异性强，灵敏度高，重复性好。正常人21-45岁组的胸腺输出功能低于16-21岁组，慢乙肝组低于同龄正常人。
- 李红兵陈明汪莉萍朱学文葛国洪李秀华
- 关键词：胸腺
- 实时荧光定量PCR分析慢性丙型肝炎患者胸腺近期输出功能被引量：1
- 2007年
- 目的观察慢性丙型肝炎(CHC)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中T细胞受体重排删除环(TRECs)的含量,从而推测CHC患者的胸腺近期输出功能,并且比较TRECs含量与HCV载量的关系。方法利用实时荧光定量PCR方法检测22例CHC患者及16例正常人PBMCs中TRECs含量,用RT-PCR方法结合荧光探针的检测技术检测CHC组外周血血清中的HCVRNA。结果CHC患者中TRECs含量为(5.52±1.87)copies/103PBMCs,低于正常人TRECs水平(7.19±2.42)copies/103PBMCs,P<0.05;TRECs含量与HCV载量直线相关分析r=-0.427,P<0.05。结论CHC患者TRECs水平低于正常人,显示其胸腺近期输出功能明显降低,且与HCV载量呈负相关性。
- 郭海燕陈明汪莉萍葛国洪张言超
- 关键词：慢性丙型肝炎TRECS胸腺近期输出功能
- 徐州地区汉族人及慢性乙型肝炎HLA-A基因多态性的研究
- 2007年
- 探讨慢性乙型肝炎与HLA-A位点的等位基因多态性。用PCR-SSP方法对徐州地区汉族正常组和慢性乙型肝炎组的HLA-A基因多态性进行分析。HLA-A*0201-17出现的频率在慢性乙型肝炎组为45.57%,高于正常组的29.69%,P=0.002<0.05,RR=1.983,(95%C I:1.227-3.080),具有统计学意义。HLA-A*0201-17与慢性乙型肝炎较高的相关性,可能为易感基因。
- 戴玮玮陈明汪莉萍孙海丰傅涓涓李秀华
- 关键词：乙型肝炎疾病易感性人类白细胞抗原序列特异性引物聚合酶链反应
- 荧光定量PCR检测TRECs的标准品质粒和标准曲线的构建被引量：1
- 2008年
- 目的构建荧光定量PCR检测T细胞受体重排切除环（TRECs）的标准品质粒和标准曲线。方法对TCRδ基因进行序列分析，设计一对引物和探针。提取正常人外周血单个核细胞中的DNA，经普通PCR扩增，产物纯化后与pUCM-T载体连接并转化入大肠杆菌DH5α，筛选得到重组成功的质粒。结果重组质粒测序后显示目的片段序列正确，表明TRECs基因片段成功克隆。以10^3～10^7copies／ml不同稀释水平的标准品进行荧光定量PCR扩增后，统计学分析显示标准品浓度的对数与Ct值之间存在良好的线性关系（r=-0．998，P＜0．01）。结论所构建的TRECs标准品特异性和线性关系较好。
- 李红兵陈明朱学文汪莉萍葛国洪李秀华
- 关键词：聚合酶链反应质粒
