吉林省科技发展计划基金(20080218)
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 相关作者：闫春梅张雅斌郑伟张家松陈东升更多>>
- 相关机构：吉林省水产科学研究所吉林出入境检验检疫局东丰县畜牧总站更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 嗜水气单胞菌对框镜鲤免疫实验研究
- 2010年
- 嗜水气单胞菌是水产动物的常见致病菌,本研究利用在生理生化和PCR鉴定的基础上确定为嗜水气单胞菌,并经PCR和药物敏感性实验确定对多种抗菌药物具有耐药性的嗜水气单胞菌多重耐药株。用该菌株制备细菌疫苗对框镜鲤进行免疫实验,免疫方法采用浸洗2 min,1.5、3、6个月后分别进行注射攻毒,攻毒实验结果显示免疫保护率60%~95%,实验室安全性检测结果为安全可靠。该方法避免了逐尾鱼注射造成的较大的工作强度,为在生产实践中广泛应用预防多重耐药嗜水气单胞菌所引起的疾病奠定了基础。
- 闫春梅张雅斌李忠强肖志国柴俊海赵全东刘艳辉郑伟
- 关键词：嗜水气单胞菌疫苗免疫
- 锦鲤疱疹病毒TaqMan荧光定量PCR快速检测方法的建立及应用被引量：4
- 2012年
- 为建立快速有效的锦鲤疱疹病毒病检疫方法,根据锦鲤疱疹病毒(KHV)聚合酶基因(Sph)的保守序列设计1对引物和相应的TaqMan探针,建立了一种快速检测锦鲤疱疹病毒病荧光PCR方法。用建立的检测方法对细胞培养物进行检测,并与常规PCR对比,结果荧光PCR灵敏度高于普通PCR,能检出的最低拷贝数为1.6×102/μL。应用该方法对样品进行检测,结果表明:所建立的荧光PCR检测方法4 h内可报告检测结果。该方法具有快速、灵敏、特异及重复性好等特点,适用于锦鲤疱疹病毒的快速检疫。
- 孟庆峰吕文雪单晓枫陈东升王伟利钱爱东
- 关键词：锦鲤疱疹病毒荧光定量PCR
- 锦鲤疱疹病毒组织灭活疫苗研制初探被引量：4
- 2010年
- 本研究的目的是制备针对锦鲤疱疹病毒的组织浆灭活疫苗,用来控制目前集约化养殖鲤鱼大面积暴发的锦鲤疱疹病毒。利用现场采集的病死鱼内脏,匀浆后腹腔注射进行攻毒试验,采集攻毒后病死鱼的内脏匀浆后,加入0.5%甲醛制备组织浆灭活疫苗。确定所制疫苗无杂菌污染后,在实验室内对6组实验鱼采用不同的接种方法进行疫苗接种,同时设立阴性对照组。实验结果表明,所得疫苗可以在一定程度上降低死亡率,但不能100%的控制发病,具体原因有待进一步探讨。
- 闫春梅张雅斌郑伟张家松胡国宏
- 关键词：鲤鱼锦鲤疱疹病毒灭活疫苗
- 应用聚合酶链式反应(PCR)检测锦鲤疱疹病毒被引量：2
- 2010年
- 为建立并优化锦鲤疱疹病毒检测方法,针对目前国内集约化养殖鲤鱼大面积流行的病死现象进行有针对性的检测,对在疫区采集到的病鱼肾脏、肝胰脏、肠等组织,提取基因组DNA,应用锦鲤疱疹病毒特异性引物进行PCR反应,同时设立阴性对照(TE buffer)。通过1%琼脂糖凝胶进行鉴定,与阴性对照比较,在484bp处出现特异性目的条带。经序列测定,所得PCR产物的基因序列与NCBI上锦鲤疱疹病毒的同源率达到99%以上。对同一批次的样品进行重复检测,结果表明该方法具有较好的可重复性,可据此判定结果。通过对锦鲤疱疹病毒的检测,确定了疫区引起框镜鲤(Cyprinus carpio)和建鲤(Cyprinus carpio var Jian)大批死亡的病原为锦鲤疱疹病毒(Koi Herpesvirus,KHV),从而对疫区控制、防治方案的制定提供了理论依据。建议尽快在鲤鱼主要养殖区开展KHV流行病学、诊断与检测及免疫预防等方面的研究。
- 闫春梅张雅斌郑伟熊占山张家松
- 关键词：锦鲤疱疹病毒聚合酶链式反应
