国家科技支撑计划(2007BAD86B01)
- 作品数：4 被引量：16H指数：2
- 相关作者：宁宜宝韩明远陈坚田克恭吴佳俊更多>>
- 相关机构：中国兽医药品监察所中国动物疫病预防控制中心华中农业大学更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家科技部农业科技成果转化资金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗研究进展被引量：9
- 2010年
- 猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS）又称＂猪蓝耳病＂,是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的猪的一种高度接触性传染病，
- 吴佳俊遇秀玲蒋桃珍田克恭
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒灭活疫苗接触性传染病猪蓝耳病
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立
- 2012年
- 根据GenBank公布的24株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒毒株和5株PRRSV经典毒株的保守区基因序列,使用PrimerExpress 3.0软件设计并合成实时荧光定量PCR(Real-timeFluorescent Quantitative PCR,Real-time FQ-PCR)用引物和探针,建立了Real-time FQ-PCR检测方法以鉴别检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒。用建立的检测方法对已定量的10倍倍比稀释的质粒pGET-258为标准品进行检测,并与常规PCR进行比较。结果显示,该Real-time FQ-PCR方法敏感度可达1.5个拷贝,比常规PCR敏感度高100倍,且批内和批间重复性检测结果的变异系数均小于2%。用该方法与常规PCR方法及病毒分离方法对18份临床样品进行对比检测,显示该方法灵敏度高、成本低,并且能够对样品中病毒进行定量,为高致病性猪繁殖与呼吸综合征的快速鉴别诊断提供了有效的技术手段。
- 刘灿孙丰廷宁宜宝张文利王海光英聪陈坚毕丁仁
- 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征实时荧光定量PCRTAQMAN探针
- 影响猪繁殖与呼吸综合征病毒感染与增殖的因素被引量：7
- 2010年
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染宿主细胞以及在宿主细胞内进行复制的过程受到宿主细胞的细胞受体、胞内大分子及细胞因子影响。随着单克隆抗体制备技术、分子生物学技术与蛋白质研究技术的日趋成熟,使深入研究影响PRRSV感染与增殖的因素成为可能。目前在猪肺巨噬细胞(PAM)与Marc-145细胞中发现了多个PRRSV细胞受体,这与PRRSV感染宿主细胞所具有严格的细胞嗜性有关。同时胞内大分子物质可导致PRRSV在宿主细胞内产生增殖性感染。包括干扰素在内的细胞因子具有抑制PRRSV在宿主细胞内增殖的作用。研究影响PRRSV感染与增殖的因素,对于预防PRRSV感染与合理利用PRRSV具有重要意义。
- 韩明远沈青春张志刚宁宜宝
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒病毒增殖影响因素
- 感染强、弱PRRSV毒株的Marc-145细胞差异基因文库的构建
- 2011年
- 【目的】用强、弱PRRSV GD株传代毒株感染Marc-145细胞,构建Marc-145细胞的差异基因cDNA文库。【方法】以感染PRRSV GD株第100代弱毒株的Marc-145 cDNA为测试组(Tester),以感染PRRSV GD株第5代强毒株的Marc-145 cDNA为对照组(Driver),采用抑制性消减杂交方法,构建强、弱PRRSV GD株感染的Marc-145细胞差异基因cDNA文库,并使用LAMP(Loop-mediated isothermal amplification)技术对试验结果进行验证。【结果】经4次抑制性消减杂交重复试验,得到S8、S29、L6、L26及L30等5个稳定差异表达的基因。LAMP结果显示,S8、S29、L6、L26及L30均为差异表达基因,这与抑制性消减杂交结果吻合。【结论】成功构建了感染强、弱PRRSV毒株的Marc-145细胞差异基因文库,为研究S8、S29、L6、L26和L30基因与PRRSV感染体外培养细胞Marc-145的关系奠定了基础。
- 张磊韩明远王建华宁宜宝陈坚
- 关键词：PRRSVMARC-145细胞培养
