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EZH2基因在膀胱移行细胞癌组织的表达及其临床意义被引量：3: 2008年; 目的探讨EZH2基因在膀胱癌组织中的表达意义及其与临床病理的关系。方法半定量PCR法检测EZH2 mRNA表达，免疫组化SP法检测EZH2蛋白表达，分析其与临床病理特征的关系。结果肿瘤组织中EZH2 mRNA和EZH2蛋白的表达水平均明显高于正常移行上皮组织，并与临床分期、病理学分级有关：低分化肿瘤组织中EZH2表达高于高分化肿瘤组织（P〈0．05），浸润肿瘤EZH2的表达高于浅表肿瘤（P〈0．05）。结论膀胱癌组织EZH2基因表达增加与膀胱移行上皮细胞恶性生长及不良预后有关。; 张一兵牛海涛畅继武; 关键词：膀胱癌 EZH2 增殖

蛋白AAX14401相应抗体的制备及鉴定被引量：1: 2015年; 目的：由AY887902完整读码框翻译的蛋白AAX14401,制备蛋白AAX14401相应抗体anti-AY,并对其进行鉴定。方法：以AY887902的ORF所翻译氨基酸与GSTP1相比差异较大的40∽52位上氨基酸序列为模板,按照抗体制备要求,合成多肽并免疫小鼠,制备蛋白AAX14401多克隆抗体anti-AY。结果：经过用酶联免疫吸附剂测定法（ELISA）检测,抗体滴度为1︰35 000,滴度达到要求,可以进行蛋白AAX14401的检测。结论：制备的蛋白AAX14401抗体anti-AY符合要求,为进一步对AY887902功能进行检测奠定了较好的基础。; 胡少华赵振理孙光畅继武; 关键词：抗体制备突变体膀胱肿瘤

RNA干扰沉默EZH2基因对人膀胱癌EJ细胞增殖的影响被引量：3: 2008年; 目的:研究RNA干扰沉默EZH2基因对人膀胱癌EJ细胞周期和增殖的影响.方法:体外构建EZH2基因的shRNA的表达载体,Lipofectamin 2000介导转染膀胱癌EJ细胞,采用RT-PCR和Western Blot方法检测特异性shRNA对EZH2基因沉默效果,转染后采用MTT法检测shRNA对细胞增殖的作用;应用PI单染流式细胞术分析对细胞周期的改变.结果:EZH2基因的shRNA表达载体有效下调EZH2基因的表达(P<0.05).与对照组比较,细胞增殖明显抑制(P<0.05);同时引起细胞G1期阻滞,RNA干扰后,G1期细胞增加[(84.0±8.7)%vs(52.0±6.8)%,P<0.05],S期细胞减少[(11.0±1.1)%vs(43.0±4.9)%,P<0.05].结论:EZH2基因有望成为应用RNAi技术探索膀胱癌基因治疗的潜在靶基因.; 张一兵牛海涛畅继武; 关键词：膀胱肿瘤 EZH2基因 RNA干扰细胞周期

膀胱移行细胞癌复发相关因素分析: 2008年; 回顾性分析167例复发性膀胱移行细胞癌患者的临床病理资料。选择患者的性别、年龄、病理分类、肿瘤直径、肿瘤数目、生长部位、形态、治疗方式、有无血管浸润及有无炎细胞浸润10项因素与复发时间进行COX回归分析。结果初次分类、肿瘤数目、血管浸润和手术方式与复发时间有相关性(P均<0.01)。认为初次分类为高恶性膀胱移行细胞癌较低恶性癌易于在短期内复发;多发性肿瘤及有血管浸润者,复发时间明显短于单发性肿瘤及未发生血管浸润的肿瘤;恰当的手术方式能够明显延长复发时间。; 李宏杰李常颖畅继武; 关键词：膀胱肿瘤移行细胞癌 COX回归分析

MRP1/CD9在膀胱癌组织中的表达及意义被引量：3: 2006年; 目的探讨M RP 1/CD 9在膀胱癌组织的表达及其临床意义。方法用免疫组化SP法检测M RP 1/CD 9在膀胱癌组织和正常膀胱黏膜组织中的表达。结果正常膀胱组织中M RP 1/CD 9均为阳性。膀胱癌组织中M RP 1/CD 9表达降低,且与病理分期呈负相关,与临床分期无相关性。结论在膀胱癌组织中M RP 1/CD 9表达降低,可能与膀胱癌的发展有关。其降低程度可以作为评估膀胱癌恶性程度的一个重要指标。; 张一兵牛海涛隋志芳畅继武; 关键词：膀胱肿瘤

902PCDNA3质粒的构建及对膀胱癌细胞的转染被引量：1: 2019年; 前期获得一条致病基因的表达序列标签(EST),扩增后提交美国国立生物技术信息中心(NCBI)获得基因号:AY887902及蛋白号:AAX14401[1]。本实验拟构建902PCDNA3重组质粒并进行细胞转染,为AY887902的功能研究奠定基础。; 赵振理畅继武孙光胡少华; 关键词：致病基因细胞转染膀胱癌细胞重组质粒

人真核表达质粒载体plenti6/v5-D-TOPO-TβRⅡDNglytk的构建及鉴定: 2008年; 目的:鉴于TGFβ在肿瘤发展过程中的负性免疫调节作用,使T淋巴细胞对TGFβ失去敏感性可以恢复其对肿瘤的杀伤活性,拟用含有TβRⅡDNglytk质粒的慢病毒来感染T淋巴细胞使其对TGFβ失去敏感性后发挥抗肿瘤效应,因此我们首先构建含有TβRⅡDNglytk的人真核表达的慢病毒质粒载体plenti6/v5-D-TOPO-TβRⅡDNglytk。方法:从质粒上将TβRⅡDN及HSV-tk克隆下来,重组PCR技术将其构建为融合蛋白TβRⅡDNglytk,琼脂糖凝胶电泳后切胶回收纯化;再利用TOPO克隆技术将其连接到慢病毒质粒pLenti6/V5-TOPO上,将质粒测序验证。结果:测序结果证明已将TβRⅡDN和HSV-tk构建成融合蛋白TβRⅡDNglytk并克隆到慢病毒载体plenti6/v5-D-TOPO中。成功构建了含TβRⅡDNglytk的人真核表达的质粒载体plenti6/v5-D-TOPO-TβRⅡDNglytk,经测序鉴定图谱正确。结论:成功构建了人真核表达的质粒载体plenti6/v5-D-TOPO-TβRⅡDNglytk,联合应用重组PCR与TOPO克隆技术能够简单、高效、快速的构建慢病毒质粒。; 张婷杨阔畅继武徐勇; 关键词：转化生长因子Β 慢病毒表达载体

AAX14401蛋白在人膀胱癌组织中的表达及其意义被引量：1: 2018年; 目的:研究AAX14401蛋白在正常膀胱组织和膀胱移行细胞癌组织中的表达情况,分析其在膀胱癌发生发展过程中的作用。方法:收集膀胱癌组织标本75例作为实验组,以正常膀胱黏膜组织12例作为对照组,应用免疫组织化学法检测谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)和AAX14401的阳性表达率,分析GSTP1和AAX14401蛋白阳性表达率在膀胱癌组织和正常膀胱组织中的差异。结果:正常膀胱组织中GSTP1蛋白阳性表达率为58.3%,膀胱癌组织中GSTP1蛋白阳性表达率为90.7%,二者比较差异有统计学意义(P<0.01);在正常膀胱组织中AAX14401蛋白表达均为阴性,在膀胱癌组织中AAX14401蛋白阳性表达率为2.7%,二者比较差异无统计学意义(P=0.596);膀胱癌组织中AAX14401蛋白和GSTP1蛋白无同为阳性表达者,GSTP1阴性表达的膀胱癌组织中有2例Anti-AY阳性表达,GSTP1蛋白与AAX14401蛋白在膀胱癌组织中阳性表达呈负相关关系(r=-0.274,P=0.018)。结论:AAX14401蛋白在膀胱癌中的表达可能促进了膀胱癌的发生发展。; 赵振理畅继武孙光胡少华; 关键词：膀胱肿瘤免疫组织化学

人膀胱癌EJ细胞EZH2基因表达降低后基因表达谱的差异分析: 2008年; 目的利用基因芯片技术筛选膀胱癌EJ细胞EZH2基因RNA干扰后的差异表达基因,探讨EZH2基因在肿瘤中的作用机制。方法构建EZH2基因的shRNA表达载体,转染膀胱癌EJ细胞,基因芯片筛选差异表达基因并上传passwayminer服务器(http://www.biorag.org./passway.htm)进行功能分类。结果差异表达基因436条,下调179条,上调257条,功能聚类分析显示115个差异表达基因定位于已知的生物通路中,有EGF信号传导通路、P53传导通路、细胞增殖、细胞周期通路、Notch、Wnt通路等。EZH2靶基因WNT1、MYT1、CNR1、WT1表达上调,部分通路及基因与肿瘤干细胞和细胞分化有关。结论EZH2基因通过多个基因介导参与细胞分化,对EZH2相关基因的研究有助于明确EZH2在细胞癌变过程中的作用机制。; 张一兵牛海涛畅继武; 关键词：EZH2 基因芯片 RNA干扰肿瘤干细胞

shRNA抑制EZH2基因表达对膀胱癌细胞增殖的影响: 2008年; 目的探讨RNA干扰(RNAi)技术下调EZH2基因表达对膀胧癌细胞增殖的影响。方法设计、合成EZH2基因小发夹RNA(shRNA)表达载体,用脂质体包裹并转染膀胱癌EJ细胞。RT-PCR和免疫组化法检测基因沉默效果,细胞克隆形成检测细胞生长情况,流式细胞仪测定细胞周期。结果EZH2的shRNA表达载体能有效下调EJ细胞的EZH2基因表达,并显著抑制EJ细胞生长,EJ细胞周期发生G1期阻滞。结论RNAi技术可显著下调EJ细胞的EZH2基因表达,阻止EJ细胞进入S期并抑制其增殖。; 张一兵牛海涛畅继武王小君张伟; 关键词：RNA干扰 EZH2基因膀胱肿瘤细胞增殖

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