国家自然科学基金(30400016)
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
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- 相关机构：第四军医大学西京医院郑州大学第一附属医院第四军医大学更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 双向启动子小干扰RNA载体干扰效率的验证被引量：1
- 2005年
- 李婷婷赵丽娜宁寒冰韩英刘志国樊代明
- 关键词：RNA干扰细胞转染流式细胞术
- 人乳头瘤病毒HPV16E6的表达促进角质生成细胞凋亡的发生
- 2009年
- 为探讨HPV16早期基因E6的表达对角质生成细胞NIKS凋亡表型的影响及可能的机制,经培养稳定表达HPV16E6的角质生成细胞NIKS;使用不同的DNA损伤剂处理转染后细胞,流式细胞术检测细胞凋亡情况;建立表达HPV16E6突变体Y54D及F2V的p53降解缺陷型NIKS细胞系并用DNA损伤剂处理,流式细胞术检测凋亡情况。研究显示,流式细胞术结果显示稳定表达E6的细胞系在足叶乙甙、丝裂霉素及紫衫醇处理后发生明显的细胞凋亡;表达Y54D或F2V的NIKS细胞经DNA损伤剂处理后凋亡明显低于正常E6表达细胞。研究表明,人乳头瘤病毒E6的表达能够促进角质生成细胞凋亡的发生,这种促凋亡作用与细胞内p53的表达相关。
- 刚毅王红红赵丽娜李颖钊刘志国
- 关键词：HPV16E6
- 端粒重复序列结合因子2小干扰核糖核酸逆转胃癌细胞多药耐药性的研究被引量：1
- 2011年
- 阿霉素（Adriamycin，ADR）和依托泊苷是临床常用的肿瘤化学治疗药物，主要作用机制为抑制DNA拓扑异构酶，导致DNA双链断裂（double—strand DNA breaks，DSB）。肿瘤细胞发生耐药与多种机制有关，其中对DNA损伤修复的影响是其中重要的一环。端粒重复序列结合因子2（telomeric repeat binding factor2，TRF2）能够通过维持端粒末端的T环结构，防止端粒被DNA损伤修复机制检测为DSB，维持端粒的正常结构和功能。
- 宁寒冰王艳红张连峰时永全刘志国樊代明
- 关键词：细胞多药耐药性小干扰核糖核酸DNA损伤修复DNA拓扑异构酶DNA双链断裂逆转
- 腺病毒细菌重组系统表达Crg-2蛋白的实验研究被引量：1
- 2006年
- 目的利用腺病毒的细菌重组系统表达同时具有免疫趋化及血管抑制活性的趋化性细胞因子Crg-2重组蛋白。方法首先在大肠杆菌BJ5183中将穿梭质粒pShuttle-cmv/crg-2与AdE1区基因缺失的骨架质粒pAdEasy-1进行同源重组,筛选后脂质体法转染入具有AdE1区组成性表达的293包装细胞中进行病毒包装、扩增;Westernblot检测病毒感染293细胞的蛋白表达;趋化实验检测感染细胞上清对激活T淋巴细胞的趋化活性。结果穿梭质粒pShuttle-cmv/crg-2与骨架质粒pAdEasy-1重组后,经酶切及PCR鉴定获得重组腺病毒基因组质粒pAd/crg-2;病毒Ad/crg-2经包装并扩增后,用组织培养感染半数剂量法(TCID50)法测定病毒滴度达4×109TCID50/L,感染细胞经Westernblot检测有一接近Mr10000蛋白条带,分泌上清对激活的脾淋巴细胞有明显的趋化作用。结论采用细菌重组法成功获得重组腺病毒Ad/crg-2,可高效表达趋化性细胞因子Crg-2。
- 宁寒冰赵丽娜李婷婷王晓霞李继昌刘志国樊代明
- 关键词：腺病毒同源重组趋化因子
