国家自然科学基金(31200108)
- 作品数：4 被引量：26H指数：3
- 相关作者：宰淑蓓蔡金凤陈海丽朱召芹胡芸文更多>>
- 相关机构：上海市公共卫生临床中心上海市东方医院中国疾病预防控制中心传染病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市卫生局青年科研基金上海市卫生局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 上海某医院2011年1至5月住院病例2044份血及体液标本血培养结果分析被引量：13
- 2014年
- 目的监测和分析上海市公共卫生临床中心血及体液标本血培养分离各种细菌的分布趋势,评价全自动血培养仪阳性结果中的菌群类型和假阳性/假阴性情况。方法采用法国生物梅里埃公司全自动血培养仪和细菌鉴定仪对2011年1至5月收集的2 044份血及体液标本进行培养和鉴定,并进行结果分析。结果不同标本的细菌阳性检出率不同,穿刺液标本的细菌阳性检出率最高(38.10%),其次为血液标本(30.74%)。共分离出231株细菌,总阳性检出率为11.30%,均为单一菌种。其中凝固酶阴性葡萄球菌最多(41.13%),其次为真菌(18.18%),金黄色葡萄球菌所占比例最少(0.87%)。结论了解血及体液标本培养的菌群类型和分布情况,对致病菌和污染菌进行综合鉴别和分析,将有助于指导或帮助临床用药,预防败血症的发生。
- 赵忆文朱召芹蔡金凤陈海丽王茉婴胡芸文张军宰淑蓓
- 关键词：血培养全自动血培养仪
- 2010--2012年上海市两家哨点医院门诊腹泻病例副溶血弧菌感染状况及菌株分子特征分析被引量：9
- 2015年
- 目的分析2010--2012年上海市两家哨点医院肠道门诊腹泻病例副溶血弧菌感染情况，以及菌株携带毒力基因状况和分子特征。方法于2010--2012年，以上海市两家医院的肠道门诊为监测哨点，以医院的2729例腹泻病例为研究对象，采集每例1份粪便样本。采用硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖（TCBS）琼脂培养基及生化反应分离和鉴定副溶血弧菌，采用多重PCR检测分离菌株的毒力基因携带情况，采用PFGE对菌株进行聚类分析，同时进行多位点序列分型（MLST）。结果2729份样本中，分离到副溶血弧菌30株，2010--2012年的分离率分别为1．1％（11／973）、1．0％（11／1120）、1．3％（8／636）。携带tlh、tdh、trh基因的菌株分别占100％（30／30）、97％（29／30）、0-30株副溶血弧菌临床分离株共分为13种PFGE型（P1～13）和3种MLST型（ST-189、STG99、ST-3）。其中，P4型菌株占30％（9／30），1x）、P10型均占12％（4／30），P1、P2、P12、P13型均占7％（2／30），其余PFGE型均占3％（1／30）；ST-3型占84％（25／30），ST-189型占13％（4／30），ST-799型占3％（1／30）。结论2010--2012年上海市两家哨点医院腹泻病例副溶血弧菌感染率较低；副溶血弧菌临床分离株均携带t腕基因，不携带￡旃基因，MLST型以ST-3型为主。
- 陈海丽周海健宰淑蓓蔡金凤钱方兴马亮王茉婴沈震李杨张军胡芸文阚飙朱召芹
- 关键词：弧菌副溶血性脉冲场多位点序列分型
- CFP10-ESAT6融合蛋白用于结核分枝杆菌感染诊断ELISA方法的初步研究被引量：3
- 2015年
- 目的制备结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白,探讨CFP10-ESAT6融合蛋白在结核分枝杆菌免疫诊断中的应用价值。方法 PCR扩增得到CFP-10、ESAT6基因片断,将其先后克隆入pET-28a表达载体。优化表达条件、用镍亲和层析的方法纯化带His标签的重组CFP10-ESAT6融合蛋白(rCFP10-ESAT6)。制备兔多克隆抗体,建立rCFP10-ESAT6为抗原的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,以健康者血清为对照,检测170例结核患者血清的抗体。结果重组质粒pET28a-CFP10-ESAT6靶基因测序结果与预计设计完全一致。融合蛋白在E.coli BL21(DE3)工程菌中均为可溶性表达,表达量占菌体总蛋白的40%。利用金属螯合亲和层析直接纯化重组蛋白,纯度达到95%以上。Western blot分析表明,重组蛋白能与结核患者血清发生特异性免疫结合反应,与健康者血清不发生反应。CFP10-ESAT6的兔多克隆抗体的效价为1∶8 000,CFP10-ESAT6作为包被抗原的检测结核病人血清中特异性抗体的间接ELISA最佳包被浓度为0.002μg/mL,患者血清的最佳稀释度为1∶500。检测结果与临床诊断的符合率,ELISPOT>ELISA(rCFP10-ESAT6)>ELISA(kit)。结论CFP10-ESAT6融合蛋白具有较高的抗原特异性和免疫反应性,有可能成为结核病免疫学诊断的特异抗原,对结核的诊断具有重要参考价值。
- 许艳陈海丽刘晓茜熊延青席秀红宰淑蓓蔡金凤卢水华朱召芹
- 关键词：结核分枝杆菌
- 霍乱弧菌双精氨酸转运系统基因共转录和同源性分析被引量：1
- 2015年
- 目的研究霍乱弧菌双精氨酸转运系统（twin—arginine translocation system，Tat）基因簇各个基因的共转录情况，并确定参与Tat转录基因簇构成。方法选择霍乱弧菌埃尔托生物型菌株N16961和tatABC基因缺失株N169-dtat进行Tat基因簇及上下游基因，即上游蛋白质生物合成ubi aarF基因和下游细胞色素C551过氧化物酶编码基因咧551基因进行逆转录，分析Tat基因簇的共转录情况。选择霍乱弧菌及其他弧菌属菌株，通过PCR产物测序和序列比对，对Tat转运系统的同源性进行比较，进行Tat基因簇各基因聚类分析。结果Tat基因簇4个基因（tatA、tatB、tatC和ratE）均可以共转录。ubi aarF基因可以与tatA及tatB共转录。cyt551基因与上游的4个基因均不共转录；通过N16961 Tat基因缺失株总RNA逆转录分析发现，虽然ubi aarF与tatA、tatB的共转录由于基因缺失被阻断，但该基因仍可以被分别转录。不同型别的霍乱弧菌和其他弧菌属的菌株tarA、tatB、tatC、ratE单基因和tatABC基因簇聚类分析结果表明，Tat基因簇的种属变异性很小，是一段很保守的序列。结论霍乱弧菌ubi aarF基因与Tat基因簇可能共同受调控因子的作用；Tat基因在弧菌属中属于保守结构。
- 朱召芹陈海丽周海健景怀琦闫梅英宰淑蓓蔡金凤胡芸文阚飙
- 关键词：基因序列同源性
