国家自然科学基金(30470606)
- 作品数：12 被引量：88H指数：5
- 相关作者：罗勇秦文熠李满孙麟李圆更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院山西医学科学院山西医科大学第二医院更多>>
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- 电刺激小脑顶核对缺血／再灌注大鼠脑组织内NF-κB活性及其活化的影响被引量：22
- 2006年
- 目的观察Wistar大鼠局灶脑缺血/再灌注后,脑内核因子-κB(NF-κB)活性及其活化的基本规律,并探讨电刺激小脑顶核(FNS)对其影响。方法成年雄性Wistar大鼠27只,随机分为正常组、单纯局灶脑缺血/再灌注组(模型组)和局灶脑缺血/再灌注+电刺激小脑顶核治疗组(FNS治疗组)。采用线栓法制备右侧大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,缺血时间均为2 h,根据再灌注时间分为缺血2 h/再灌注3,6,1 2和24 h组。模型组不给予任何干预处理,FNS治疗组在缺血2 h再灌注即刻给予FNS治疗1 h。用Western blot法捡测缺血脑组织核抽提物中NF-κB p65蛋白的表达,用电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测核抽提物中NF-κB DNA的结合活性。结果正常组大鼠脑组织核抽提物中有少量NF-κB p65蛋白,NF-κB DNA结合活性较弱。模型组再灌注各时间点,即再灌注3,6,12和24 h．NF-κB p65蛋白含量均高于正常组,其中再灌注6 h和12 h均显著高于正常组(P＜0．05)。模型组NF-κB p65蛋白含量变化趋势为：再灌注3 h＜再灌注6 h＜再灌注12 h,再灌注12 h达峰值,各组间差异具有统计学意义(P＜0．05)；再灌注24 h时NF-κB p65蛋白含量明显低于再灌注6 h和12 h(P＜0．05)。模型组NF-κB DNA结合活性除再灌注3 h外,其余3个时间点均显著高于正常组(P＜0．05)；模型组再灌注3 h时,NF-κB DNA结合活性明显弱于组内其余3个时间点(P＜0．05),这3个时间点均为高活性状态,组内差异无统计学意义(P＞0．05)。FNS治疗组NF-κB p65蛋白含量及NF-κB DNA结合活性的变化趋势与模型组相似。其中,再灌注6 h和12 h时,FNS治疗组NF-κB p65蛋白含量明显低于模型组相应时间点(P＜0．05)；再灌注6,12和24 h时,FNS治疗组NF-κB DNA结合活性也明显低于模型组相应时间点(P＜0．05)。结论大鼠局灶脑缺血/再灌注后缺血脑组织中NF-κB活化明显,活性增强；FNS可下调NF-κB活化程度,抑制NF-κB DNA结合活性,这可能�
- 万东罗勇谢鹏
- 关键词：电刺激小脑顶核DNA结合活性
- HMGB1基因沉默对氧糖剥夺/复氧所致星形胶质细胞损伤的保护作用被引量：7
- 2014年
- 目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)基因沉默对氧糖剥夺/复氧导致的星形胶质细胞损伤的保护作用。方法将星形胶质细胞分为对照组、模型组、HMGB1 siRNA组、非特异性siRNA组。模型组星形胶质细胞在无糖DMEM培养基、1%O2的培养条件下行2、4、6h的氧糖剥夺后复氧至24h。HMGB1 siRNA组星形胶质细胞在氧糖剥夺/复氧前转染载有HMGB1干扰序列的慢病毒,然后氧糖剥夺6h复氧至24h。采用RT-PCR和Western blotting检测各组星形胶质细胞HMGB1 mRNA及蛋白的表达状况,ELISA法测定星形胶质细胞培养上清液中HMGB1蛋白的浓度变化,并通过乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、MTT法检测星形胶质细胞的损伤情况及存活率。结果 RNA干扰可明显抑制星形胶质细胞HMGB1蛋白的表达(P<0.01),RT-PCR及ELISA法检测显示,与对照组相比,模型组星形胶质细胞HMGB1 mRNA表达量和细胞培养上清液中HMGB1的浓度均有所增加(P<0.01),且随着氧糖剥夺时间的延长呈上升趋势(P<0.01)。与对照组相比,模型组星形胶质细胞明显损伤,随着氧糖剥夺时间的延长,星形胶质细胞损伤加重,LDH漏出率逐渐增高(P<0.01),存活率逐渐下降(P<0.01);与模型组相比,HMGB1 siRNA组细胞损伤明显减轻,LDH漏出率水平明显下降(P<0.01),细胞存活率显著上升(P<0.01)。结论通过RNA干扰技术可抑制星形胶质细胞HMGB1的表达。HMGB1过表达可能是氧糖剥夺/复氧后引起细胞损伤的重要因素之一。
- 汶海琪罗勇陈瑞芳李满庞月珊谢宸宸
- 关键词：氧糖剥夺复氧星形细胞HMGB1蛋白小分子干扰
- 高迁移率族蛋白B1对大鼠局灶脑缺血/再灌注后大脑皮质梗死周围区神经干细胞增殖的影响被引量：4
- 2014年
- 目的:探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对局灶脑缺血/再灌注大脑皮质梗死周围区神经干细胞增殖的影响。方法:选取雄性SD大鼠48只,分为假手术组、模型组、RNA干扰组和阴性干扰组。采用线栓法制备大鼠局灶脑缺血/再灌注模型,缺血1 h再灌注7 d时观测。用携带大鼠HMGB1 shRNA的慢病毒载体介导RNA干扰抑制脑内HMGB1的表达,通过免疫荧光双标记HMGB1/GFAP和Western blotting法检测RNA干扰效果。通过免疫荧光双标记5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)/神经巢蛋白(nestin)检测大脑皮质梗死周围区神经干细胞的增殖。结果:与假手术比较,再灌注7 d时,模型组大脑皮质梗死周围区HMGB1蛋白表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,RNA干扰有效抑制HMGB1蛋白的表达(P<0.05)。与假手术组比较,模型组的BrdU/nestin双标记细胞明显增多(P<0.05);与模型组比较,RNA干扰组的BrdU/nestin双标记细胞明显减少(P<0.05)。结论:局灶脑缺血/再灌注后大脑皮质梗死周围区HMGB1蛋白表达水平升高可促进该部位的神经干细胞增殖。
- 李满罗勇李圆孙麟
- 关键词：神经干细胞
- 高迁移率族蛋白B1对体外培养原代神经干细胞增殖能力的影响被引量：1
- 2014年
- 摘要：本研究采用CCK-8增殖实验和测量神经球直径的方法探讨不同浓度高迁移率族蛋白B1（high-mobilitygroupbox1，HMGBl）对体外培养原代大鼠海马神经干细胞增殖能力的影响，同时通过使用C-Jun氨基端激酶（c-JunN-terminalkinase，JNK）高选择性抑制剂SP600125探讨其作用机制。结果显示，1和10ng／mLHMGB1分别培养48h$172h后，神经干细胞的CCK-8吸光度值和神经球直径与对照组比较有明显增加俨〈0．05），而其余浓度HMGBl培养基（0．01、0．1、100ng／mL）与对照组比较无明显差别（P〉0．05）。当HMGB1浓度为10ng／mL时，在神经干细胞增殖的同时P—JNK水平明显升高俨〈0．01）；而10μmol／LSP600125明显抑制HMGB1促进神经干细胞增殖的作用，降低P-JNK水平（P〈0．01）。结果表明，低浓度（1～10ng／mL）HMGB1能够促进神经干细胞增殖，其机制可能是通过促进．INK的磷酸化发挥促增殖作用的。
- 李满罗勇李圆孙麟
- 关键词：神经干细胞增殖高迁移率族蛋白B1CCK-8C-JUN氨基端激酶
- 经颅电刺激小脑顶核在脑血管病中的应用被引量：1
- 2012年
- 自1969年发现"顶核加压反应"后,学者们不断探索小脑顶核的奥秘,其功能越来越受到关注。近年来,电刺激小脑顶核(FNS)的研究从基础实验拓展到临床应用。大量实验证实,经颅FNS是一种无创、安全、有效的治疗脑血管病的物理治疗方法,能提高临床疗效,改善预后。FNS的临床应用日趋成熟,成为脑血管病康复治疗的手段之一。
- 蔡艳丽罗勇
- 关键词：小脑顶核电刺激脑血管病
- 小胶质细胞内核因子-κB对靶基因的转录调节被引量：4
- 2007年
- 小胶质细胞是脑内重要的常驻免疫效应细胞,激活后可释放多种细胞因子参与神经系统损伤及疾病的早期免疫应答。核因子-κB(NF-κB)是真核细胞内的一种快反应核转录因子,在神经系统中广泛表达。小胶质细胞胞浆内的NF-κB激活后通过核移位,与胞核DNA上的炎症相关基因特异结合从而调节炎症因子的基因表达。阻断NF-κB中介的炎症反应可能成为CNS炎症相关疾病的治疗靶点。
- 邓杉杉罗勇
- 关键词：小胶质细胞NF-ΚB转录调节
- 脑缺血再灌注后神经元中核因子-κB对靶基因的转录调节被引量：4
- 2007年
- 何兰英罗勇
- 关键词：转录调节脑缺血再灌注靶基因细胞核转录因子神经元
- 脑缺血后神经发生与血管生成的联系与作用被引量：4
- 2006年
- 马璟曦罗勇
- 关键词：神经发生侧脑室血管生成缺血后神经科学研究海马齿状回
- 电针对局灶脑缺血/再灌注大鼠海马内NF-κB旁路途经的调节作用被引量：1
- 2013年
- 目的:观察局灶脑缺血/再灌注后不同阶段大鼠海马内IKKα及NF-κBp52的表达及电针对NF-κB旁路途径的调节作用。方法:SD健康雄性大鼠(280-300g)108只随机分为假手术组(n=12),电针组(n=48)及模型组(n=48),按照再灌注后24h与7d将电针组及模型组分为2个亚组。采用右侧大脑中动脉闭塞/再通线栓法建立局灶脑缺血/再灌注模型。电针组取"合谷"穴、"太冲"穴,选用G6805-1型针灸治疗仪进行电针治疗。用FJB染色观察脑缺血/再灌注后海马区内神经细胞的损伤情况;利用免疫组化、Western blot检测不同时间点海马区内IKKα的蛋白表达及NF-κB p52胞核内的蛋白表达变化。结果:FJB染色显示局灶脑缺血/再灌注后,海马区内神经细胞变性损伤明显(P<0.05);与模型组比较,电针干预后海马区内神经细胞变性损伤减少(P<0.05)。免疫组化及Western blot显示模型组大鼠海马内IKKα表达于再灌注后24h及7d均显著升高(P<0.05);胞核内NF-κB p52的蛋白表达随IKKα表达增加而增加(P<0.05)。电针组与模型组比较,海马内IKKα蛋白表达及胞核内p52的蛋白表达明显减少(P<0.05)。结论:脑缺血/再灌注刺激能诱发海马区内IKKα表达升高,活化p52入核激活信号通路造成海马区内神经细胞的损害;电针干预后能明显抑制IKKα的表达,阻止其活化p52进而有效缓解缺血/再灌注后海马内神经细胞的损伤。
- 秦文熠罗勇陶涛
- 关键词：局灶性脑缺血再灌注海马电针
- 电针上调Cezanne表达抑制NF-κB信号通路介导的大鼠脑缺血/再灌注炎性损伤被引量：9
- 2021年
- 目的探讨电针上调Cezanne的表达及对局灶脑缺血/再灌注大鼠炎性损伤的神经保护作用。方法将SD大鼠按简单随机分组分为假手术(sham)组、电针(EA)组、缺血/再灌注(MCAO/R)组和缺血/再灌注+电针(MCAO/R+EA)组,颅内注射Cezanne沉默慢病毒(LV-shCezanne),空载慢病毒(vehicle)作为对照。采用改良线栓法制备右侧大脑中动脉缺血/再灌注模型,电针刺激"百会"穴和病侧"四关"穴("合谷"/"太冲"穴)。缺血2 h后分别再灌注6、12、24、48、72 h和7 d。分别采用Garcia评分、TTC染色、Western blot、细胞计数,免疫荧光检测各组神经功能评分、梗死灶体积、缺血大脑皮质区Cezanne蛋白表达、Cezanne阳性细胞数、Cezanne的细胞分布类型、细胞核与细胞质NF-κB p65蛋白的表达。结果与sham组相比,EA组Cezanne蛋白表达在6 h和48 h增加(P<0.05),MCAO/R组Cezanne蛋白表达在12、24、48、72 h和7 d时增加(P<0.05);与MCAO/R组相比,MCAO/R+EA组Cezanne蛋白表达在12、24、72 h时进一步增加(P<0.05)。相较于sham组,MCAO/R组神经评分降低(P<0.05),Cezanne阳性细胞数、脑梗死体积增加(P<0.05);相较于MCAO/R组,MCAO/R+EA组神经评分升高(P<0.05),Cezanne阳性细胞数增多(P<0.05),脑梗死体积(P<0.05)、p-IκBα/IκBα比值(P<0.05)、细胞核p65/细胞质p65比值降低(P<0.05);免疫荧光显示Cezanne主要分布在缺血大脑皮质区神经元细胞质。结论电针通过上调Cezanne蛋白的表达,抑制大鼠局灶脑缺血/再灌注后NF-κB信号通路的激活,从而发挥神经保护作用。
- 卢文豪周雪灵任义昆王静文朱君胥虹贝李佳妮罗勇
- 关键词：电针
