广州市科技计划项目(2004Z3-E4091)
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
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- 稳定表达GPI-CD80融合蛋白CHO细胞株的构建被引量：2
- 2007年
- 目的将糖基化磷脂酰肌醇(GPI)锚定型人CD80重组基因的真核细胞表达质粒pRM10/GPI-CD80转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO),构建CHO/GPI-CD80稳定表达细胞株。方法将pRM10/GPI-CD80用脂质体法转染CHO细胞,经G418加压筛选出阳性细胞克隆。采用流式细胞术和免疫荧光染色检测CHO/GPI-CD80稳定表达细胞株表达GPI-CD80蛋白的效率的变化。结果转染GPI-CD80基因的CHO细胞在G418筛选下出现阳性克隆,且经过传代后不同代数的克隆细胞表面表达GPI-CD80的阳性率差异无统计学意义。结论pRM10/GPI-CD80在CHO细胞中成功表达,表达稳定且效率较高。
- 刘煜张雪刘胜军林敬明
- 关键词：糖基化磷脂酰肌醇脂质体真核表达
- GPI-CD80融合蛋白的抗肿瘤作用研究被引量：3
- 2007年
- 目的研究GPI-CD80融合蛋白对肿瘤生长的抑制作用及其机制。方法将纯化的GPI-CD80蛋白与HepG2细胞共培养后用丝裂霉素灭活,制成肿瘤疫苗。设单纯丝裂霉素灭活的HepG2细胞为对照疫苗。将两组疫苗与裸鼠脾淋巴细胞共培养,MTT法检测淋巴细胞增殖及细胞因子IL-2、IFN-γ量的变化;乳酸脱氢酶法检测CTL的活性变化;将两组疫苗接种于荷瘤裸鼠,测量裸鼠肿瘤体积的变化。结果脾淋巴细胞经肿瘤疫苗刺激后,OD值、IL-2、IFN-γ的量和CTL的活性均高于对照疫苗组,差异有统计学意义;实验组荷瘤裸鼠平均肿瘤体积小于阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义。结论GPI-CD80融合蛋白能够抑制荷瘤裸鼠瘤体的生长速度,其机制可能与诱导T淋巴细胞增生、刺激细胞因子IL-2、IFN-γ的分泌、增强CTL活性等有关。
- 刘煜刘胜军张雪林敬明
- 关键词：GPICD80肿瘤疫苗
