国家自然科学基金(30660114)
- 作品数：5 被引量：31H指数：3
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- 相关机构：贵州大学浙江大学凯里学院更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 机械伤胁迫下刺梨果实的抗氧化反应被引量：7
- 2009年
- 以‘贵农五号’刺梨为材料,研究了刺梨果实对机械伤处理造成的氧化胁迫及其主要抗氧化系统的响应情况.结果表明,机械伤处理可诱导刺梨果实中O2.-和H2O2等活性氧的产生,促使膜脂过氧化水平加剧.在此过程中,抗氧化系统各组分的反应不尽相同:其中,抗坏血酸含量在处理2h内急剧降低,相应地其氧化态DHA的含量则持续增加;SOD活性在处理2h内急剧增强并一直保持较高水平,而抗氧化酶系统中的其它重要组分如APX、POD和CAT等却一直未能检测到活性.
- 黄伟安华明杨玉刘明
- 关键词：刺梨氧化胁迫
- 刺梨半乳糖内酯脱氢酶的序列特征和部分反应特性被引量：2
- 2008年
- 分析和研究了从刺梨中克隆的维生素C合成关键酶半乳糖内酯脱氢酶的氨基酸序列特征及其基本生化反应特性.结果表明,该基因含有一段线粒体靶信号肽序列、2个跨膜区、一个典型的FAD结合域以及1个天冬酰胺糖基化位点、8个蛋白激酶C磷酸化位点、11个酪蛋白激酶2磷酸化位点、2个酪氨酸激酶磷酸化位点和4个N端十四(烷)酰化位点等潜在功能性或翻译后修饰位点.丫啶黄素显著抑制GalLDH活性,二价金属盐CuSO4和ZnSO4有部分抑制作用,而石蒜碱几乎没有作用.
- 安华明黄伟樊卫国刘庆林陈力耕
- 关键词：刺梨半乳糖内酯脱氢酶维生素C生化特性
- 刺梨果实和叶片发育过程中抗坏血酸和抗氧化酶的协同变化被引量：20
- 2007年
- 以‘贵农5号’刺梨为材料,研究了果实和叶片发育过程中主要保护酶和抗坏血酸(AsA)的变化。结果表明,刺梨果实和叶片内都具有较高的SOD活性,并在发育过程中呈基本相似的变化模式;总体上看,刺梨叶片中具有较高的POD和CAT等抗氧化酶活性,并呈‘初期升高后期降低’的变化趋势,但AsA含量及其氧化还原态(AsA与AsA库的比值)较低。在果实中,SOD活性和AsA含量高,而POD活性很低,并且在果实发育中、后期降至检测不到的水平,整个生育期都未能检测到CAT活性。这表明刺梨果实和叶片中存在着不同的自由基清除协作机制。
- 安华明樊卫国刘庆林陈力耕
- 关键词：刺梨抗坏血酸抗氧化系统
- 刺梨RNA的有效提取及Actin基因片段的克隆被引量：4
- 2008年
- [目的]为刺梨的分子生物学研究奠定技术基础。[方法]分别采用改进的CTAB-LiCl法和CTAB法提取刺梨果实中的总RNA和基因组DNA。对刺梨总RNA进行反转录,生成cDNA第1链。根据GenBank上的蔷薇科肌动蛋白(Actin)基因保守序列设计1对跨内含子引物Actin1和Actin2,以cDNA第1链和基因组DNA为模板进行RT-PCR扩增。将含有目的片段的凝胶进行回收纯化,克隆到PMD18-T载体上,转化大肠杆菌TG1感受态细胞,选取带有目的片段的重组质粒进行测序和序列分析。[结果]将目的片段回收后克隆于T载体,可获得298 bpActin基因的cDNA序列。克隆所得核苷酸序列与蔷薇、桃和葡萄的核苷酸序列相似性达83%,与富士苹果、甜菜等的相似性也超过80%。刺梨Actin基因编码的氨基酸序列与梨的相似性最高(达97%),其次是葡萄、花生、大豆、棉花和马铃薯,而与水稻、拟南芥等的相似性也达90%以上。[结论]Actin基因跨内含子,用该Actin基因片段作内标可以减少DNA污染。
- 杨玉安华明刘明黄伟李德燕王立新刘厚宇李顺雨
- 关键词：肌动蛋白克隆
- 刺梨半乳糖内酯脱氢酶的酶促反应条件优化
- 2010年
- 为进一步探明刺梨半乳糖内酯脱氢酶（GalLDH）的作用机理及其对维生素C（AsA）合成效率的影响,以高AsA果实刺梨为材料,研究了AsA合成关键酶——GalLDH酶促反应的动力学参数。结果表明,刺梨GalLDH反应的最适温度在30℃左右,最适pH值为8.3-9.4,以半乳糖内酯作为反应底物的Km为0.031 mM,最大反应速率Vmax=0.026 U/s。当以古洛糖内酯作为反应底物时,GalLDH也能表现约70%的活性。
- 刘卫黄伟安华明杨曼张雪
- 关键词：刺梨半乳糖内酯脱氢酶动力学特征酶促反应
