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国家自然科学基金(31170080)

作品数:3 被引量:1H指数:1
相关作者:曲志才徐荣旗刘娜田李刘乾更多>>
相关机构:中国农业科学院生物技术研究所曲阜师范大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金中国博士后科学基金山东省自然科学基金更多>>
相关领域:农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 2篇农业科学
  • 1篇生物学

主题

  • 2篇轮枝
  • 2篇轮枝菌
  • 2篇大丽轮枝菌
  • 1篇蛋白
  • 1篇运输蛋白
  • 1篇同源
  • 1篇同源重组
  • 1篇膜泡
  • 1篇基因
  • 1篇基因敲除
  • 1篇分泌
  • 1篇分泌蛋白
  • 1篇分泌途径
  • 1篇胞外蛋白
  • 1篇ZEA
  • 1篇CFU
  • 1篇FUMONI...
  • 1篇SUSCEP...
  • 1篇DSRED
  • 1篇COLONI...

机构

  • 2篇曲阜师范大学
  • 2篇中国农业科学...

作者

  • 2篇田李
  • 2篇刘娜
  • 2篇徐荣旗
  • 2篇曲志才
  • 1篇王转斌
  • 1篇刘乾

传媒

  • 1篇中国农业科学
  • 1篇微生物学报
  • 1篇The Cr...

年份

  • 1篇2015
  • 1篇2014
  • 1篇2013
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
膜泡运输蛋白VdSec22参与大丽轮枝菌胞外蛋白的分泌和致病性
2015年
【目的】验证大丽轮枝菌分泌途径中一个膜泡运输蛋白Vd Sec22的功能,为防治棉花黄萎病提供潜在的生物靶点。【方法】利用"正负双向筛选法"的方法,构建大丽轮枝菌Vd Sec22蛋白编码基因缺失的突变体菌株ΔQF。通过农杆菌介导的转化,将其编码基因Vd Sec22重新导入ΔQF构建了功能回补菌株CΔQF。以野生型菌株为对照,检测上述菌株分泌胞外蛋白(果胶酶、纤维素酶和毒素蛋白)的能力;采用蘸根接种的方法,检测上述菌株对棉花致病性的差异。同时通过定量PCR检测内质网分子伴侣表达量的方法,推断突变体菌株ΔQF中是否发生了内质网应激反应。【结果】成功构建了基因敲除突变体ΔQF和功能回补菌株CΔQF。突变体菌株ΔQF的果胶酶、纤维素酶、毒素蛋白的分泌能力和对棉花的致病性均较野生型减弱,并且产生了内质网应激反应。重新导入Vd Sec22基因可弥补突变体菌株ΔQF的上述缺陷。【结论】Vd Sec22是大丽轮枝菌的一个重要分泌途径蛋白,在大丽轮枝菌诸多胞外致病蛋白的分泌和棉花致病性中起重要作用。Vd Sec22可作为防治棉花黄萎病的潜在生物靶点。
田李徐荣旗王转斌刘娜冯凤鹃曲志才
关键词:大丽轮枝菌分泌蛋白分泌途径
Difference between resistant and susceptible maize to systematic colonization as revealed by DsRed-labeled Fusarium verticillioides
2013年
Fusarium verticillioides was labeled with DsRed via Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation to examine differences in colonization and reactions of resistant and susceptible inbred lines of maize(Zea mays L.). The extent of systemic colonization of F. verticillioides in roots from maize lines either resistant or susceptible to the fungus was studied by visualizing the red fluorescence produced by the fungus expressing DsRed. The difference in quantities of colony forming units(CFU) in roots and basal stems, production of fumonisin B1, and pH of root were determined. Although F. verticillioides colonized both resistant and susceptible lines, differences were observed in the pattern and extent of fungal colonization in the two types of maize lines. The fungus colonized the susceptible lines producing mosaic patterns by filling the individual root cells with hyphae. Such a pattern of colonization was rarely observed in resistant lines, which were less colonized by the fungus than the susceptible lines in terms of CFUs. The production of mycotoxin fumonisin B1 in roots from different lines was closely correlated with the amount of F. verticillioides colonization, rather than the pH or amylopectin concentrations in the root. The findings from this study contribute to a better understanding of the defense mechanism in resistant maize lines to F. verticillioides.
Lei WuXiaoming WangRongqi XuHongjie Li
关键词:DSREDZEAFUMONISINCFU
通过缺失大丽轮枝菌Vdku80构建其高效基因敲除受体菌株被引量:1
2014年
【目的】验证大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)非同源末端连接途径关键基因Vdku80的功能,构建高效的大丽轮枝菌基因敲除受体菌株。【方法】利用常规基因敲除的方法,构建大丽轮枝菌Vdku80基因缺失的突变体菌株ΔVdku80。即将Vdku80的同源重组DNA片段(Vdku80的基因组上下游DNA片段之间连接潮霉素抗性基因)通过农杆菌介导的转化转入大丽轮枝菌,通过同源区段的重组,潮霉素抗性基因便会替换掉野生型Vdku80,从而获得突变体菌株ΔVdku80。对突变体菌株ΔVdku80的生物学表型,即生长速率、产孢量和对棉花的致病性进行测试。分别以大丽轮枝菌野生型菌株和ΔVdku80作为受体菌株,采用上述基因敲除方法测试2个几丁质合成酶编码基因ChsV和ChsVI的基因敲除效率。【结果】成功构建了Vdku80缺失突变体ΔVdku80。野生型和突变体菌株ΔVdku80在PDA培养基上的菌落形态相似,且培养8 d后菌落直径无明显差别。野生型和突变体菌株ΔVdku80产孢高峰均出现在摇瓶培养后第5天,且该时期产孢量亦无明显的变化。浓度为0.02%的MMS对野生型和突变体菌株ΔVdku80的生长均有明显的抑制作用,且抑制程度相同。接种野生型和突变体菌株ΔVdku80 4周后,棉株真叶均开始表现出萎蔫、褪绿等发病症状,野生型和突变体菌株ΔVdku80对棉花造成的病情指数分别为54.2±4.9和53.6±5.4,亦无明显变化。因此,突变体菌株ΔVdku80的生长速率、产孢量和致病性相对于野生型菌株均未发生明显变化。使用野生型菌株作为基因敲除的受体菌株,几丁质合成酶编码基因ChsV和ChsVI的基因敲除转化子在总转化子中的比例分别为44%和31%;而使用ΔVdku80作为基因敲除的受体菌株,几丁质合成酶编码基因ChsV和ChsVI基因敲除转化子在总转化子中的比例分别为94%和87%。【结论】Vdku80缺失的菌株ΔVdku80作为受体菌株可以提高其他基因的基因敲除效�
田李刘娜徐荣旗曲志才刘乾
关键词:大丽轮枝菌同源重组
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