国家自然科学基金(30660190)
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 相关作者：赵宁辉黄晓玮徐蔚赵娜杨勇涛更多>>
- 相关机构：昆明医学院第二附属医院云南大学安徽省芜湖市第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省科技厅-昆明医学院应用基础研究联合专项资金项目云南省中青年学术和技术带头人后备人才项目更多>>
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- 低氧对无糖逆境中星形胶质细胞增殖和凋亡的作用
- 2015年
- 目的探讨星形胶质细胞对低氧的耐受程度;葡萄糖对其凋亡和增殖的影响及无糖逆境中低氧微环境对胶质细胞的是否具有保护作用及可能分子机制。方法通过三气培养箱构建低氧微环境,将星形胶质细胞(HAC)设为常氧常糖组(21%O2-G+)和常氧无糖组(21%O2-G-),低氧常糖组(0.1%O2-G+)和低氧无糖组(0.1%O2-G-)。分别在不同培养条件下培养24、48、72 h后通过MTT法及Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测细胞增殖及凋亡情况,利用Western印迹法检测各组低氧诱导因子(HIF)-1α表达情况。结果在低氧常糖组星形胶质细胞各时间段无明显凋亡(P>0.05),但可缓慢增殖。常氧无糖组及低氧无糖组48 h细胞开始发生明显凋亡,增殖被显著抑制(P<0.05),48 h低氧无糖组细胞凋亡明显低于常氧无糖组(P<0.05),至72 h凋亡率高于常氧无糖组(P<0.05)。低氧可诱导HIF-1α表达水平增高,其中低氧常糖组HIF-1α表达水平最高,其次为低氧无糖组,常氧常糖及常氧无糖组表达量均较低。结论星形胶质细胞可耐受极度低氧;葡萄糖缺乏可诱导细胞发生明显的凋亡并抑制其增殖;低氧可在一定时限内部分对抗葡萄糖缺乏所诱导细胞凋亡。低氧可诱导HIF-1α的高表达,并且可能与低氧抗无糖逆境作用有关。
- 李咏梅敖丽娟吴国瑞赵宁辉黄晓玮徐蔚
- 关键词：低氧脑胶质细胞
- 全脑缺血-再灌注降低成年大鼠海马CA1区抑制性突触功能
- 2008年
- 目的观察全脑缺血-再灌注对成年大鼠海马CA1区抑制性突触功能的影响。方法成年雄性大鼠,随机分为:1)假手术组(SH)、2)缺血-再灌注3 d组(IR-3)、3)缺血-再灌注7 d组(IR-7)。用四动脉阻断法制作全脑缺血模型,使用全细胞电压钳技术记录海马脑片CA1区锥体细胞诱发的抑制性突触后电流(eIPSCs)。结果与SH组相比:低刺激强度时,IR-3及IR-7组eIPSCs的幅值明显降低(P<0.05);IR-7组eIPSCs的上升时间明显变短(P<0.05);IR-3组eIPSCs的配对抑制明显变大(P<0.05)。结论全脑缺血-再灌注降低了大鼠海马CA1区抑制性突触功能。
- 许林峰马文裴赵宁辉冯忠堂
- 关键词：脑缺血再灌注电生理海马
- 低氧诱导因子1α过表达对PC12细胞在CoCl2拟缺氧模型中凋亡的影响被引量：5
- 2010年
- 目的 研究CoCl2处理拟缺氧损伤条件下低氧诱导因子1α（HIF-1α）过表达对PC12神经细胞凋亡状态的影响.方法 分化后的PC12细胞分为2组,实验组转染pEGFPC1-HIF-1α△ODD表达质粒,对照组转染pEGFPC1.CoCl2处理模拟细胞缺氧损伤条件;Western blotting检测2组细胞常氧和缺氧时HIF-1α的表达;Hochest33342染色、流式细胞仪和Caspase-3活性检测3种方法观察神经细胞拟缺氧损伤时HIF-1α的过表达对细胞凋亡的影响.结果 50 μmol/L及100μmol/L CoCl2处理PC12细胞12 h、24 h可以诱导细胞拟缺氧损伤模型,实验组细胞常氧和缺氧时HIF-1α表达均高于对照组.Hochest33342染色结果提示实验组凋亡细胞明显少于对照组细胞.50 μmol/L CoCl2处理24 h后,流式细胞仪结果显示实验组细胞凋亡率为（5.41±3.29）%,对照组为（8.35±2.59）%,差异有统计学意义（P＜0.05）.加入50μmol/LCoCl2处理12 h后,实验组细胞中Caspase-3活性的增加倍数明显低于实验组细胞.结论 适量CoCl2处理的神经细胞系拟缺氧损伤模型中,HIF-1α的过表达对细胞凋亡有显著的抑制作用.
- 赵宁辉杨勇涛徐蔚郝金刚赵娜黄晓玮
- 关键词：细胞低氧低氧诱导因子1Α二氯化钴
- 正常犬脊髓MR弥散成像的初步研究被引量：2
- 2011年
- 目的探讨正常beagle犬脊髓的磁共振弥散加权成像的可行性、技术特点及研究意义.方法用速眠新对8只比格犬进行麻醉后立即进行脊髓弥散成像,采用西门子sonata1.5T磁共振系统,在平面回波成像(EP)I基础上进行不同参数扫描,分析比较各自影像特点并计算平均表观弥散系数(ADC).结果采用层厚3mm,单次激发SE-EPI弥散序列可以取得较好的颈髓DWI图像,颈髓具有明显的各向异性,平行于白质纤维的弥散梯度可得到较高的ADC值.在颈髓矢状位成像测量的平均ADC值为(109.6±6.8)×10-3 mm2/s.结论 1.5T磁共振系统可以对犬进行颈髓DWI成像,其脊髓成像特点有助于指导犬的脊髓试验.
- 郝建成郝金钢赵宁辉谭军闫东
- 关键词：脊髓弥散成像MRI
- 氧浓度非敏感性低氧诱导因子-1α表达载体的构建及其在PC12细胞系中的表达被引量：1
- 2010年
- 目的构建大鼠非氧浓度敏感性低氧诱导因子1α（HIF-1α）真核表达载体并观察其在PCI2细胞系中的表达。方法应用RT—PCR从脊髓损伤区域的细胞总RNA中扩增HIF—1αcDNA，采用重叠延伸PCR的方法克隆获得缺失氧敏感性降解结构域（ODD）的HIF-1α突变体基因克隆，采用质粒pEGFP—C1构建重组真核融合表达载体，将其转入培养的PC12神经细胞系中，应用所融合的绿色荧光蛋白的表达和Western blot鉴定其在细胞内的表达。结果通过重叠延伸PCR的方法成功扩增得到非氧浓度敏感性的HIF1α突变体基因（HIF1αAODD）序列，并构建了过量表达缺失ODD的转录调控因子HIF1α突变体的重组表达质粒（pEGFPCI一HIF1αAODD）。将其转染PC12细胞系后，Westernblot和绿色荧光蛋白结果均表明HIF—letAODD蛋白能在PC12神经细胞系中正确表达。结论成功构建了pEGFPCI一HIF1αAODD真核表达载体并在PC12细胞系中观察到融合蛋白表达。
- 赵宁辉李冉黄晓玮
- 关键词：低氧诱导因子1Α质粒转染
