河南省医学科技创新人才工程项目(20001102)
- 作品数：5 被引量：62H指数：3
- 相关作者：王丽娅杨子建孙声桃杨潇远屈超义更多>>
- 相关机构：河南省眼科研究所郑州大学上海中医药大学更多>>
- 发文基金：河南省医学科技创新人才工程项目河南省杰出人才创新基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 多重聚合酶链反应对真菌性角膜炎快速诊断与菌属鉴定的实验研究被引量：2
- 2007年
- 目的探讨多重聚合酶链反应（PCR）对真菌性角膜炎快速诊断并同时鉴定致病菌类型的临床应用。方法通过建立多重PCR体系，对腐皮镰孢菌、禾谷镰孢菌、木贼镰孢菌、串珠镰孢菌、烟曲霉菌、黄曲霉菌、黑曲霉菌、新月弯孢菌及牵连青霉菌标准菌株的DNA进行检测，并将此方法应用于临床分离菌株和临床标本的检测。结果在本多重PCR体系中，镰孢菌属、曲霉菌属、牵连青霉菌及新月弯孢菌DNA的扩增条带长度分别为360、430、245及300bp。人基因组DNA及其他眼部常见致病微生物DNA未扩增出条带，表明多重PCR体系具有高度的特异性。多重PCR体系的敏感性为10fg。结论多重PCR体系可对临床常见角膜致病真菌快速诊断并鉴定到菌属，特异性强，敏感度高。
- 王丽娅杨子建杨潇远孙声桃
- 关键词：角膜炎聚合酶链反应
- 多重PCR对真菌性角膜炎主要致病菌的菌属鉴定被引量：7
- 2007年
- 目的:建立多重PCR体系对真菌性角膜炎主要致病真菌进行快速诊断并同时进行菌属鉴定的方法。方法:建立两个多重PCR体系(体系1和体系2),对真菌性角膜炎九种主要致病真菌DNA进行检测,观察该体系对真菌临床菌株、人类基因组及其他眼部常见致病微生物DNA的检测结果。结果:体系1对镰孢菌属扩增均产生约360bp的特异产物,对曲霉菌属、牵连青霉菌和新月弯孢菌扩增均产生约470bp的特异产物。体系2对镰孢菌属、曲霉菌属均无特异产物,而对牵连青霉菌产生了360bp的特异产物,对新月弯孢霉产生了300bp的特异产物。根据DNA模板在两个多重PCR体系中扩增出的不同特异条带可将九种真菌分为四个菌属。57株真菌临床菌株中55株的鉴定结果与常规鉴定结果一致。两体系对人类基因组及其他眼部常见致病微生物DNA的扩增结果均为阴性。结论:通过两个多重PCR体系检测可将真菌性角膜炎在菌属水平进行诊断及鉴定。该方法具有快速、简便、特异、灵敏的特点,具有较好的临床应用前景。
- 屈超义闫元奎王丽娅孙声桃杨潇远李振勇唐罗生
- 关键词：眼感染角膜多重聚合酶链反应
- 多重PCR检测角膜致病真菌体系优化的探索被引量：3
- 2006年
- 目的探索多重PCR体系中各成分的最适组合,以便在真菌性角膜炎的诊断中获得准确、可靠的结果。方法对参与PCR基因扩增体系的成分在一定范围内设置不同的浓度或参数组,进行单因子或复因子检测,观测各因子在不同条件下对扩增结果的影响。结果多重PCR体系中各组分及退火温度等都会对反应产生一定的影响。优化后的反应体系体积为30μl:20×PCR Buffer 1.5μl,MgC l22 mmol/L,dNTP 200μmol/L,引物各10 pmol,Taq DNA聚合酶2.0μl,DNA模板2μl;PCR反应参数:预变性94℃300 s,变性94℃60 s,退火55℃60 s,延伸72℃45 s,35个循环,终延伸300 s。结论多重PCR扩增体系通过对各种成分、因子的优化,可以达到特异性高且稳定可靠的目的。
- 杨子建王丽娅
- 关键词：多重PCR真菌性角膜炎
- 角膜炎常见致病真菌DNA快速提取方法的探索被引量：12
- 2005年
- 杨潇远王丽娅李振勇李智涛屈超义孙声桃
- 关键词：真菌性角膜炎DNA提取致病真菌病原体检测真菌细胞壁
- 河南地区真菌性角膜炎病因学及流行病学分析被引量：41
- 2006年
- 目的调查报告真菌性角膜炎病人的流行病学特征及易患因素。方法对确诊为真菌性角膜炎的1074例病人进行回顾性分析,评估流行病学特征及患病的危险因素。结果真菌性角膜炎的发病呈上升趋势,635例(59.1%)的患者为男性,21-60岁是发病集中年龄,911例(85%)患者的职业是农民,448例(41.7%)患者有明确的外伤史,就诊史明确的患者中731例(97%)在一周内就诊于各级医疗机构而被诊断为真菌性角膜炎的仅为22%。结论真菌性角膜炎是严重的致盲性眼病,其发病率呈上升趋势。应提高对该病的认识和诊断水平,对具有患病危险因素的患者应进行积极的抗真菌治疗。
- 王丽娅杨子建张月琴赵丽娜
- 关键词：真菌性角膜炎病因学流行病学
