山东省卫生厅青年科研基金(JZ13)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：高立芬赵培庆续力云祁建妮孙汶生更多>>
- 相关机构：山东大学更多>>
- 发文基金：山东省卫生厅青年科研基金山东省优秀中青年科学家科研奖励基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 中国汉族人群TRAIL基因多态性的研究被引量：1
- 2008年
- 目的探讨中国汉族人群中TRAIL基因的分布情况及其在相关疾病发生中的作用。方法应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)技术,对265例中国汉族人TRAIL基因第5外显子3′-非编码区1595位点(以mRNA为标准)进行检测,分析基因型频率和等位基因频率在不同性别人群中的分布。结果Hardy-Weinberg平衡吻合度检验显示,本组各等位基因频率期望值和观察值无显著差异,且其基因多态性分布无性别差异,与日本人相比无显著差异(P>0.05),等位基因频率与非洲及美洲高加索人相比均有显著差异(P(0.05)。结论PCR-RFLP方法检测TRAIL基因型特异性高,成熟、稳定;中国汉族人群TRAIL基因第5外显子3′-非编码区1595位点存在C/T突变。
- 闫晓华续力云祁建妮郭春赵培庆高立芬
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因多态性中国汉族
- pcDNA3-HBV瞬时转染对树突状细胞的影响被引量：1
- 2007年
- 目的:研究HBV感染对树突状细胞功能的影响,探讨慢性乙型肝炎患者免疫耐受发生的机制。方法:利用脂质体转染的方法,以携载HBV全基因的真核表达载体pcDNA3-HBV及对照空载体pcDNA3质粒DNA分别转染小鼠骨髓细胞,以细胞因子GM-CSF、IL-4及TNF-α诱导培养树突状细胞,RT-PCR检测转染后HBVPreS1 mRNA的表达。流式细胞术检测转染前后树突状细胞表面分子CD80的表达,3HTdR掺入法观察其刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力,流式细胞术进一步检测NF-κB RelA蛋白的表达。结果:pcDNA3-HBV瞬时转染后树突状细胞CD80表达降低,其刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力下降,NF-κB RelA蛋白表达显著减少。结论:HBV可抑制树突状细胞的分化成熟,降低其刺激T淋巴细胞增殖的功能,这可能是慢性乙型肝炎患者免疫耐受的机制之一。
- 高立芬孙汶生马春红张利宁梁晓红王晓燕郭春陈有海
- 关键词：转染树突细胞
- 稳定高表达小鼠Tim-4巨噬细胞系RAW264.7-T4的建立被引量：2
- 2008年
- 目的建立研究小鼠Tim-4功能的细胞模型。方法常规分离小鼠腹腔巨噬细胞,RT-PCR扩增Tim-4全长基因片段,构建含Tim-4全基因片段的真核表达载体pcDNA3.0-Tim-4,通过BamHⅠ、HindⅢ双酶切及测序鉴定其正确性。利用脂质体将pcDNA3.0和pcDNA3.0-Tim-4分别转染小鼠巨噬细胞系RAW264.7,通过G418加压筛选,建立稳定高表达Tim-4的RAW264.7,并采用RT-PCR、流式细胞术和免疫细胞化学染色法检测Tim-4 mRNA和蛋白的表达水平。结果RT-PCR扩增产物经BamHⅠ、HindⅢ双酶切,与pcDNA3.0连接构建的重组体经酶切和测序,结果与GenBank报道序列一致。RT-PCR结果显示,RAW264.7-T4细胞表达Tim-4 mRNA的水平显著高于对照组,流式细胞术显示RAW264.7-T4高水平表达Tim-4蛋白,免疫细胞化学染色表明Tim-4主要表达于胞膜。结论成功构建了携载小鼠Tim-4全基因的表达载体,并用该重组体建立了稳定高表达Tim-4 mRNA和蛋白的小鼠巨噬细胞系,为进一步探讨Tim-1与Tim-4的相互作用及对免疫细胞功能的影响奠定基础。
- 续力云祁建妮梁晓红鞠瑛孙汶生张利宁赵培庆高立芬
- 关键词：基因TIM-4巨噬细胞小鼠
