兵团博士基金(2010JC09)
- 作品数：10 被引量：30H指数：3
- 相关作者：孟庆玲乔军才学鹏赵海龙陈创夫更多>>
- 相关机构：石河子大学中国农业科学院兰州兽医研究所新疆畜牧科学院更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 少孢节丛孢菌丝氨酸蛋白酶家族基因的克隆及生物信息学分析被引量：1
- 2015年
- 本研究在国内首次对少孢节丛孢菌新疆分离株(XJ-A1)丝氨酸蛋白酶家族相关基因P12、P186和P233进行了扩增、克隆及测序,对其编码蛋白信号肽、疏水性与亲水性、高级结构、功能域进行预测和分析。结果显示:3个不同的丝氨酸蛋白酶均含有信号肽和天冬氨酸(D)、组氨酸(H)和丝氨酸(S)3个活性位点,表明它们均属于胞外分泌性Subtilase家族;同时,都含有2个潜在的N末端糖基化位点及2个与底物结合的S1区。系统发生分析发现,P12、P186和P233与其他不同地域、不同种属的丝氨酸蛋白酶基因亲缘性较远。本研究为研发预防动物消化道线虫的生物防控奠定了前期基础。
- 赵海龙孟庆玲乔军陈双庆谢堃罗建勋才学鹏
- 关键词：少孢节丛孢菌丝氨酸蛋白酶基因克隆生物信息学
- 少孢节丛孢菌胞外丝氨酸蛋白酶P186基因的克隆、序列分析及表达被引量：1
- 2014年
- 根据GenBank中少孢节丛孢菌丝氨酸蛋白酶P186基因序列设计特异性引物，运用RT-PCR扩增获得目的基因片段，构建重组表达质粒pET32a-P186，转化到大肠杆菌BL21（DE3），以IPTG进行了诱导表达。结果表明，P186基因cDNA全长为1224 bp，编码407个氨基酸，其中第1～21位为信号肽序列，氨基酸序列的第156～167位、192～202位、343～353位分别是天冬氨酸（Asp160）、组氨酸（His192）、丝氨酸（Ser345）活性位点所在区域，属于Subtilase家族，包括2个潜在的N-联糖基化位点（ Asn249、Asn342）及与底物结合的S1区（ SBP） Ser251 Ile252 Gly253和Ala277 Ala278 Gly279。SDS-PAGE分析结果显示，表达产物的分子质量约为62 kDa。 Western Blot 分析结果表明，P186重组蛋白可以与抗蛋白粗提液多克隆抗体发生反应。为了揭示少孢节丛孢菌捕食线虫的分子机制，首次克隆并表达了少孢节丛孢菌丝氨酸蛋白酶P186基因，为进一步研究丝氨酸蛋白酶P186的生物学功能奠定了基础。
- 赵海龙孟庆玲乔军陈双庆王国超谢堃胡政香才学鹏
- 关键词：少孢节丛孢菌克隆
- 捕食线虫性真菌的分离鉴定及氨基酸对其捕食器诱导效应被引量：1
- 2014年
- 为了解新疆阿勒泰地区的捕食线虫性真菌分布情况,采用玉米粉琼脂培养基(CMA)培养分离阿勒泰地区土壤中的捕食线虫性真菌,通过对纯化后菌株的形态学观察和分子生物学分析,鉴定出5株少孢节丛孢属真菌和1株圆锥节丛孢菌。另外用质量浓度分别为0.5,0.05,0.005 g/L的L-苯丙氨酸、L-色氨酸、L-蛋氨酸和L-缬氨酸对已分离的圆锥节丛孢菌AS3株进行捕食器生成的诱导反应,发现各组氨基酸对捕食器的产生均有诱导效应,但质量浓度为0.05 g/L的L-苯丙氨酸诱导产生的捕食器总数最多。为利用捕食线虫性真菌进行生物防控奠定了理论基础。
- 陈双庆孟庆玲乔军赵海龙王俊伟王为升罗建勋才学鹏
- 关键词：捕食线虫性真菌氨基酸
- 新疆塔城地区绵羊蠕形蚤形态学观察与分类鉴定被引量：2
- 2012年
- 为有效防控新疆塔城地区流行的一种不明绵羊外寄生虫病,本实验通过眼观、解剖镜、数码显微镜观察对该寄生虫进行形态学分类和鉴定研究。结果表明,蚤体大小6 mm～8 mm,饱血后12 mm～15 mm,头胸部占整个体长的10%左右。头胸黑褐色,腹部白色略灰;体表有稀少的鬃毛,无额突,下唇须节数17～22节。3对足,后足胫节依次着生1 2 2 2根粗鬃,中间腹节背板气门稍大于眼。从形态学鉴定该外寄生虫属于蠕形蚤科(Vermipsyllidae)长喙蚤属(Dorcadia)的羊长喙蚤(D.ioffi),但与典型的羊长喙蚤存在形态学差异,该长喙蚤是否为新的亚种或变种尚待进一步研究。
- 赵春光张金生孟庆玲乔军石国界才学鹏陈创夫
- 关键词：蠕形蚤形态学观察绵羊
- 新疆塔城地区绵羊细粒棘球蚴流行株基因分型研究被引量：1
- 2014年
- 为了探明新疆塔城地区绵羊细粒棘球蚴流行株基因型,根据GenBank公布的12S rRNA基因和CO1基因分别设计特异性引物,对58个绵羊细粒棘球蚴包囊进行PCR检测,再通过CO1特异性引物对检测阳性病料进行PCR扩增、测序及基因分型。通过12SrRNA基因检测发现58份样品均为阳性;对所测得的58条CO1基因序列分析,发现新疆塔城地区绵羊细粒棘球蚴流行株基因型均为G1型,且CO1基因序列存在多态性,为塔城地区绵羊细粒棘球蚴病的防控提供了科学依据。
- 宋雪梅程子兵王辉胜刘田莉乔军孟庆玲张金生陈创夫
- 关键词：细粒棘球蚴基因型绵羊
- 少孢节丛孢菌XJ-A1几丁质酶基因的克隆及生物信息学分析被引量：6
- 2015年
- 为研究捕食线虫性真菌几丁质酶的功能,在国内首次对少孢节丛孢菌XJ-A1几丁质酶AO-801和AO-483基因进行扩增、克隆及测序,并对其编码蛋白信号肽、疏水性与亲水性、高级结构、功能域进行预测和分析。结果显示,2个不同蛋白均具有典型的几丁质酶催化区保守序列SXGGW和DGXDXDWE,属于糖苷水解酶18家族几丁质酶,无信号肽序列,表明这2个蛋白为非分泌型蛋白,二级结构以无规则卷曲、α-螺旋和β-折叠为蛋白的主要结构元件,三级结构中有(α/β)8的圆桶形结构。系统发育分析表明,几丁质酶AO-801和AO-483与昆虫病原真菌几丁质酶的亲缘关系更为接近,说明它们所产生的几丁质酶在侵染宿主的过程中发挥着类似的功能,并且不同来源真菌几丁质酶根据分子质量的差异形成3个不同的进化分枝。
- 赵海龙孟庆玲乔军贡莎莎胡政香刘田莉才学鹏陈创夫
- 关键词：少孢节丛孢菌几丁质酶生物信息学
- 不同保存方法对少孢节丛孢菌存活及捕食活性的影响
- 2016年
- 为了探讨少孢节丛孢菌分生孢子及菌丝长期保存方法,以分生孢子萌发、菌丝生长、产生捕食器和捕食能力为指标,比较少孢节丛孢菌分生孢子及菌丝在不同保存条件下的保存效果。结果表明,在3种保存溶液中、-20℃条件下冻存3a的分生孢子没有萌发长出菌丝,而在4℃条件下保存3a的分生孢子仍可以萌发长出菌丝,且能产生捕食器捕食线虫。在固体培养基CMA和YPSSA生长的菌丝于-20℃或4℃条件下保存2a,菌丝仍可生长并产生捕食器捕食线虫;但在-20℃保存2a的菌丝复苏后接种对绵羊粪便中线虫的捕食活性较冻存前有所下降。研究结果提示,少孢节丛孢菌分生孢子可在3种保存溶液中4℃条件下及在固体培养基CMA、YPSSA中于-20℃或4℃条件下均可长期保存,但在3种保存溶液中4℃条件下菌株的捕食活性最高。
- 孟庆玲贡莎莎乔军赵海龙张星星罗建勋朱兴全
- 关键词：少孢节丛孢菌捕食线虫性真菌菌种保存
- 食线虫真菌侵染性胞外酶研究进展被引量：4
- 2017年
- 食线虫真菌作为病原线虫的自然天敌,能够通过捕捉、寄生、产生毒素和胞外酶侵染的方式杀死线虫。胞外酶(包括丝氨酸蛋白酶、几丁质酶和胶原蛋白酶)作为重要的毒力因子在侵染线虫过程中能够降解线虫角质层和虫卵卵壳,在线虫生物防治中显示出巨大的应用潜力。本文对近年来食线虫真菌胞外酶的研究概况及与之相关的分子生物学研究进展进行了综述,并对食线虫真菌胞外酶应用于线虫生物防治的前景进行了展望。
- 赵海龙孟庆玲乔军贡莎莎才学鹏
- 关键词：食线虫真菌丝氨酸蛋白酶几丁质酶胶原蛋白酶分子生物学
- 捕食线虫性真菌—少孢节丛孢菌口服生物制剂安全性试验被引量：3
- 2014年
- 为研究少孢节丛孢菌口服生物制剂的安全性,将20只6月龄绵羊分成4组,前3组分别灌服含有1.0×105、1.0×106、1.0×107少孢节丛孢菌分生孢子口服生物制剂,第4组为对照组灌服灭菌的生理盐水,灌服后连续30d观察绵羊的各项临床指标;并在7d后每组分别剖检2只绵羊,无菌采集绵羊各器官组织,进行组织切片和少孢节丛孢菌的分离鉴定;另外,将12只感染捻转血矛线虫后的绵羊分成3组,灌服3个不同剂量的生物制剂后测定其对粪便中线虫的捕食活性。结果表明,绵羊的精神状态、食欲、饮水、体温、粪便、增量正常;绵羊肝脏、脾脏、肾脏、肠道淋巴结等组织器官没有出现病理变化;也未从上述组织中分离出少孢节丛孢菌;3个不同剂量的生物制剂均可显著降低绵羊粪便中的幼虫数量。研究结果证实,少孢节丛孢菌口服生物制剂安全有效,无毒副作用。
- 孟庆玲乔军王辉胜王为升陈双庆王光雷陈创夫
- 关键词：捕食线虫性真菌少孢节丛孢菌安全性
- 新疆犊牛源大肠杆菌系统进化及其耐药特性被引量：13
- 2016年
- 本研究利用三重PCR的方法对新疆犊牛源大肠杆菌临床分离株进行系统进化分群,对不同进化群的菌株进行致病性和16种药物的敏感性试验。结果：粪便样品中分离出的127株大肠杆菌中非致病群A（37.8%）和高致病群D（30.7%）菌株分布相对较多,其次是低致病群B1（18.1%）和高致病群B2（13.4%）;其中腹泻犊牛源（B2＋D）群大肠杆菌明显多于健康犊牛。药敏结果显示,犊牛源大肠杆菌多重耐药表型的菌株占85.0%,主要分布在3耐~7耐,其中腹泻犊牛携带的大肠杆菌耐药率高于健康犊牛,D群大肠杆菌耐药率最高,B2群耐药率最低,A群和B1群居中。结论：新疆犊牛源大肠杆菌耐药性比较严重,应受到重视。
- 张星星乔军孟庆玲陈诚刘田莉孟丹于伟伟才学鹏陈创夫
- 关键词：大肠杆菌耐药性犊牛
