河北省医学科学研究重点课题(20100101)
- 作品数：2 被引量：13H指数：2
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- 内质网应激在大鼠酒精性肝病肝细胞凋亡中的作用被引量：7
- 2012年
- 目的探讨内质网应激在大鼠酒精陡肝病肝细胞凋亡中的作用。方法采用酒精灌胃的方法建立大鼠酒精性肝病模型，分别于4、8、12、16周随机处死动物，留取血清和肝组织，同时设置正常对照组。检测大鼠血清总同型半胱氨酸（tHcy）浓度，比色法测定大鼠肝组织胱硫醚β合成酶（CBS）活性，逆转录-聚合酶联反应和免疫组织化学法分别检测肝组织葡萄糖调节蛋白78（GRP-78）、需钙蛋白酶2（calpain-2）和caspase-12前体蛋白（procaspase-12）的mRNA和蛋白质表达情况；脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测肝细胞凋亡情况。组间数据比较用完全随机设计的方差分析（SNK法或Tamhane’s法），相关陛分析用Pearson直线相关分析法。结果模型组大鼠16周末出现肝细胞弥漫小泡性脂肪变性、窦周纤维化，汇管区纤维组织增生并有纤维间隔形成。正常对照组及造模4、8、12、16周时，大鼠血清tHcy浓度分别为（5．10±0．56）μmol／L、（6．95±0．17）μmol／L、（8．36±0．17）μmol/L、（9．45±0．28）μmol／L和（9．85±0．12）μmol／L，肝组织匀浆CBS浓度分别为（613．92±17．09）U／g、（573．53±24．96）U／g、（503．42±44．67）U／g、（438．02±14．67）U／g和（390．45±31．17）U／g，随着造模时间的延长，tHcy浓度逐渐升高（F=338．60，P〈0．01），CBS活性逐渐降低（F=91．90，P〈0．01），且二者呈负相关关系（r=-0．632，P〈0．01）。随着造模时间的延长，GRP-78、calpain-2和caspase-12的mRNA相对表达量逐渐升高（F值分别为216．19、128．91和95．80，P值均〈0．01），且GRP-78mRNA的表达与tHcy浓度呈正相关（r=0．617，P〈0．01）GRP-78和calpain-2的蛋白质表达量逐渐增多，procaspase-12的蛋白质表达量逐渐减少。正常对照组及造模4、8、12、16周的大鼠肝细胞凋亡指数分别为2．17％±1．06％、29�
- 孙丽娜周东方周俊英赵彩彦甄真
- 关键词：酒精性内质网应激葡萄糖调节蛋白78
- 腺苷蛋氨酸预防酒精性肝病及其作用机制探讨被引量：6
- 2012年
- 目的探讨腺苷蛋氨酸(SAM)防治大鼠酒精性肝病的作用机制。方法健康雄性wistar大鼠30只,随机分为对照组、模型组和SAM干预组。模型组大鼠采用逐渐增加浓度(30%-60%)和剂量(5-9g·kg-1·d-1)的方法酒精灌胃16周,干预组增加SAM(100mg/kg)灌胃,其它同模型组。16周末随机处死动物,检测血清总同型半胱氨酸(tHcy)的浓度和肝组织胱硫醚β合成酶(CBS)的活性;分别采用免疫组化方法和RT-PCR法检测肝组织中GRP-78、calpain 2及其caspase-12的表达;采用TUNEL染色法检测肝细胞凋亡。结果模型组大鼠16周末出现肝细胞弥漫小泡性脂肪变性,窦周纤维化,汇管区纤维组织增生并有纤维间隔形成。SAM组病理改变较模型组明显减轻。SAM组血清tHcy的浓度(7.00±0.79)较模型组(9.85±0.12)明显降低,而CBS的活性(511.60±57.44)较模型组(390.45±31.17)升高,F值分别为147.28和41.14,P值均<0.01;免疫组化和RT-PCR结果显示SAM组GRP-78、Calpain 2、caspase-12的表达较模型组减弱;SAM组的肝细胞凋亡指数(31.24±2.65)较模型组(65.71±9.78)降低,F值为301.79,P<0.01。结论在大鼠酒精性肝病中,腺苷蛋氨酸通过提高胱硫醚β合成酶活性,改善内质网应激,减少肝细胞凋亡,减轻肝脏损伤。
- 孙丽娜周东方周俊英
- 关键词：肝病酒精性内质网应激S-腺苷甲硫氨酸
