国家自然科学基金(81170135)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
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- NAD对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原mRNA表达的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)对血管紧张素II(AngII)诱导的大鼠心肌成纤维细胞I型胶原mRNA表达的作用。方法提取新生Wistar大乳鼠原代心肌成纤维细胞,传代培养,采用2～4代细胞。实验分为空白对照组,AngII(0.01、0.1、1μmol/L)组,NAD(250μmol/L)组,AngII(1μmol/L)+NAD(250μmol/L)组,FAM组,Sirt1-siRNA+AngII(1μmol/L)组,Sirt1-siRNA组,Sirt1-siRNA+NAD(250μmol/L)组,Sirt1-siRNA+Ang II(1 mol/L)+NAD(250μmol/L)组。刺激24 h后,提取总RNA,Real time RT-PCR法分别检测SIRT1和I型胶原mRNA的表达。结果心肌成纤维细胞I型胶原mRNA的表达随着AngⅡ浓度升高明显增加(P<0.05),呈浓度依赖性。与空白对照组比较,NAD(250μmol/L)组SIRT1 mRNA表达增高(P<0.05)。与AngⅡ(1μmol/L)组比较,AngII(1μmol/L)+NAD(250μmol/L)组I型胶原mRNA的表达明显减少(P<0.01)。相对于FAM组,Sirt1-siRNA转染后各组SIRT1 mRNA的表达减少(P<0.05),而心肌成纤维细胞I型胶原mRNA表达增多(P<0.05)。结论 NAD可以抑制心肌成纤维细胞I型胶原mRNA的表达,SIRT1影响I型胶原mRNA的表达,它们对Ang II诱导的心肌纤维化有保护作用。
- 赵立祥吴新宁王希李娜陈桐帅刘军妮卜培莉
- 关键词：烟酰胺腺嘌呤二核苷酸I型胶原血管紧张素II心肌重构
- Sirt3对人脐静脉内皮细胞衰老的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨沉默信息调节因子相关酶3(Sirt3)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老的影响。方法体外培养HUVECs,合成Sirt3-siRNA序列,Western blotting法筛选出抑制效率最高的序列。将实验分为对照组、Sirt3-siRNA组,Western blotting法检测Sirt3和细胞衰老相关蛋白P16和P21的表达水平,β-半乳糖苷酶染色法检测内皮细胞衰老状态,2',7'-二氯二氢荧光素二乙酯(DCFH-DA)法测定血管内皮细胞活性氧(ROS)的释放。结果与对照组比较,Sirt3-siRNA组β-gal阳性染色率明显增多,Sirt3的蛋白表达量减少,P16和P21的蛋白表达量升高(P<0.05),ROS释放明显增多。结论 Sirt3抑制HUVECs衰老,其作用机制可能是通过调节ROS的释放而实现的。
- 刘辉陈桐帅李娜王舒健李静媛卜培莉
- 关键词：细胞衰老P16蛋白P21蛋白
- 吡格列酮通过调控Sirt3改善高血压引起的心肌纤维化机制被引量：3
- 2017年
- 目的探讨吡格列酮对高血压引起的心肌纤维化的作用及可能机制。方法提取新生SD大鼠心肌成纤维细胞,分为空白对照组、单纯刺激组(血管紧张素Ⅱ1μmol/L)、单纯药物组(吡格列酮10μmol/L)、刺激+药物组、沉默信息调节相关因子3(Sirt3)小干扰+刺激组和Sirt3小干扰+刺激+药物组,采用Western blotting法检测平滑肌肌动蛋白(a-SMA)、β-链蛋白(β-catenin)、胶原I(COL I)和Sirt3等蛋白含量;采用RT-PCR法检测a-SMA、Sirt3、β-catenin和COL I等mRNA表达量;采用细胞免疫荧光法检测COL I表达。结果与空白对照组相比,单纯刺激组a-SMA和COL I的mRNA和蛋白表达明显增加,Sirt3表达减少,β-catenin表达增加,COL I绿色荧光增强,心肌纤维化明显(P<0.05);与单纯刺激组相比,刺激+药物组a-SMA和COL I的mRNA和蛋白表达明显减少,Sirt3表达增加,β-catenin表达减少,COL I绿色荧光减弱,心肌纤维化明显改善(P<0.05);与药物+刺激组相比,Sirt3小干扰+药物+刺激组a-SMA、COL I的mRNA和蛋白表达增加,Sirt3表达减少,β-catenin表达增多,COL I绿色荧光增强(P<0.05)。单纯药物组与药物+刺激组相比,a-SMA、COL I、β-catenin和Sirt3的mRNA和蛋白表达无明显变化(P>0.05);Sirt3小干扰+刺激组和Sirt3小干扰+药物+刺激组相比,a-SMA、COL I、β-catenin、Sirt3的mRNA和蛋白表达无明显变化(P>0.05)。结论吡格列酮能改善高血压心肌纤维化,其作用机制可能与Sirt3激活和β-catenin抑制有关。
- 严芳英单晓兰李静媛张杰闫雪芳杨奕卜培莉
- 关键词：吡格列酮高血压心肌纤维化Β-链蛋白
