国家自然科学基金(30460132)
- 作品数：15 被引量：55H指数：4
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- 二氮嗪预处理对大鼠离体心脏缺血再灌注时心肌线粒体通透性转换孔的影响被引量：4
- 2008年
- 目的探讨二氮嗪预处理对大鼠离体心脏缺血再灌注时心肌线粒体通透性转换孔（PTP）的影响。方法健康SD大鼠72只，体重250～300g，雌雄不拘，随机分为4组（n=18），建立离体心脏Langendorf再灌注模型，K—H液平衡灌注20min后，对照组（C组）持续灌注K—H液100min不停搏；缺血再灌注组（IR组）持续灌注K—H液30min；二氮嗪预处理组（D组）依次灌注K-H液15min、二氮嗪50μmol／L10min和K—H液5min；5-羟葵酸组（5-HD组）依次灌注5-HD100μmol／L10min、K—H液5min、二氮嗪50μmol／L10min和K—H液5min。除C组外其余组于平衡后30min灌注4℃St．Thomas停搏液，全心停搏40min，再灌注30min。各组于平衡末、缺血前即刻及再灌注末随机取6个心脏测定心肌线粒体PTP半开放时间（T1/2）和线粒体膜电位。结果与平衡末、缺血前即刻相比，各组再灌注末心肌线粒体PTP T1/2缩短，膜电位降低（P〈0．05或0．01）；与C组比较，其余组心肌线粒体PTP T1/2缩短，膜电位降低（P〈0．01）；与IR组比较，D组心肌线粒体PTP T1/2延长，膜电位升高（P〈0．01），5-HD组差异无统计学意义（P〉0．05）；与D组比较，5-HD组心肌线粒体PTP T1/2缩短，膜电位降低（P〈0．05）。结论二氮嗪50μmol／L预处理可减少大鼠离体心脏缺血再灌注时心肌线粒体PTP开放，减少线粒体膜电位的丢失，维持心肌线粒体膜的完整性。
- 陈其彬喻田傅小云刘兴奎张琼余志豪
- 关键词：二氮嗪细胞膜通透性
- 二氮嗪预处理对大鼠心肌线粒体呼吸功能与呼吸酶活性的影响被引量：9
- 2008年
- 目的:探讨特异性线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道开放剂二氮嗪预处理对离体大鼠缺血再灌注心肌线粒体呼吸功能和酶活性的影响。方法:采用Langendorff装置建立大鼠离体心肌缺血再灌注模型,将72只SD大鼠随机分为正常组(NOR)、缺血再灌注组(IR)、二氮嗪预处理组(DIA)、5-羟葵酸拮抗二氮嗪组(5HD-DIA)。NOR组在平衡灌注20 min后续灌100 min,IR组在平衡20 min后续灌30 min,继后全心缺血40 min,复灌30 min。DIA组在缺血前给予含二氮嗪50μmol/L的K-H液10 min后,全心缺血40 min,复灌30 min。5HD-DIA组在二氮嗪预处理之前先给予含5-羟葵酸100μmol/L K-H液10 min,其余同二氮嗪预处理组。分别于平衡末、缺血前及再灌注末取心肌并分离、制备线粒体,测定各组线粒体的呼吸功能、呼吸酶活性。结果:再灌注末DIA组的线粒体呼吸功能(呼吸控制率、磷氧比、3态呼吸速率)和呼吸酶活性(NADH氧化酶、琥珀酸氧化酶、细胞色素C氧化酶)明显优于IR组和5HD-DIA组(P<0.05)但次于NOR组(P<0.01);而IR组和5HD-DIA组比较无显著差异(P>0.05)。结论:线粒体钾通道开放剂二氮嗪预处理能够保护缺血/再灌注损伤心肌的线粒体,其机制与保护线粒体的呼吸功能及呼吸链的酶活性有关。
- 陈其彬喻田刘兴奎傅小云张琼余志豪
- 关键词：心肌二氮嗪线粒体
- 缺血预处理对大鼠离体心脏心肌线粒体功能的影响被引量：4
- 2007年
- 目的研究缺血预处理（IPC）对大鼠离体心脏心肌线粒体功能的影响。方法SD大鼠72只，随机分为4组（n=18）：对照组（CON组）、缺血再灌注组（IR组）、缺血预处理组（IPC组）和5-羟葵酸（5-HD）拮抗IPC组（5-HD＋IPC组）。采用Langendorff装置建立大鼠离体心脏缺血再灌注模型，IPC组在全心停灌前，给予2次缺血预处理，每次缺血5min，间隔5min；5-HD＋IPC组预处理前灌注5-HD 10min。各组于平衡末、缺血前、再灌注30min各取6个心脏，分离心肌线粒体并测定线粒体呼吸控制率（RCR）、磷氧比（ADP／O2）、NADH氧化酶（NADH-OX）、琥珀酸氧化酶（SUC-OX）、细胞色素C氧化酶（CYTC-OX）的活性。结果与CON组比较，IR组、IPC组和5-HD＋IPC组再灌注30min RCR、ADP／O2、NADH-OX、SUC-OX和CYTC＋OX的活性降低（P〈0．05）；与IR组比较，IPC组和5-HD＋IPC组再灌注30min上述各指标升高（P〈0．05）；与IPC组比较，5-HD＋IPC组再灌注30min上述各指标降低（P〈0．05）。结论缺血预处理可改善大鼠离体心脏缺血再灌注时心肌线粒体的功能，其机制与mitoKATP的激活有关。
- 张琼喻田傅小云陈其彬余志豪
- 关键词：缺血预处理心肌再灌注损伤线粒体心脏
- 超极化停搏对大鼠离体缺血再灌注心脏功能和心肌细胞凋亡的影响
- 2008年
- 目的研究ATP敏感性钾通道(KATP)开放剂心脏超极化停搏对大鼠缺血再灌注时离体心脏功能及心肌细胞凋亡的影响。方法SD大鼠108只,随机分为对照组(CON组)、去极化停搏组(D组)、超极化停搏组(H组)、5-羟葵酸(选择性线粒体ATP敏感性钾通道阻滞剂)+超极化停搏组(5-HD+H组)、HMR-1098(选择性膜ATP敏感性钾通道阻滞剂)+超极化停搏组(HMR-1098+H组)、5-羟葵酸+HMR-1098+超极化停搏组(5-HD+HMR-1098+H组)。每组18只。每组再分为缺血前、缺血40min、再灌注60min3个亚组(n=6)。取心脏建立Langendorff灌注模型,平衡15min。除对照组心脏不停搏持续灌注外,其余各组分别灌注各自的停搏液,心脏停搏缺血40min,再灌注60min。持续测定心功能指标[心率(HR)、左心室发展压(LVDP)、左心室舒张末压(LVEDP)、冠脉流量(CF)],计算率压双乘积(DP);各组于缺血前、缺血40min、再灌注60min时分别取心肌组织,运用原位末端TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数。结果与各停搏组比较,CON组心功能指标最好,心肌细胞凋亡指数最少(P<0.01);与其余停搏组比较,超极化停搏组能明显提高再灌注期间LVDP及DP,降低LVEDP,减少心肌细胞凋亡率(P<0.01)。5-羟葵酸及HMR-1098能拮抗超极化停搏对缺血再灌注损伤的保护作用。结论超极化停搏对心肌缺血再灌注损伤的保护作用与保护心功能及抑制心肌细胞凋亡有关。这也是通过共同开放两类ATP敏感性钾通道实现的。
- 陈慧喻田刘兴奎余志豪
- 关键词：超极化停搏心肌保护ATP敏感性钾通道细胞凋亡
- 含钾通道开放剂的HTK液对大鼠心功能以及线粒体结构和功能的影响被引量：2
- 2009年
- 目的观察含钾通道开放剂的供心保存液对心功能以及能量代谢、线粒体呼吸酶活性及超微结构的影响。方法将SD大鼠分为HTK组、Pi组、5HD组、1098组和5HD＋1098组。切取SD大鼠心脏，建立Langendorff灌注模型，平衡10min，然后按分组进行如下处理：HTK组心脏以Histidine-Tryptophan—Ketoglutarate液（HTK液）停搏；Pi组心脏以含0．5mmol／L吡那地尔（Pi）的HTK液停搏；1098组心脏以含0．5mmol／L Pi和100μmol／L HMR1098的HTK液停搏；5HD组心脏以含0．5mmol／L Pi和100μmol／L五羟葵酸（5HD）的HTK液停搏；5HD＋1098组心脏以含0．5mmol／LPi、100μmol／L 5HD和100μmol／L HMR1098的HTK液停搏。停搏后，将心脏置于各组相应的液体（4℃）中保存8h，然后用含氧的37℃克亨液（K-H液）再灌注60min。观察各组平衡末、保存末、再灌注末时的心功能、线粒体呼吸酶活性、心肌ATP含量及心肌细胞线粒体超微结构的改变。结果R组保存末、再灌注末的心功能（心率、左心室舒张末压、左心室发展压和冠状动脉流量）、心肌线粒体呼吸酶（NADH氧化酶、琥珀酸氧化酶、细胞色素C氧化酶）活性及ATP含量均优于其他各组（P〈0．01或P〈0．05），同时线粒体的结构改变也最轻。结论含Pi的HTK液能改善大鼠心脏保存效果；Pi对能量状态的维持以及对线粒体结构与功能的保护可能是其心肌保护的重要机制。
- 杨柳青喻田刘兴奎余志豪
- 关键词：吡那地尔钾通道器官保存
- 心脏移植中供心保护新策略
- 2008年
- 心脏移植是现代医学对临床治疗无效的晚期或进展期心脏病惟一可行的治疗方法。供心保护是在常规心脏手术心肌保护的基础上发展起来的，贯穿于供心采集和移植吻合的各个环节之中，包括能量状态保护、能量资源保护以及结构保护，以期为受体提供一个具有活力和最大潜能的心脏。良好的供心保护，不仅直接提高移植的成功率，改善移植后的远期疗效，而且可以延长保存时间，扩大供心来源。此文结合当前心肌保护领域的研究热点阐述了各阶段供心保护的策略。
- 杨柳青喻田
- 关键词：供体心脏保存缺血预处理钾通道开放剂
- 缺血预处理对大鼠离体缺血再灌注心脏心肌功能和线粒体ATP敏感性钾通道的影响被引量：19
- 2006年
- 目的研究缺血预处理(IP)对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法 Wistar大鼠48只,其中40只随机分为缺血再灌注组(I/R组)、IP组、二氮嗪组(DZ组)、5-羟葵酸(选择性线粒体ATP敏感性钾通道阻滞剂)拮抗IP组(5-HD+IP组)、5-羟葵酸拮抗二氮嗪组(5-HD+DZ 组),每组8只,另外8只用作正常心肌线粒体电镜检查对照组。应用Langendorff离体心脏灌注系统建立心脏缺血再灌注模型,平衡灌注20 min后,30 min预处理期间各组进行以下处理,IP组进行2次缺血再灌注,灌注压8．5 kPa,灌注速率8．5 ml／min。每次IP缺血5 min再灌注5 min;DZ组灌注50 μmol ·L-1二氮嗪;5-HD+IP组灌注100 μmol·L-1 5-羟葵酸10 min,然后给予2次IP;5-HD+DZ组灌注5-羟葵酸100μmol-L-1 10min,再灌注二氮嗪50μmol·L-1 10min。然后各组全心缺血40min,再灌注30min。持续测定心功能指标[心率、左心室发展压(INDP)、左心室舒张末压(INEDP)和冠脉流量(CF)],再灌注末取心肌,提取线粒体,电镜下观察其病理学改变,并进行线粒体Flameng评分。结果与I／R组比较,IP和二氮嗪预处理能明显提高再灌注期间LVDP,降低LVEDP,降低心肌线粒体Flameng评分(P< 0．01),减轻心肌病理学损伤;5-羟葵酸能部分拮抗IP、完全拮抗二氮嗪预处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。结论 IP对心肌缺血再灌注损伤的保护作用与线粒体ATP敏感性钾通道的激活有关。
- 季永喻田李宗权刘兴奎陈其斌余志豪
- 关键词：缺血预处理心脏钾通道腺苷三磷酸酶
- 缺血预处理对离体大鼠心肌线粒体心磷脂及心功能的影响被引量：3
- 2009年
- 目的探讨缺血预处理(ischemic preconditioning,IP)对缺血再灌注损伤大鼠心肌线粒体心磷脂(cardiolipin)及心功能的影响。方法清洁级SD大鼠72只,体质量200～300g,雌雄各半,用随机数字表法分为正常组、对照组、缺血预处理组(IP组)、5-羟葵酸(5-HD)拮抗缺血预处理组(HD组),每组18只。采用Langendorff灌流装置建立大鼠离体心脏缺血再灌注模型,正常组灌注平衡20min,持续灌注100min;对照组灌注平衡20min,持续灌注30min,缺血40min,再灌注30min;IP组灌注平衡20min后,给予2次间断缺血预处理,每次缺血5min再灌注5min,余缺血再灌注同对照组;HD组在预处理前灌注5-HD10min,余同IP组。各组分别于灌注平衡末(T1)、缺血前即刻(T2)、再灌注末(T3)记录心率(HR)、左心室发展压(LVDP)和左心室舒张末压(LVEDP),采用高效液相色谱仪测定心肌线粒体心磷脂含量。结果与T1、T2时比较,各组T3时HR、LVDP明显降低,LVEDP明显升高,心肌线粒体心磷脂含量明显降低(P<0.05,P<0.01);与正常组比较,余3组T3时HR、LVDP明显降低,LVEDP明显升高,心肌线粒体心磷脂含量明显降低(P<0.05,P<0.01);与对照组比较,IP组及HD组T3时HR、LVDP明显升高,LVEDP明显降低,心肌线粒体心磷脂含量明显升高(P<0.05,P<0.01);与IP组比较,HD组T3时HR、LVDP明显降低,LVEDP明显升高,心肌线粒体心磷脂含量明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论IP可维护心肌线粒体心磷脂含量的相对稳定,改善大鼠离体缺血再灌注心脏功能,其机制主要与mito-KATP通道的激活有关。
- 邓胜利喻田余志豪
- 关键词：缺血预处理线粒体再灌注损伤心磷脂
- 含吡那地尔的心脏保存液对大鼠离体心脏线粒体呼吸功能的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨含吡那地尔的心脏保存液（HTK液）对大鼠离体心脏线粒体呼吸功能的影响。方法健康清洁级SD大鼠120只，建立离体心脏Langendorff灌注模型，随机分为5组，HTK组（I组）、吡那地尔＋HTK液组（II组）、吡那地尔＋HTK液＋5-羟葵酸（5-HD）组（Ⅲ组）、吡那地尔＋HTK液＋HMR-1098组（Ⅳ组）、吡那地尔＋HTK液＋HMR-1098＋5-HD组（V组）。K—H液平衡灌注10min后灌注心脏停搏液：I组灌注HTK液；Ⅱ组灌注含吡那地尔0．5mmol／L的HTK液；Ⅲ组灌注含吡那地尔0．5mmol／L和5-HD100umol／L的HTK液；IV组灌注含吡那地尔0．5mmol／L和HMR-1098 100umol／L的HTK液；V组灌注含吡那地尔0．5mmol／L、5-HD100umol／L和HMR-1098 100umol／L的HTK液。停搏后取心脏保存于4℃各组相应液体中8h，然后用37℃含氧K—H液再灌注60min。于平衡灌注10min（T1）、保存8h（T2）、复灌60min（T3）时测定线粒体呼吸功能[3态呼吸（S3）和4态呼吸（S4）的耗氧速率、呼吸控制率（RCR）及磷氧比（P／O）]。于T1和T3时收集冠脉流出液测定心肌肌钙蛋白I（cTnI）浓度、肌酸激酶同功酶（CK—MB）及乳酸脱氢酶（LDH）的活性。电镜下观察心肌细胞超微结构。结果与I组比较，Ⅱ组。Ⅳ组RCR、P／O、S3耗氧速率升高，cTnl、CK-MB和LDH的水平降低（P〈0．05）。与Ⅱ组比较，Ⅲ组～V组RCR、P／O、S3耗氧速率降低，cTnI、CK—MB和LDH的水平升高（P〈0．05）。与Ⅲ组比较，Ⅳ组RCR、P／O、S3耗氧速率升高，cTnI、CK—MB和LDH的水平降低，V组RCR、P／O、S3耗氧速率降低，cTnI、CK—MB和LDH的水平升高（P〈0．05）。与Ⅳ组比较，V组RCR、P／O、S3耗氧速率降低，cTnI、CK-MB和LDH水平升高（P〈0．05）。各时点S4耗氧速率组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。Ⅱ组心肌细胞损伤较轻，Ⅲ组和Ⅳ组损伤程度相近但重于Ⅱ组，I组和V组损伤最重。结论含吡
- 杨柳青喻田刘兴奎余志豪
- 关键词：吡那地尔器官保存液
- 线粒体心磷脂在二氮嗪预处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用被引量：2
- 2009年
- 目的评价线粒体心磷脂在二氮嗪预处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用。方法清洁级SD大鼠72只，体重200—280g，雌雄各半，随机分为对照组（C组）、缺血再灌注组（I／R组）、二氮嗪预处理组（DZ组）和5-羟葵酸拮抗二氮嗪组（HD组），每组18只。采用Langendorff灌流装置建立大鼠离体心脏缺血再灌注模型，C组平衡灌注20min，持续灌注100min；I／R组平衡灌注20min，持续灌注30min，缺血40min，再灌注30min；DZ组平衡灌注20min后，依次灌注K-H液15min、50μmol／L．二氮嗪10min和K-H液5min，其余缺血再灌注同I／R组；HD组二氮嗪预处理前给予含5．羟葵酸100μmol／LK-H液10min，其余处理同DZ组。各组分别于平衡灌注末（T1）、缺血前即刻（T2）、再灌注末（L）时随机取6只大鼠，监测心率（HR）、左心室发展压（LVDP）和左心室舒张末压（LVEDP），采用高效液相色谱仪测定心肌线粒体心磷脂含量。结果与T1,2时比较，各组L时HR、LVDP降低，LVEDP升高，心肌线粒体心磷脂含量降低（P〈0．05）；与C组比较，其余3组B时HR、LVDP降低，LVEDP升高，心肌线粒体心磷脂含量降低（P〈0．05）；与I／R组比较，DZ组T3时HR、LVDP升高，LVEDP降低，心肌线粒体心磷脂含量升高（P〈0．05）；与DZ组比较，HD组L时HR、LVDP降低，LVEDP升高，心肌线粒体心磷脂含量降低（P〈0．05）。结论二氮嗪预处理可减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤，与维持心肌线粒体心磷脂含量有关。
- 邓胜利喻田刘兴奎余志豪
- 关键词：二氮嗪再灌注损伤
