四川省教育厅资助科研项目(11ZA205)
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 相关作者：戴小珍王兰李红潘克俭何浪更多>>
- 相关机构：成都医学院重庆大学重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省教育厅资助科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- CXCR7在SDF-1介导内皮细胞参与血管形成中的作用被引量：2
- 2012年
- 目的探讨CXCR7在SDF-1诱导内皮细胞参与血管生成中的作用。方法用Western blot和流式细胞仪检测脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)中CXCR7和CXCR4的表达;利用小分子拮抗剂分别阻断CXCR4或CXCR7,然后通过MTT、Transwell小室法及三维基质胶血管样结构形成实验分别考察CXCR7和CXCR4对SDF-1诱导HUVECs增殖、迁移及管样结构形成能力的影响。结果 HUVECs细胞中同时高表达CXCR4和CXCR7;CXCR7的拮抗剂显著抑制SDF-1诱导HUVECs的增殖(P<0.01);而SDF-1诱导HUVECs迁移却被CXCR4的拮抗剂阻止(P<0.01);CXCR7和CXCR4的拮抗剂均显著阻止SDF-1诱导HUVECs形成血管样结构(P<0.01)。结论 CXCR7和CXCR4在SDF-1诱导HUVECs参与血管生成的过程中均起着不可或缺却又不尽一致的作用,SDF-1诱导HUVECs的增殖主要通过CXCR7发挥作用,而CXCR4主要参与SDF-1诱导HUVECs的迁移,两者共同参与SDF-1诱导HUVECs形成管样结构的调节。
- 熊新李红潘克俭王兰李亚戴小珍
- 关键词：CXCR4CXCR7基质细胞衍生因子内皮细胞
- pcDNA3.1/CXCR7真核细胞表达载体的构建及其在内皮细胞中的表达鉴定
- 2013年
- 目的:CXCR7是基质衍生因子1(stroma derived factor-1,SDF-1)的新受体,且该受体在血管新生部位的内皮细胞中表达上调,故本研究拟构建CXCR7的真核表达载体pcDNA3.1/CXCR7,并检测其在人脐静脉内皮细胞中的表达。方法:采用RT-PCR法从人肝癌细胞HepG2的cDNA中扩增出约1100 bp的CXCR7基因片段。采用KpnI、XbaI将目的基因和载体pcDNA3.1进行双酶切,将酶切产物加入T4 DNA连接酶16℃连接过夜。将连接产物转化到感受态大肠杆菌中。挑取阳性克隆、提质粒,用双酶切、质粒DNA PCR扩增及DNA序列分析鉴定正确后,采用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将其转染人脐静脉内皮细胞(HU-VEC),通过western-blot检测目的基因在内皮细胞中的表达。结果:阳性克隆经双酶切法鉴定含有CXCR7基因片段,质粒DNAPCR扩增出与CXCR7同等大小的基因片段,基因测序结果与GenBank中序列相同。转染HUVEC后,细胞中CXCR7的表达水平显著上升。结论:成功构建了CXCR7的真核表达载体,可在内皮细胞中正常表达并。为进一步研究其作用机制奠定了基础。
- 戴小珍王兰李红何浪张坤田志杰
- 关键词：趋化因子受体7真核表达载体内皮细胞
- CXCR7在肿瘤中的作用研究进展被引量：1
- 2014年
- 肿瘤的生长、转移受到多因素的调节，其中，趋化因子及其受体的相互作用在肿瘤的发生发展过程中发挥着重要的作用。基质衍生因子1（stromal cell derived factor-1，SDF-1／CXCL12）是趋化因子家族中重要的成员之一，其在肿瘤生长、转移过程中的作用日益受到关注，但既往研究认为SDF-1是通过其唯一受体CXCR4发挥作用的。但近年来发现SDF-1还有另一受体CX-CR7，并且CXCR7与SDF-1的亲和性远高于CXCR4。 CXCR7的发现使得人们不得不重新审视SDF-1的作用机制。目前已有大量关于CXCR7在肿瘤的发生发展过程中的研究。研究发现， CXCR7在肿瘤组织中普遍表达，并且在促进肿瘤生长过程中发挥着重要的作用。但是在不同的肿瘤中，CXCR7表现出的作用及其作用机制不尽一致，表明 CXCR7的作用机制是十分复杂的。本文将综述近年来关于CXCR7在肿瘤生长及转移过程中的作用研究，为肿瘤治疗靶点的选择提供一个参考。
- 吴晓邡戴小珍姜鹤群
- 关键词：CXCR7肿瘤增殖凋亡
- 大鼠骨髓来源内皮祖细胞的分离培养及鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的建立体外分离培养及鉴定大鼠骨髓来源内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的方法。方法采用密度梯度离心法从大鼠骨髓中分离得到骨髓单个核细胞,并结合差时贴壁法,收集24h后未贴壁细胞,然后用添加有多种细胞因子的内皮细胞基础培养基(endothelial basal medium,EBM-2)诱导培养获取EPCs。通过形态学观察、CD133和VEGFR-2抗体免疫荧光染色并结合FITC-UEA-1和Dil-ac-LDL的摄取功能来对EPCs进行鉴定分析,同时通过体外管样结构形成能力对EPCs进行功能性评价。结果在EBM-2培养基中诱导培养7d后,出现类似于血岛样的细胞集落,集落中央的细胞呈圆形,周边的细胞呈放射状;80%以上的细胞都是CD133+/VEGFR-2+细胞,并且这些细胞同时能够摄取Dil-ac-LDL和结合FITC-UEA-1;EPCs在基质胶表面形成管腔样结构。结论密度梯度离心法结合差时贴壁法从骨髓中分离获得的单个核细胞,然后经EBM-2条件培养基诱导培养可获得较高纯度的EPCs。
- 戴小珍王兰潘克俭何浪李红姜鹤群
- 关键词：内皮祖细胞
