陕西省重大科技创新专项计划项目(2009ZKC07-01-1)
- 作品数：16 被引量：119H指数：8
- 相关作者：罗军赵旺生孙雨婷吴敏席利萌更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学陕西省动物研究所更多>>
- 发文基金：陕西省重大科技创新专项计划项目公益性行业(农业)科研专项转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 西农萨能羊BTN基因RNA干扰序列的筛选及重组腺病毒载体的构建与鉴定被引量：2
- 2010年
- 【目的】构建西农萨能羊BTN基因RNA干扰的重组腺病毒载体,为研究BTN基因的功能和作用机制奠定基础。【方法】设计并合成3对针对BTN不同位点的shRNA编码序列,克隆到pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA载体中,并与已构建好的表达BTN的pDsRed1-C1-BTN载体共转染HEK293细胞,筛选有效的干扰序列。通过与腺病毒骨架质粒重组,制备表达干扰BTN基因的shRNA的腺病毒,经PacⅠ线性化后,在HEK293细胞中包装并扩增病毒,用TCID50法进行病毒滴度测定,获得高滴度的病毒上清液。【结果】成功构建了西农萨能羊BTN基因的RNAi腺病毒表达载体,腺病毒经包装和扩增后,病毒滴度可达到5×109PFU/mL。【结论】获得了有功能的pAd/PL-DEST/CMV-GFP/U6-shRNA病毒重组子。
- 赵旺生罗军王伟滕炎玲王桢林先滋
- 关键词：RNA干扰腺病毒载体
- 奶山羊短链脂肪酸受体GPR41基因的克隆及组织表达分析被引量：10
- 2012年
- 旨在克隆奶山羊GPR41(G protein-coupled receptor 41)基因并分析其组织表达谱,为进一步探讨其功能奠定基础。根据GenBank上已登录的牛、人和鼠的GPR41基因序列设计1对特异性引物,采用RT-PCR方法克隆奶山羊GPR41基因,利用实时荧光定量PCR方法分析奶山羊GPR41mRNA表达的组织特异性。测序结果表明奶山羊GPR41基因的CDS区为978bp,共编码325个氨基酸。奶山羊GPR41基因序列同源性分析表明:其与牛、人和鼠的核苷酸序列同源性分别为96%、78%和74%,与牛、人和鼠的氨基酸序列同源性分别为97%、76%和74%。实时荧光定量PCR分析结果表明:奶山羊GPR41基因在小肠组织中表达量最高,其次是乳腺组织,在心脏和肾脏中表达量极低。试验结果表明GPR41可能在小肠和乳腺组织中发挥着重要的生理作用。
- 孙雨婷罗军朱江江赵旺生李君钟瑜郝娟
- 关键词：奶山羊克隆
- 日粮中添加脂肪酸钙或菜油对西农萨能奶山羊泌乳性能及乳品质的影响被引量：4
- 2014年
- 试验旨在研究日粮中添加脂肪酸钙或菜油对泌乳期西农萨能奶山羊产奶性能、乳成分及血浆生化指标的影响。采用单因素试验设计,将27只年龄、胎次、产奶量、泌乳期相近的健康奶山羊随机分为3组,每组9个重复,试验组I每天添加45 g脂肪酸钙,试验组II每天添加36 g菜油,对照组不添加。预试期10 d,正试期90 d。结果表明:1日粮添加脂肪酸钙或菜油分别使乳产量提高了2.67%和1.60%,但差异不显著(P>0.05)。2饲粮添加脂肪酸钙或菜油组试验羊乳中乳脂、全脂固形物呈下降趋势,试验组I乳脂降低的幅度最慢,对照组次之。其他指标差异均不显著(P>0.05)。3饲粮添加脂肪酸钙或菜油,试验组I血浆中葡萄糖含量下降趋势缓慢,试验组II次之;日粮中添加脂肪酸钙的试验组I血浆中尿素氮含量下降最快,对照组次之。其它各时期及各指标差异均不显著(P>0.05)。结果显示,饲粮中添加脂肪酸钙或菜油可提高乳蛋白的含量,减缓血浆中葡萄糖的下降趋势,降低血浆尿素氮含量,而添加脂肪酸钙更有利于提高奶山羊的泌乳性能。
- 姚大为罗军吴敏余康席立萌史怀平
- 关键词：西农萨能奶山羊脂肪酸钙菜油乳成分
- 西农萨能奶山羊INSIG-1编码区的克隆、序列特征分析和组织表达被引量：8
- 2013年
- 【目的】克隆西农萨能奶山羊胰岛素诱导基因1(INSIG-1)编码区,并对其进行序列特征分析和组织表达规律研究。【方法】提取西农萨能奶山羊总RNA,反转录cDNA后进行PCR反应,对克隆得到的INSIG-1序列进行生物信息学分析。用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测INSIG-1在皮下脂肪、胸部肌肉、乳腺、肝脏、肾脏、心脏、肺、脾脏、瘤胃、小肠10个组织中的表达情况。【结果】获得西农萨能奶山羊INSIG-1基因1 014bp序列(Gen-Bank登录号JQ665439),其中编码区序列长度为831bp,编码276个氨基酸。西农萨能奶山羊INSIG-1编码区与牛(GenBank登录号NM_001077909)的亲缘关系最近,相似性达97%,编码氨基酸序列的相似性达90%,而与小鼠(GenBank登录号NM_025836)的亲缘关系较远。预测INSIG-1蛋白质分子量为29.70ku,理论等电点为8.99;IN-SIG-1蛋白质具有5个跨膜螺旋结构,且有较强的疏水性,不含信号肽。RT-qPCR检测结果表明,在西农萨能奶山羊10个组织中INSIG-1均有表达,其中在肝脏中的相对表达量最高,皮下脂肪、胸部肌肉、肺次之,在心脏中的相对表达量最低。【结论】克隆得到了西农萨能奶山羊的INSIG-1基因,并探明了其组织表达规律。
- 王慧罗军胡仕良席利萌张犁苹李芳孙雨婷
- 关键词：西农萨能奶山羊实时荧光定量PCR
- 不同蛋白质水平日粮对不同性别西农萨能羊羔羊生长发育的影响被引量：22
- 2013年
- 试验旨在研究不同性别和蛋白质水平对1～100日龄西农萨能羊羔羊生长发育的影响。选取同质性较好的新生公、母羔羊各80只,分别随机分到4个组中,每组40只羊,其中试验1、2组为母羊,试验3、4组为公羊,试验1、3组饲喂低蛋白质水平(17%)的颗粒料,试验2、4组饲喂高蛋白质水平(21%)的颗粒料。定期测量羔羊的体重和体尺指标并统计腹泻率,在试验结束当天采集血液进行生化指标分析,以确定适合西农萨能羊羔羊生长发育的颗粒饲料蛋白质水平。结果表明,在试验前中期,蛋白质水平对羔羊生长发育影响不显著(P>0.05),在此阶段可饲喂低蛋白质水平颗粒料以降低饲喂成本;而在试验中后期,高蛋白质水平可显著促进羔羊生长发育(P<0.05),在此阶段可饲喂高蛋白质水平颗粒料以保证羔羊良好的生长状况;体尺指标受日粮蛋白质水平影响较小,而高蛋白质水平日粮易引发羔羊腹泻,且在试验期内公羔羊较母羔羊表现出更快的生长发育趋势。因此,在羔羊培育中应控制高蛋白质水平饲料的饲喂量。
- 余康孙爽王玉红魏安民姚大为吴敏罗军
- 关键词：羔羊培育奶山羊蛋白质水平生长发育
- 红景天多糖对奶山羊精子冷冻保护效果研究被引量：9
- 2014年
- 研究旨在探索红景天多糖及3种添加方案对山羊精子冷冻保护效果的影响。以Tris-卵黄为基础稀释液,在冷冻稀释Ⅰ液和Ⅱ液中添加不同浓度的红景天多糖(0、4、8、12、16、20 mg/L),冷冻-解冻后检测精子活率、质膜完整率、顶体完整率、线粒体活性及谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量。结果表明:冷冻稀释Ⅰ液和Ⅱ液中添加16 mg/L的红景天多糖能显著(P<0.05)提高冷冻-解冻后精子活率、质膜完整率、线粒体活率和GSH浓度,降低MDA含量;方案A即只在冷冻稀释Ⅰ液中添加16 mg/L的红景天多糖,解冻后精子活率、质膜完整率、线粒体活率及GSH浓度等指标均显著优于方案B和C(P<0.05)。因此,稀释液中添加红景天多糖能明显提高山羊冷冻精子品质和抗氧化能力。
- 席利萌罗军王维杨地坤张伟
- 关键词：精液冷冻保存红景天多糖精子品质山羊
- miR-200家族在西农萨能奶山羊乳腺组织中的表达分析被引量：6
- 2013年
- 笔者拟获得山羊miR-200家族乳腺组织表达谱,研究miR-200家族成员之间表达相关性及miR-200家族成员与山羊乳成分的相关性。通过定量PCR,检测miR-200家族在西农萨能奶山羊泌乳中期和干奶期乳腺组织中的表达量;利用Pearson相关系数分析miR-200家族不同成员表达量之间的相关性,同时分析miR-200家族成员与山羊乳成分之间的相关关系;利用miRanda和TargetScan 6.2软件分析、RNAhybrid和PITA软件预测miR-200家族的靶基因。结果表明,miR-200家族在奶山羊泌乳中期的乳腺组织中的表达量极显著高于干奶期(P<0.01);miR-200a与miR-141之间的表达量显著相关(P<0.05),miR-200b与miR-200c之间的表达量极显著相关(P<0.01);泌乳中期奶山羊乳腺组织中miR-200c的表达量与乳蛋白、非脂固形物(SNF)、冰点(FPD)的含量显著相关(P<0.05);经软件分析及预测发现,miR-200a/miR-141靶向作用于在乳脂合成中起关键作用的基因STAT4。miR-200家族可能对山羊乳蛋白及乳脂合成具有一定的调控作用。
- 张犁苹罗军林先滋朱江江石恒波史怀平李君
- 关键词：西农萨能奶山羊靶基因
- 奶山羊SCD基因CDS区的克隆、序列分析及过表达被引量：10
- 2012年
- 【目的】研究奶山羊硬脂酰辅酶A去饱和酶基因(stearoyl-CoA desaturase,SCD)在乳腺上皮细胞中对不饱和脂肪酸合成过程相关基因的调控及对细胞脂肪酸组成的影响。【方法】用RT-PCR方法从西农萨能羊乳腺组织中扩增SCD基因,进行序列分析和组织表达谱分析;构建重组腺病毒质粒,进行包装和扩增后,感染体外培养的奶山羊原代乳腺上皮细胞,实时定量检测相关基因的表达,western blotting检测蛋白变化,气相色谱-质谱联用分析细胞内脂肪酸组成变化。【结果】①获得了全长1 080 bp的山羊乳腺SCD基因CDS(GenBank登录号:GU947654)并对其进行了生物信息学分析;②奶山羊SCD基因在乳腺、肺和皮下脂肪组织中高表达,而在心脏、瘤胃和卵巢组织中的表达量较低;③成功构建了奶山羊SCD基因的重组腺病毒载体并制备出高滴度的重组病毒液,重组腺病毒感染原代乳腺上皮细胞后,检测结果表明细胞中SCD基因过表达极显著,FASN、H-FABP、LEPR和LXRα等基因表达下调,而PPARγ和LPL基因的表达量显著性增加;④棕榈酸和硬脂酸的含量下降,不饱和脂肪酸含量上升。【结论】SCD基因在奶山羊乳腺中发挥着重要作用,FASN、H-FABP、LEPR、LXRα、PPARγ和LPL基因的表达与其相关,这些基因共同影响乳脂中脂肪酸的组成。
- 石恒波罗军朱越王紫骞赵旺生
- 关键词：奶山羊乳腺上皮细胞腺病毒过表达
- 不同蛋白水平日粮对西农萨能羊公羔肥育性能的影响被引量：13
- 2013年
- 本研究旨在探讨不同蛋白水平日粮对西农萨能羊公羔肥育性能的影响。选择21只健康、体重相近的6月龄西农萨能羊公羔,随机分为3组,分别饲喂蛋白水平为19.5%、16.0%、13.4%的日粮。试验为期50 d,测定试验羊的体重、体尺、血液生化指标、屠宰性能和羊肉品质。结果显示:高蛋白组试验羊体重、日增重、胸围、体斜长最大,料重比最小(P>0.05);血浆中总蛋白、白蛋白、球蛋白、总胆固醇含量高于中、低蛋白组(P>0.05);屠宰率、净肉重、肉骨比、眼肌面积具有最大值(P>0.05);羊肉失水率最低(P>0.05)、嫩度最好(P<0.05)。经综合评定,19.5%蛋白水平日粮更有利于西农萨能羊公羔短期育肥。
- 孙爽罗军王维吴敏王慧席利萌张犁苹
- 关键词：育肥血液生化指标屠宰性能
- 日粮中添加脂肪酸钙或菜油对西农萨能奶山羊泌乳性能及乳品质的影响
- 试验旨在研究日粮中添加脂肪酸钙或菜油对泌乳期西农萨能奶山羊产奶性能、乳成分及血浆生化指标的影响。采用单因素试验设计,将27只年龄、胎次、产奶量、泌乳期相近的健康奶山羊随机分为3组,每组9个重复,试验组I每天添加45 g脂...
- 姚大为罗军吴敏余康席立萌史怀平
- 关键词：西农萨能奶山羊脂肪酸钙菜油乳成分
- 文献传递
