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江苏省卫生厅科技计划资助项目(H200760)
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王惠民
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痰中增殖诱导配体mRNA定量测定对非小细胞肺癌的诊断价值
2009年
目的建立实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ—PCR)检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者痰中增殖诱导配体(APRIL)mRNA含量的方法,探讨痰脱落细胞APRIL mRNA表达在NSCLC诊断中的意义。方法对2007年8月至2008年5月南通大学附属医院71例NSCLC患者和62例肺部良性病变患者痰中APRIL mRNA进行检测,同时取65名健康成人痰做对照。用RFQ—PCR技术实时检测PCR产物的荧光强度,由软件自动计算出待测样本中靶基因mRNA的准确含量,以靶基因和内参β2-微球蛋白(β2-M)mRNA含量的比值作为评价其表达水平的指标,并与细胞学检查结果进行比较。计量资料采用t检验,所得结果用x^-±s表示;对计数资料采用Х^2检验。结果RFQ—PCR法检测APRIL mRNA含量的线性范围为38~3.8×10^6copies/μl,批内和批间变异系数(CV)分别为8.5%和13.6%。NSCLC组痰中APRIL mRNA表达水平显著高于肺部良性病变组和健康对照组(t值为10.50和11.32,P〈0.01);良性病变组与健康组比较差异无统计学意义(t=0.379,P〉0.05)。以健康组APRIL mRNA的x^-±2s为cut-off值,肺癌组APRIL mRNA表达的阳性率为81.7%(58/71),明显高于肺部良性病变组的3.2%(2/62)和健康对照组的1.5%(1/65)。NSCLC组痰中APRIL mRNA的表达与性别、年龄、吸烟史、TNM分期及淋巴结转移无关(t值分别为1.700、1.014、1.484、1.298及1.186。均P〉0.05),与病理分型和肿瘤部位有关(t值为1.650和1.873,均P〈0.05)。RFQ.PCR阳性率为82%(58/71),高于细胞形态学阳性率的14%(10/71),差异有统计学意义(Х^2=67.68,P〈0.01)。结论RFQ—PCR检测痰中APRIL mRNA含量具有较高的敏感度和特异度,有助于NSCLC的临床诊断。
孙宝兰
朱俐
丁伟峰
景蓉蓉
褚少朋
王惠民
关键词:
配体
聚合酶链反应
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