国家重点基础研究发展计划(2010CB12640)
- 作品数：4 被引量：14H指数：2
- 相关作者：黄河清柯才焕黄琳方财王凌雪萍更多>>
- 相关机构：厦门大学香港浸会大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学理学医药卫生更多>>
- 人胎盘膜铁蛋白同类型双亚基功能、铁核结构和释放铁动力学研究被引量：2
- 2011年
- 以人胎盘组织为实验材料,小批量制备电泳纯人胎盘膜铁蛋白(HPMF),对其结构与功能进行研究。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术揭示,HPMF蛋白壳由分子量分别为15 kDa(MF15)和20 kDa(MF20)的亚基组成,其中MF15蛋白含量约为MF20的3倍。经肽质量指纹图谱(PMF)技术鉴定,发现PHMF的MF15和MF20亚基与人铁蛋白(HF)L亚基均具有较高的同源性,提出HPMF由单类型但分子量不同的双亚基组成的新观点。在选用基质辅助电离激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术直接分析HPMF亚基稳定性过程中,获得5个质荷比(m/z)值为5071.25,9962.51,15131.55(MF15),19936.40(MF20)和20147.61的特征质谱峰,其对应的亚基分子式分别为[MF15]3+,[MF20]2+,[MF15]+,[MF20]+和[MF20+Fe]+。ICP-MS分析发现,HPMF铁核中的铁和无机磷酸盐(Pi)含量仅为85Fe3+/HPMF和15Pi/HPMF,其中Fe3+/Pi比值约为5.72,明显低于绝大多数哺乳动物铁蛋白,但却高于细菌铁蛋白(BF)。在释放铁动力学方面,HPMF以一级反应动力学途径释放完整铁核中的铁量,其释放时间约需750 min,其释放铁的速率慢于马脾铁蛋白(HSF)和猪胰铁蛋白(PPF)(约60 min)。根据HPMF完全不同于大部分哺乳动物、植物和细菌铁蛋白的新颖结构与功能,提出HPMF在母体和胎儿之间中起着释放、储存和转运铁的复合生理功能的铁转运模型。
- 罗联忠金宏伟蔡宗苇黄河清
- 在镉盐胁迫下扇贝鳃组织应激蛋白的研究被引量：6
- 2010年
- 采用透射电子显微镜观察了虾夷盘扇贝(Patinopecten yessoensis)鳃组织细胞的超微结构,发现镉盐能胁迫鳃组织中的腮丝、细胞核和线粒体产生病变.利用双向凝胶电泳(2D-PAGE)优化分离扇贝鳃组织的全蛋白,获得约800个蛋白质斑点,并筛选出37个由于镉盐胁迫而产生的差异蛋白质斑点.选用基质辅助激光解吸离子化-飞行时间质谱(MALD I-TOF MS)技术和数据库检索鉴定差异蛋白,结果发现7个与镉毒性密切相关的蛋白质,即热休克蛋白70和β-淀粉酶等上调蛋白质及原肌球蛋白、肌动蛋白和钙活化核苷酸酶1等下调蛋白质.此外,还发现转录调节子Crp/Fnr家族为低表达蛋白质,而ABC转运子为高表达蛋白质.在这些差异蛋白中,部分蛋白质适合作为连续监测流动海水中镉污染程度及评价其危害性的蛋白指示物.
- 方财王黄清育凌雪萍柯才焕黄河清
- 关键词：蛋白质组学镉胁迫应激蛋白
- 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术分析三七和海兔神经连索内的皂甙组分被引量：4
- 2009年
- 基质辅助激光解吸电离飞行时间(MALDI-TOF)质谱技术能高效解吸三七提取液(Panaxnotoginseng Extraction,PNE)中的混合皂甙分子为皂甙离子,并供质量分析器检测与分析。选用MALDI-TOF质谱技术直接分析色谱纯皂甙样品的纯度,其检测灵敏度优于反相高效液相色谱法(RP-HPLC)。优化提取中药三七(Panax notoginseng,PN)的混合皂甙,选用MALDI-TOF质谱技术直接分析PNE中的皂甙种类和相对含量,发现PNE至少含有20种不同分子结构的皂甙组分,其中人参皂甙(Ginsenoside)Rg1和三七皂甙(Notoginsen-oside)R1含量相对较高。选用薄板层析法(TLC)制备PNE中的R1皂甙。MALDI-TOF质谱技术研究蓝斑背肛海兔(Notarcus leachiicirrosus Stimpson,NLCS)神经连索内的超微量R1的组成与分布。建立PNE皂甙的指纹图谱,并适合于评价中药三七的品质和分析体内超微量皂甙的代谢过程与机理。
- 冯丽剑黄琳卓慧钦黄河清
- 关键词：皂甙基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱指纹图谱
- 用圆二色性和荧光光谱技术研究纳米吡啰红G核-铁蛋白的构建机理被引量：2
- 2010年
- 小批量制备了电泳纯鲨鱼肝铁蛋白（Liver ferritin ofSphyrna zygaena,SZLF）,对SZLF的结构与功能进行了研究.在pH=2.0~10.0条件下,选用圆二色性（Circular dichroism,CD）光谱技术研究了SZLF和脱铁核SZLF（apoSZLF）二级结构转换的基本特征和变化趋势,揭示了SZLF蛋白壳的亚基稳定性、相互作用强度和去折叠现象.利用酸碱中和方法,解离SZLF蛋白壳亚基,并再次构建成完整SZLF.用紫外-可见分光光度法和荧光光度法研究了构建纳米吡啰红G核-铁蛋白的途径.定量分析结果表明,每分子apoSZLF可捕获12分子吡啰红G于蛋白壳内,构建纳米吡啰红G核-铁蛋白.分析了apoSZLF直接捕获和释放吡啰红G的途径与速率,为后续构建高存量纳米顺铂核-铁蛋白药物载体提供了可行性技术.
- 陈盈盈黄琳季学涛林青陈平柯才焕黄河清
- 关键词：铁蛋白光谱分析
