天津市自然科学基金(013804311)
- 作品数:8 被引量:78H指数:5
- 相关作者:呼文亮徐瑞成贾彩云张莉齐刚更多>>
- 相关机构:武警医学院河南大学武警医学院附属医院更多>>
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- 9-顺式维甲酸对胃癌细胞周期及周期因子表达的影响被引量:5
- 2007年
- 目的探讨9-顺式维甲酸(9-cisRA)抑制胃癌细胞生长及其机制。方法RT-PCR检测9-cisRA作用MGC80-3细胞前后细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和周期蛋白依赖性激酶4(CDK4) mRNA表达的变化;流式细胞术和MTT法检测其对细胞周期和生长抑制的作用;电镜观察细胞形态学改变。结果10μmol/L9-cisRA作用MGC80-3细胞96h时,CyclinD1和CDK4 mRNA表达均显著下降(P<0.01);9-cisRA对MGC80-3细胞生长抑制作用呈时间和剂量依赖性;9-cisRA诱导MGC80-3细胞阻滞于细胞周期的G1期,并呈典型的凋亡特征性的“亚G1峰”和形态学改变。结论9-cisRA对MGC80-3细胞有显著的生长抑制和诱导凋亡作用,与抑制CyclinD1和CDK4表达将细胞周期阻滞于G1期有关。
- 周艳红徐瑞成呼文亮
- 关键词:胃肿瘤9-顺式维甲酸细胞周期
- 蟾酥及其有效成分的药理作用及机制研究进展被引量:47
- 2003年
- 高艳荣张莉张磊呼文亮齐刚
- 关键词:蟾酥蟾毒灵脂蟾毒配基药理作用
- 蟾蜍灵对白血病U937细胞生长抑制和凋亡诱导作用被引量:5
- 2005年
- 贾彩云呼文亮俞小瑞于杰徐瑞成
- 关键词:蟾蜍毒素蟾蜍灵U937细胞凋亡诱导强心
- 蟾蜍灵对K562细胞凋亡诱导作用及bcl-2基因表达的影响被引量:1
- 2013年
- 目的探讨中药蟾酥有效成分蟾蜍灵(bufalin)对人白血病细胞系K562细胞增殖和凋亡及bcl-2基因表达的影响。方法MTT实验测定K562细胞对蟾蜍灵的敏感性;原位缺口末端标记法(TUNEL)观察细胞凋亡率;琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡的DNA断裂情况;半定量RT—PCR技术检测bcl-2mRNA表达。结果蟾蜍灵对K562细胞生长具有明显的抑制作用,MTT实验显示,蟾蜍灵对K562细胞的IC50值为0.013μmol·L^-1,统计学分析表明差异具有显著性(P〈0.01);蟾蜍灵可明显诱导K562细胞调亡(P〈0.01),药物作用6h、12h和24hK562细胞的凋亡率分别为20.36%、34.35%和48.16%;经琼脂糖电泳,蟾蜍灵作用细胞可见到DNA梯形条带;bcl-2mRNA表达3h开始下降,6~12h持续下调,与对照组相比具有显著差异(P〈0.01)。结论蟾蜍灵对K562的增殖抑制作用可能是因为它的凋亡诱导作用,而K562细胞凋亡可能是由于bcl-2基因表达改变。
- 贾彩云石贞玉呼文亮马远方
- 关键词:蟾蜍灵白血病K562细胞凋亡基因表达BCL-2
- 9-顺式维甲酸诱导胃癌MGC803细胞周期阻滞和凋亡的作用机制被引量:6
- 2006年
- 背景与目的:9-顺式维甲酸(9-cisretinoicacid,9-cisRA)对胃癌的抗癌活性及机制尚不清楚,本研究以MGC803为靶细胞观察9-cisRA对胃癌的作用。方法:采用RT-PCR法检测维甲类X受体α(recinoidXreceptor!,RXRα)、细胞周期蛋白CyclinD1和细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4mRNA表达,流式细胞术检测细胞周期,MTT实验检测9-cisRA作用MGC803细胞后生长抑制情况,Hoechst33342/PI双荧光染色和琼脂糖凝胶电泳检测凋亡,免疫细胞化学检测凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达。结果:0.1~10μmol/L9-cisRA作用MGC803细胞96h,能显著抑制细胞增殖。10μmol/L9-cisRA分别作用48、72和96h,G1期细胞随着作用时间的延长而增加,呈明显的G1期阻滞。作用72h后,细胞出现核染色质凝集、DNA片段化等凋亡特征;从作用48h开始,Bcl-2表达即显著下降。在MGC803细胞中RXRα表达较弱,经10μmol/L9-cisRA作用48h其表达水平显著增加(P<0.01);作用96h,细胞中CyclinD1和CDK4表达显著降低(P<0.01)。结论:9-cisRA能明显诱导MGC803细胞周期G1期阻滞和凋亡,该作用可能与其下调细胞周期因子CyclinD1和CDK4表达有关。
- 徐瑞成周艳红呼文亮
- 关键词:MGC803细胞9-顺式维甲酸细胞周期凋亡
- 蟾蜍灵对白血病K562细胞生长抑制机制被引量:5
- 2013年
- 目的探讨中药蟾酥有效成分蟾蜍灵对人白血病细胞系K562细胞增殖和凋亡的影响。方法倒置光显微镜、荧光显微镜、透射电镜观察细胞形态结构改变;MTT实验测定K562细胞对蟾蜍灵的敏感性;琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡的DNA断裂情况;流式细胞术分析蟾蜍灵对细胞周期的影响。结果在光镜、荧光显微镜和电子显微镜下,蟾蜍灵作用K562细胞的形态和结构发生明显改变;蟾蜍灵对K562细胞的生长具有明显的抑制作用,与对照组细胞进行比较,差异具有显著性(P<0.05);MTT实验显示,蟾蜍灵对K562细胞的IC50值为0.013μmol/L,统计学分析证明,差异具有显著性(P<0.01);蟾蜍灵可明显诱导K562细胞调亡;经琼脂糖电泳,蟾蜍灵作用细胞可见到DNA梯形条带;蟾蜍灵可阻滞K562细胞于G2/M期。结论①蟾蜍灵对K562细胞的增殖抑制作用可能是因为它的凋亡诱导作用;②蟾蜍灵诱导K562细胞凋亡可能归功于G2/M期阻滞。
- 贾彩云王艳鸽呼文亮马远方
- 关键词:蟾蜍灵白血病K562细胞凋亡诱导
- RP-HPLC法测定大鼠血清中蟾蜍灵浓度被引量:8
- 2004年
- 目的:建立反相高效液相色谱法测定大鼠血清中蟾蜍灵浓度。方法:血清样品用乙醚-乙酸乙酯(5:1)提取两次,40℃水浴氮气吹干,残留物用甲醇溶解后进样。色谱柱为Shim-pack VP-ODS柱(4.6 mm×150mm,5 μm),流动相为甲醇-水(70:30),流速1.0 mL·min~1,紫外检测波长298 nm,柱箱温度30℃。内标物为华蟾酥毒基。结果:本法最低检测浓度为0.05μg·mL~1,线性范围为0.1-1.6μg·mL-1,r=0.9977。日内精密度RSD小于4%,日间RSD小于10%,蟾蜍灵的萃取回收率为84.0%。结论:本法快速、准确、灵敏,可用于蟾蜍灵的体内药物动力学研究。
- 张莉白雪齐刚陈小义呼文亮
- 关键词:蟾蜍灵血清RSD华蟾酥毒基
- PPARγ和RXRα的表达上调增强了对肿瘤细胞生长的抑制作用被引量:9
- 2007年
- 目的研究过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPAPγ)和维甲类X受体α(RXRα)在人消化系统肿瘤(胃癌MGC803、结肠癌LOVO、肝癌SMMC7721)细胞中的表达及其对配体作用的反应。方法采用MTT检测细胞生长;半定量RT-PCR法检测PPARγ和RXRαmRNA的表达。结果吡格列酮(PGZ)单独作用及与9-顺式-维甲酸(9-cis-RA)联合作用72 h,对MGC803和SMMC7721产生较强的抑制作用,联合作用组的抑制作用显著强于PGZ单独作用组(P<0.01),但对LOVO的抑制作用不明显。PPARγ和RXRα在MGC803细胞中有较强表达,在SMMC7721和LOVO细胞中表达较弱。PGZ能显著上调MGC803和LOVO细胞中PPARγ的表达,联合作用组PPARγ表达比PGZ单独作用组显著升高(P<0.05);9-cis-RA能显著上调MGC803和LOVO细胞中RXRα的表达,联合作用组RXRα表达与9-cis-RA单独作用组无明显差别。结论在MGC803、LOVO和SMMC7721肿瘤细胞中,MGC803细胞PPARγ和RXRα表达最强,这对配体发挥作用可能是必需的,配体发挥的抑制细胞生长的效应可能与其介导的信号途径有关。
- 徐瑞成孟爱国呼文亮
- 关键词:MGC803细胞SMMC7721细胞LOVO细胞PPARΓ