四川省教育厅资助科研项目(2006A134)
- 作品数：3 被引量：31H指数：3
- 相关作者：刘阳胡松杨淑霞李敏惠邹强更多>>
- 相关机构：成都医学院中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：四川省教育厅资助科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 引物浓度与退火温度不当导致巢式PCR非特异性扩增被引量：19
- 2008年
- 目的探索巢式PCR非特异性扩增的产生原因及消除方法。方法以巢式PCR扩增乙型肝炎病毒(HBV)Sgene为模型,分别使用不同退火温度组合与不同引物浓度组合进行巢式PCR扩增,观察并分析实验结果。结果降低引物浓度或提高退火温度均可消除巢式PCR的非特异性扩增,但提高退火温度有可能影响反应的扩增效率,导致产物量下降甚至得不到产物。结论巢式PCR发生非特异性扩增时,可以提高退火温度或降低引物浓度对反应体系进行优化。
- 刘阳杨淑霞李敏惠李丽梅胡松刘进邹强
- 关键词：巢式PCRHBVGENE
- 三种染色方式下四种核酸染料的灵敏度比较被引量：7
- 2008年
- 目的探讨补镁对高脂高糖膳食诱导大鼠肥胖模型形成的影响及作用机制。使用染胶法、染样品法及后染法比较溴化乙锭(EB)与3种新型核酸染料GoldViewnaII、GoldView及DNA Green染色DNA的灵敏度。方法在琼脂糖凝胶电泳中,分别在3种染色方式下使用4种核酸染料对凝胶中的DNA进行染色,观察并分析电泳结果。结果核酸染料比较结果:GoldViewnaII的灵敏度最高,DNA Green的灵敏度与EB相当,GoldView的灵敏度略低于EB。染色方式比较结果:使用染胶法的灵敏度最高,后染法次之,染样品法最低。结论三种新型核酸染料完全可以替代EB,用于琼脂糖凝胶电泳DNA染色。使用新型核酸染料建议采用染胶法染色DNA。
- 刘阳杨淑霞李敏惠胡松任文娟邹强
- 关键词：琼脂糖凝胶电泳溴化乙锭
- 影响琼脂糖凝胶电泳条带扭曲程度的因素被引量：6
- 2009年
- 在不同的电压与载样量下,分别使用溴化乙锭(EB)与新型核酸染料GoldViewna II及GoldView对凝胶中的DNA进行染色,观察电泳条带扭曲程度,了解电压、载样量与核酸染料对琼脂糖凝胶电泳条带扭曲程度的影响。使用GoldViewna II染色,当电压≥10V/cm时,DNA条带的扭曲程度随载样量增大而加剧;当DNA载样量≥10ng时,DNA条带的扭曲程度随电压升高而加剧。使用EB染色,仅当载样量≥50ng时,条带出现轻微扭曲,扭曲程度与电压无明显关系。结果表明使用GoldView染色,当电压不超过20V/cm或载样量不超过100ng时,DNA条带不扭曲。在琼脂糖凝胶电泳中,若要避免DNA条带扭曲干扰实验结果,使用GoldViewna II染色,若DNA载样量≥10ng,应控制电压≤5V/cm;使用EB染色,载样量应≤50ng;使用GoldView染色,可以使用20V/cm的电压缩短实验时间。
- 刘阳杨淑霞赖翼李敏惠胡松邹强
- 关键词：琼脂糖凝胶电泳
