国家自然科学基金(30460101)
- 作品数：3 被引量：14H指数：3
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 多头绦虫膜蛋白(45M)对羊脑多头蚴病的免疫保护效果被引量：11
- 2009年
- 目的观察多头绦虫膜蛋白(45M)对羊脑多头蚴病的免疫保护效果。方法12只新疆哈萨克羊随机均分为免疫组和对照组,免疫组用重组多头绦虫膜蛋白(45M)与佐剂乳化后颈部皮下2点免疫,抗原免疫剂量为50μg/只,注射体积为1ml,共免疫4次,每次间隔3周。对照组以谷胱甘肽硫转移酶(GST)表达物代替免疫抗原同法免疫。定时采集羊血,分离血清。ELISA法检测血清中IgG和IgM的抗体水平。于末次免疫后105d,免疫组和对照组每羊经口攻击感染5000个多头绦虫虫卵,感染2周后剖检羊脑多头蚴囊数,计算减囊率。将经孵化激活的六钩蚴分别置于含10%两组免疫攻击感染羊血清的RPMI1640培养液中培养,观察两组羊血清对多头绦虫六钩蚴的杀伤情况。结果免疫组有3只羊感染多头蚴包囊,平均囊荷数为1.5个,囊平均直径为2.2mm,免疫组减囊率为68.9%。六钩蚴与免疫组羊血清共培养72h后,90%死亡,被杀伤的六钩蚴出现萎缩,或膨胀致使内部结构模糊。ELISA检测结果显示,在第4次免疫后(第9周),免疫组IgG抗体水平达到最高(2.32±0.76),与对照组(0.70±0.42)间的差异有统计学意义(t=4.47,P<0.01)。经口感染六钩蚴后(第24周),免疫组IgG和IgM抗体水平(1.53±0.81,0.90±0.26)仍显著高于对照组(0.64±0.43,0.43±0.15)(P<0.01)。结论重组蛋白45M可引起机体较强的体液免疫反应。
- 张壮志石保新由弘赵莉吐尔洪.依米提王进成张文宝崔德胜艾尔肯郭金梁
- 关键词：多头绦虫ELISA免疫保护
- 多头蚴病保护性基因的分离与表达被引量：7
- 2008年
- 目的分离与表达多头绦虫（Taenia multiceps）基因45m，确定其免疫原性及在虫体不同发育阶段的表达。方法通过对绦虫同源基因序列分析设计引物，运用RT—PCR的方法，首次从绵羊多头绦虫的幼虫阶段分离到新的基因45m，将其克隆到pET41b表达载体中，获得了含正确读码框的重组质粒，将表达蛋白初步运用于动物免疫试验。结果45m基因长度为698bp，编码232个氨基酸。表达的重组蛋白分子量约为63kD，表达产量可达100～120mg／L。其蛋白序列与已知抗羊带绦虫（45W）和牛带绦虫保护性抗原的同源性分别为89％和85％。本动物绵羊的免疫接种试验表明该蛋白可有效激起机体的抗原抗体反应，其抗血清可以与多头绦虫的成虫和幼虫抗原总蛋白在63kD处发生特异性反应。结论45m蛋白可能具有较强抗原性，该蛋白在虫体的成虫和幼虫阶段均有表达，推测认为45m可能成为多头蚴病的候选疫苗。
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- 关键词：疫苗
- 绵羊脑多头蚴病45m基因在多头绦虫和细粒棘球绦虫不同发育阶段同源性的比较被引量：3
- 2009年
- 目的研究绵羊多头蚴病45 M重组蛋白的同源性。方法将多头蚴的45 m基因片段亚克隆到pET41b表达质粒,构建45 m-pET41b原核表达系统,诱导表达45 M重组蛋白,制备小鼠高免血清,进行免疫印迹试验(Western blot);运用RT-PCR的方法,从多头绦虫的成虫cDNA中分离到45 mA。结果45 M蛋白的高免血清可被细粒棘球绦虫不同发育阶段的天然抗原所识别,均在63kD处发生交叉反应;从多头绦虫的成虫cDNA中分离到45 m基因的同源基因,命名为45 mA(Gen-Bank号为EU326106),45 m和45 mA的核酸序列和蛋白序列分别有86%和76%的同源性;45 M和45 MA蛋白与细粒棘球蚴的保护性蛋白Eg95有57%的氨基酸同源性。结论提示45 m抗原分子在多头绦虫和细粒棘球绦虫的不同发育阶段均存在,为45 M蛋白的免疫原性的分析提供了宝贵的资料。
- 由弘张壮志赵莉石保新吐尔洪.依米提王进成张文宝崔德胜艾尔肯郭金梁
- 关键词：同源基因
