卫生部科技专项基金(W2009BX015)
- 作品数：9 被引量：13H指数：2
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- Her2(+)/Her2(-)乳腺癌差异表达microRNAs的生物信息学分析
- 2012年
- 目的通过文献挖掘与生物信息学分析的方法,探讨Her2(+)/Her2(-)乳腺癌之间差异表达的microRNAs可能涉及的生物学功能和信号通路。方法在NCBI数据库的GEO子数据库及EBI数据库中的ArrayEx-press子数据库开展检索,使用关键词"breast cancer"、"microRNA"进行检索,获取Her2(+)/Her2(-)乳腺癌之间差异表达microRNAs。利用microRNAs靶基因预测软件预测所有差异表达microRNAs的靶基因,进行通路分析。结果找到2个在Her2表型不同的乳腺癌中差异表达的microRNAs数据集,利用软件TargetScan预测差异表达microRNAs的靶向基因,取其合集进行富集分析,最后将富集得到的基因利用David数据库进行分析,从而得到了上述差异表达的microRNAs可能具有的生物学功能和参与的调节通路。结论差异表达的microRNAs通过调节靶向基因参与不同信号通路,实现多种生物学功能。
- 曾融张积仁姜茂竹麦仲伦吴钢郑燕芳
- 关键词：乳腺肿瘤小RNA病毒
- 人血型B抗原模拟多肽、Mip3β双表达重组质粒体外转染人黑色素瘤细胞B16的抗肿瘤效应被引量：2
- 2010年
- 目的:将人血型B抗原模拟多肽、Mip3β双表达重组质粒于人黑色素细胞B16转染,检测其对抗肿瘤效应的影响。方法:选用人黑色素瘤细胞株B16,设4个组:A组,转染P1/Fas-Mip3β-pIRES组;B组,转染P1/Fas-pIRES组;C组,转染Mip3β-pIRES组;D组,转染pIRES组。转染方法采用Invitrogen(美国)公司的LipofectamineTM2000脂质体转染的方法(6孔板,8×105孔,2mL体系)。分别流式细胞仪检测细胞凋亡率,进行体外补体介导的细胞杀伤(CDC)实验和抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC)实验,获得细胞活力并进行统计学分析。结果:重组质粒成功转染人黑色素瘤细胞株B16:(1)流式细胞仪检测双表达组组细胞凋亡率87.6%,明显较其他组别高。(2)CDC试验发现最小均值的组合为20g/L组B肽-MIP-pIRES。(3)ADCC试验发现最小均值的组合为40∶1组B肽-MIP-pIRES。结论:人血型B抗原模拟多肽、Mip3β双表达重组质粒能在人黑色素细胞B16转染,诱导肿瘤细胞凋亡,并通过CDC及ADCC效应增强免疫反应。
- 罗敏周媛岑东芝张积仁
- 关键词：黑色素瘤血型抗原重组质粒
- P1/Fas-CCL19双表达重组腺病毒载体的构建及表达鉴定
- 2012年
- 目的利用pAdEasy-1腺病毒包装系统构建血型B抗原模拟多肽P1/Fas-CCL19双表达重组腺病毒,并在体内外试验中验证其表达及可能的疗效。方法应用腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV、骨架质粒pAdEasy-1构建重组腺病毒质粒pAd-CMV-P1/Fas-CCL19并转染至HEK293A细胞,获得重组腺病毒Ad-P1/Fas-CCL19颗粒后进一步感染乳腺癌4T1细胞并鉴定转染4T1细胞内P1/Fas-CCL19mRNA和蛋白质的表达。构建经人B型血红细胞免疫的4T1荷瘤小鼠模型,比较瘤内注射重组腺病毒Ad-P1/Fas-CCL19组、空腺病毒组、0.9%氯化钠溶液组的荷瘤小鼠的肿瘤变化及生存期。结果感染后4T1细胞中P1/Fas-CCL19 mRNA和蛋白质均有表达。瘤内注射重组腺病毒Ad-P1/Fas-CCL19较瘤内注射空腺病毒、0.9%氯化钠溶液明显抑制4T1肿瘤的生长,但三组小鼠的生存期无明显区别。结论 P1/Fas-CCL19重组腺病毒载体成功构建,体内外实验均证明了其稳定表达及有效性,为进一步临床研究奠定了基础。
- 姜兆静李纪强张积仁
- 关键词：腺病毒FASCCL19
- ER表达状态乳腺癌差异表达microRNAs相关信号通路的分析被引量：2
- 2012年
- 目的:利用生物信息的方法,建立一种对不同ER表达状态乳腺癌差异表达microRNAs生物学功能和信号通路系统分析的方法,探讨microRNAs在不同ER状态中可能发挥的调控作用。方法:通过文献挖掘,找出不同ER表达状态乳腺癌差异表达microRNAs,利用预测软件TargetScan、PicTar、miRanda和TarBase数据库得出microRNAs可能靶向的基因集,对靶基因集进行去除随机化的富集分析后,再利用DAVID数据库进行相关生物学功能和信号通路分析。结果:通过文献挖掘的方法找到了5个不同ER表达状态乳腺癌microRNAs差异表达数据集,分别包含了11、43、25、6及19个差异表达的microRNAs。经过靶基因预测及富集后,得到的不同microRNAs靶基因集分别包括1 553、1 750、1 905、1 250和1 826个靶基因。进一步功能及通路分析发现,这些靶基因集可能参与转录相关蛋白质定位及转移、RNA代谢、细胞周期、细胞凋亡和细胞分裂等多个生物学过程,并发现3条共同的BIOCARTA细胞信号通路可能与ER表达调节相关。结论:找到了不同ER表达状态乳腺癌差异表达的microRNAs,并利用生物信息学方法对这些mi-croRNAs进行系统分析,为进一步研究microRNAs在乳腺癌不同分子亚型分化中的调控机制奠定基础。
- 姜茂竹曾融麦仲伦吴钢郑燕芳张积仁
- 关键词：乳腺肿瘤MICRORNAS信号传导计算生物学
- 微波消融对小鼠黑色素瘤动物模型中T淋巴细胞亚群比例和功能的影响被引量：1
- 2014年
- 目的研究微波消融(MA)对小鼠黑色素瘤动物模型中T淋巴细胞亚群的比例和功能的影响。方法建立C57BL/6J小鼠B16-BL6黑色素瘤皮下移植模型;流式细胞术、免疫荧光法分别检测微波消融后荷瘤小鼠瘤内浸润T淋巴细胞比例变化和主要组织相容性复合体-Ⅰ(MHC-Ⅰ)的表达;ELISA法检测微波消融对肿瘤内T细胞细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤环死因子-α(TNF-α)分泌的影响。结果微波消融组小鼠肿瘤内辅助性T细胞(Th)、杀伤性T细胞(CTL)比例显著增高,且肿瘤内细胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α、MHC-Ⅰ分泌显著上调。结论微波消融有效增加CTL比例,并增强局部淋巴细胞抗肿瘤效应。
- 李静姜兆静李纪强郑燕芳张积仁
- 关键词：微波消融黑色素瘤T淋巴细胞细胞因子
- 微波消融治疗小鼠黑色素瘤及对肿瘤血管生成的影响被引量：1
- 2011年
- 目的研究微波消融对小鼠黑色素瘤肿瘤负荷、生存期、肿瘤血管生成的影响。方法建立C57BL/6J小鼠B16-BL6黑色素瘤皮下移植模型,随机分成对照组、微波低剂量组、微波中剂量组、微波高剂量组,比较各组瘤重,病理学检测消融后肿瘤坏死、复发情况,免疫组织化学检测VEGF和CD34表达,计算微血管密度(microvesseldensity,MVD),记录其生存期。结果微波消融各组小鼠肿瘤重量较对照组显著减少(P<0.05);病理学观察发现消融病灶肿瘤细胞大量坏死,肿瘤血管破坏;消融后微血管密度MVD计数及血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)表达显著降低(P<0.05);但微波消融各组同对照组比较不具有生存期优势(P>0.05)。结论微波消融可抑制小鼠消融后黑色素瘤病灶血管新生,并减少肿瘤负荷,但并未延长小鼠生存期。
- 李纪强姜兆静张积仁
- 微波消融对荷恶性黑色素瘤小鼠免疫功能的影响
- 2013年
- 目的:探讨微波消融对荷恶性黑色素瘤小鼠免疫状态的影响。方法:建立C57BL/6J小鼠B16黑色素瘤皮下移植模型,随机分为消融组和对照组。流式细胞术检测血清T淋巴细胞比例;免疫组化检测肿瘤组织CD68、CD49b的表达;ELISA法检测瘤内IFN-γ、IL-2、TNF-α含量;观察皮下移植瘤体积变化。结果:与对照组相比,消融组血清CD4+T淋巴细胞比例显著增高(P<0.01),CD25+T淋巴细胞比例显著降低(P<0.01),CD8+T淋巴细胞比例差异无显著性(P>0.05)。与对照组比较,消融组肿瘤组织CD68、CD49b的含量显著提高(P<0.01)。消融组IFN-γ、IL-2、TNF-α含量显著高于对照组(P<0.01)。在不同观察时间点,消融组皮下移植瘤体积均显著小于对照组(P<0.01)。结论:微波消融能上调抗肿瘤T淋巴细胞亚群,激活天然免疫细胞,增加抗肿瘤细胞因子,从而产生抗肿瘤效应。
- 李纪强姜兆静陈俊曾融张积仁
- 关键词：黑色素瘤微波消融T淋巴细胞细胞因子
- 氩氦刀冷冻联合CpG寡脱氧核苷酸治疗小鼠皮下移植性结肠癌被引量：2
- 2010年
- 目的 探讨氩氦刀冷冻消融联合CpG寡脱氧核苷酸（ODN）对小鼠移植性结肠癌的治疗作用.方法 BALB/c小鼠皮下接种结肠癌CT26细胞建立荷瘤鼠模型,小鼠被分成PBS组（6只,瘤周注射PBS组）、氩氦刀组（6只,氩氦刀冷冻组）、CpG ODN组（6只,瘤周注射CpG ODN）和联合治疗组（6只,氩氦刀冷冻加瘤周注射CpG ODN）.观察各组小鼠存活及肿瘤生长情况;采用酶联免疫吸附试验检测小鼠外周血中IL-12和IFN-γ的含量;利用流式细胞仪检测小鼠外周血中CD3＋CD4＋T细胞与CD3＋CD8＋T细胞比例;对氩氦刀组和氩氦刀联合CpG ODN组治愈小鼠进行再攻击实验,观察小鼠再次成瘤率.结果 氩氦刀组和联合治疗组小鼠的平均生存时间为（80.3±5.4）d和（83.8±5.5）d,明显长于PBS组[（53.7±3.7）d]和CpG ODN组[（51.5±6.8）d],差异均有统计学意义（P＜0.05）.氩氦刀组和联合治疗组抑瘤率分别为83.8%和86.2%.治疗后20 d,氩氦刀组和联合治疗组的CD3＋CD4＋T细胞/CD3＋CD8＋T细胞比值、IL-12和IFN-γ水平均高于PBS组和CpGODN组,差异有统计学意义（P＜0.05）;与氩氦刀组比较,联合治疗组CD3＋CD4＋T细胞/CD3＋CD8＋T细胞比值差异无统计学意义,但IL-12和IFN-γ水平则显著升高（P＜0.05）.肿瘤再攻击后,氩氦刀组和联合治疗组分别有5只（5/6）和1只（1/6）再次成瘤,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 氩氦刀冷冻联合CpG ODN可以增强荷瘤鼠的抗肿瘤免疫应答,增强了氩氦刀治疗小鼠的免疫功能,减少了肿瘤再次攻击的成瘤率.
- 邹宁来庆华丁为民李许锋张积仁
- 关键词：结肠肿瘤冷冻消融术CPG寡脱氧核苷酸免疫治疗
- 微波消融联合CpG ODN治疗小鼠移植性结肠癌及对免疫状态的影响被引量：5
- 2010年
- 目的研究微波消融联合CpGODN对小鼠移植性结肠癌的治疗作用及对免疫状态的影响。方法 Balb/c小鼠皮下接种结肠癌CT26细胞建立肿瘤模型,肿瘤分别给予瘤周注射PBS、微波消融、微波消融+瘤周注射CpGODN和瘤周注射CpGODN四种处理。定期测量肿瘤大小,利用流式细胞仪检测小鼠外周血中CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+细胞的比例;采用ELISA检测小鼠外周血中IL-2、IL-12和IFN-γ含量。给予微波消融组和微波消融联合CpGODN组治愈的小鼠再次接种CT26细胞,观察成瘤率。结果微波消融组和微波消融联合CpGODN组小鼠的肿瘤体积显著小于PBS组和CpGODN组。4组小鼠外周血中的CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞比例无显著性差异,微波消融联合CpGODN组及微波消融组的CD3+CD4+T/CD3+CD8+T细胞比值分别为1.58±0.10和1.53±0.13,与PBS组和CpGODN组相比显著升高(P均<0.05)。微波消融联合CpGODN组小鼠外周血中IL-2浓度为(64.6±7.4)pg/ml,IL-12浓度为(314.1±26.9)pg/ml,IFN-γ浓度为(61.9±7.3)pg/ml,显著高于其他3组(P均<0.05)。肿瘤再次攻击实验中微波消融联合CpGODN组成瘤率为25.0%,显著低于微波消融组的75.0%(P<0.05)。结论 CpGODN增强了微波消融治疗小鼠的免疫功能,减少了肿瘤再次攻击的成瘤率。
- 邹宁李许锋丁为民来庆华张积仁
- 关键词：微波消融CPGODN白细胞介素-12
