国家重点基础研究发展计划(2002CB713804) 作品数:44 被引量:134 H指数:7 相关作者: 章扬培 宫锋 李素波 高红伟 鲍国强 更多>> 相关机构: 军事医学科学院 北京市红十字血液中心 中国科学院 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 北京市优秀人才培养资助 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 化学工程 理学 更多>>
mPEG修饰红细胞的动物实验 被引量:4 2006年 本研究采用异硫氰酸荧光素标记鼠、猕猴、猪和人的修饰与未修饰自体和异体红细胞(RBC)并给小鼠和猕猴实施输注,观察回输体内RBC24小时存活率的变化和差异。结果发现未修饰小鼠RBC在小鼠体内24小时存活率为74%,2.0mmol/LmPEG-SPA修饰的小鼠RBC在小鼠体内24小时存活率为45%,两者间有显著差异;未修饰人RBC在小鼠体内24小时存活率为8%,2.0mmol/LmPEG-SPA修饰人RBC在小鼠体内24小时存活率为5%,两者间无显著差异。修饰的猕猴RBC自体回输后24小时的存活率大于90%,而修饰的人RBC和猪RBC在给猕猴回输后2小时其存活率已降至零。结论RBC标记方法及不同种实验小鼠的选择对小鼠实验结果影响不大,但mPEG种类和浓度对鼠RBC寿命的有一定程度影响。用鼠RBC做自体回输来评价mPEG修饰人RBC的中mPEG是否影响人红细胞的寿命是不可靠的,修饰人RBC回输给小鼠可以作为评价修饰人RBC寿命和安全性的动物模型。大哺乳动物异种RBC输注很难观察到修饰RBC的存活率和寿命长短。适合评价修饰人RBC寿命和安全性的大动物模型有待于进一步探索。 邱艳 檀英霞 李立立 李素波 吕秋霜 查袆 章扬培关键词:红细胞 输血 动物模型 Human RBCs blood group conversion from A to O using a novel α-N-acetylgalactosaminidase of high specific activity 被引量:5 2008年 α-N-acetylgalactosaminidase (αNAGA) can convert group A human red blood cells (RBCs) to group O. One novel αNAGA gene was cloned by PCR from Elizabethkingia meningosepticum isolated from a domestic clinical sample. Pure recombinant αNAGA was obtained by genetic engineering and protein purification with a calculated molecule of 49.6 kD. αNAGA was selective for terminal α-N-acetylgalacto-samine residue with a high specific activity. αNAGA could completely remove A antigens of 1 U (about 100 mL) group A1 or A2 RBCs in 1 h at pH 6.8 and 25℃ with a consumption of 1.5 or 0.4 mg recombinant enzyme. Enzyme-converted group A RBCs did not agglutinate after being mixed with monoclonal anti-A or sera of groups A,B,AB and O. Other blood group antigens except ABO had no change. FCM analy-sis showed that A antigens and A1 antigens disappeared while H antigens increased. It indicated that αNAGA successfully converted human blood group A RBCs to universally transfusable group O RBCs without the risk of ABO-incompatible transfusion reactions. This αNAGA was suitable for producing universal RBCs to increase clinical transfusion safety,improve the RBCs supply,and to decrease transfusion cost and support transfusion service in case of emergency. YU ChengYu XU Hua WANG LiSheng ZHANG JianGeng ZHANG YangPei关键词:输血反应 A抗原 免疫反应 mPEG-SPA修饰红细胞的主侧配血实验研究 被引量:2 2010年 目的探讨mPEG-SPA化学修饰的不同血型红细胞运用于临床主侧配血的适应性。方法先用mPEG-SPA化学修饰不同血型红细胞得到mPEG-SPA修饰红细胞,同时在红细胞修饰前后做定型试验以证实成功修饰;然后将mPEG-SPA修饰红细胞与40份不同血型的新鲜冰冻血浆和91份临床疑难配血标本分别用5种临床输血常用的配血方法(盐水法、间接抗球蛋白法、低离子介质间接抗球蛋白法、聚乙二醇间接抗球蛋白法和微柱凝胶卡法)进行主侧配血试验。结果 mPEG-SPA修饰红细胞与不同血型的合格新鲜冰冻血浆的主侧配合率为100%(40/40);与临床患者的疑难配血血清的主侧配合率为74.72%(68/91),明显高于这些疑难配血标本的临床配血配合率22.94%(312/1 360)(2χ=118.32,v=1,P<0.01)。结论采用mPEG-SPA化学修饰红细胞的方法将不同血型的红细胞变成通用的血型红细胞能够适用临床常用的主侧配血方法。 杨海平 邱艳 苗天红 范道旺 查祎 张志新 章扬培关键词:输血 化学修饰 甲氧基聚乙二醇 α-半乳糖苷酶酶解B型长臂猿细胞回输A型长臂猿的研究 被引量:5 2004年 使用基因重组咖啡豆α 半乳糖苷酶体外处理B型长臂猿红细胞 ,使其转变为O型 ,再回输给A型长臂猿 .α 半乳糖苷酶可以清除B型长臂猿红细胞表面B抗原 ,而不影响红细胞结构、功能及其在受体体内存活 .α 半乳糖苷酶酶解的B型红细胞输给A型血的长臂猿 ,未发生输血反应 ,受血猿的血液及尿液常规指标与输血前相比 ,无明显变化 . 刘泽澎 张成林 卢雁平 杨明海 张金国 高新 杨军 贾延军 高红伟 任会明 李素波 章扬培关键词:Α-半乳糖苷酶 长臂猿 输血 血液 特殊理化微环境的构建及其在生物医学领域的应用 被引量:7 2003年 生物医学领域中的微环境是指在实质细胞周围参与组织细胞生理及病理过程的微小特殊区域,它对于调控细胞的运动、增殖、分化、分泌及代谢功能具有重要作用。本文在介绍体内微环境及其组成的基础上,重点阐述了体外微环境构建技术及其在生物医学领域的应用,展望了微环境生理作用机制研究的发展趋势。 于炜婷 薛伟明 王为 刘袖洞 雄鹰 马小军关键词:微环境 基质细胞 细胞外基质 甲氧基聚乙二醇修饰几种红细胞稀有血型抗原的初步研究 被引量:6 2004年 目的 :研究用甲氧基聚乙二醇 (methoxypolyethyleneglycol,mPEG)修饰红细胞稀有血型抗原 ,为制备通用型血寻找可能的途径。方法 :用 3种具有不同端基的mPEG修饰红细胞 ,观察其对红细胞表面 4种稀有血型抗原的修饰效果及对红细胞结构、功能和存活期的影响。结果 :实验表明 ,在 1.0mmol/L时mPEG BTC(苯并三唑碳酸酯端基PEG)就可以使红细胞表面Jka,Jkb,k和P1抗原性消失 ,而对红细胞形态、渗透脆性、自身溶血、乙酰胆碱酯酶、胆固醇、ATP、2 ,3 DPG含量、变形性以及存活期无影响 ,其他 2种mPEG对红细胞修饰效果不好。结论 :mPEG BTC可有效遮蔽红细胞表面的稀有血型抗原 ,对其结构、功能及存活期无影响 。 徐华 李立立 檀英霞 章扬培关键词:甲氧基聚乙二醇 修饰 红细胞 壳聚糖抗菌支架的制备及体外释药性能 被引量:3 2007年 目的:制备壳聚糖抗菌支架并考察吸收性能和体外释药性能。方法:实验于2005-11/2006-04在中国科学院大连化学物理研究所生物医用材料工程组完成。采用不同相对分子质量(Mr 85 000,20 000,585 000,780 000)壳聚糖,在不同壳聚糖质量浓度(2,5,10,12g/L)和不同冷冻温度(-20,-40,-80℃)条件下,用冷冻干燥法制备一系列载磺胺嘧啶银壳聚糖海绵支架。将干燥到恒质量的海绵支架放入磷酸盐缓冲液中,24h后取出海绵支架采用滤纸吸除表面多余液体,立即称湿质量,计算得到海绵支架的吸收性能,吸收性能(%)=(湿质量-恒质量)/恒质量×100%。将海绵支架置于含50mL磷酸盐缓冲液的三角瓶中,置于35℃恒温水浴振荡。按实验设计时间10,20,30,60,90,120,180,240,300min取出释放液样本,采用紫外可见分光光度计于256nm波长处检测释放液的吸光度值,根据标准曲线计算累积释放量。结果:壳聚糖海绵支架吸收磷酸盐缓冲液的质量可达自身质量的20 ̄30倍,并且冷冻温度越高,所形成的海绵支架的吸收能力越强。载磺胺嘧啶银壳聚糖支架体外释药受壳聚糖相对分子质量、壳聚糖溶液质量浓度、冷冻温度的影响,但释药规律基本一致,在前30~60min内有一快速释放,随后保持缓慢平稳的释放。结论:冷冻干燥法制备的载磺胺嘧啶银壳聚糖海绵支架用于创面时,壳聚糖海绵支架可以吸收大量渗出的体液,使载药支架处于湿润的环境,同时磺胺嘧啶银快速从支架内释放出来可以达到抑制细菌生长的目的。 马莉华 马小军关键词:壳聚糖 磺胺嘧啶银 生物材料 利用重组A蛋白偶联的琼脂糖凝胶纯化α-半乳糖苷酶单克隆抗体 被引量:1 2007年 目的:采用一种简单易行的纯化方法获得高纯度α-半乳糖苷酶单克隆抗体。方法:使用重组A蛋白偶联的琼脂糖凝胶捕获和纯化小鼠腹水中的α-半乳糖苷酶单克隆抗体。结果:获得了高纯度、高效价的α-半乳糖苷酶单克隆抗体。结论:应用重组A蛋白偶联的琼脂糖凝胶纯化α-半乳糖苷酶单克隆抗体是一种简单、有效的方法。 田曙光 高红伟 李素波 章扬培 宫锋关键词:Α-半乳糖苷酶 单克隆抗体 琼脂糖凝胶 效价 微囊化肿瘤细胞生长及其基因表达的研究 被引量:5 2006年 目的以人乳腺癌细胞系(MCF-7)为模型,探讨肿瘤细胞在微囊化环境中的生长特性和对基因表达的影响。方法使用大功率高压脉冲微胶囊制备仪制备微囊化MCF-7细胞,观察细胞的生长和代谢特性;待微囊内的细胞体外生长成团后固定、石蜡包埋、制作连续切片,HE染色并免疫组化检测HIF-1、cyclin D1、VEGF、p53、PCNA、BrdU等相关基因的表达。以平面培养细胞做对照。结果人乳腺癌细胞微囊化后可继续生长增殖并聚集成团,同时消耗葡萄糖产生乳酸。微囊化肿瘤细胞表现出较强的增殖活性;当微囊内的细胞团增大到一定程度时中心可出现坏死区,但分布于团块外层的细胞仍具有增殖活性;HIF-1和cyclin D1主要在位于细胞团内部的细胞表达;VEGF的表达与细胞所处位置无关;未检测到p53的阳性表达。平面培养MCF-7细胞可检测到PCNA和VEGF的表达。结论微囊化肿瘤细胞呈三维立体方式生长并存在相关基因的表达,是一种介于体外单层培养和体内移植瘤试验之间的新型肿瘤细胞特性研究、抗肿瘤药物筛选的模型,具有简单、方便和经济等特点。 张旭朗 王为 李锦军 于炜婷 马小军关键词:乳腺肿瘤 微囊化 基因表达 MCF-7细胞 红细胞血型抗原化学修饰的研究进展 被引量:2 2004年 采用化学修饰方法制备免疫原性低的红细胞 ,有可能成为目前解决临床输血反应的一个发展方向。本文综述了mPEG化学修饰红细胞血型抗原采用的工艺以及化学修饰对红细胞形态、结构和功能影响的研究进展。 邱艳 章扬培关键词:红细胞 血型抗原