国家教育部博士点基金(20010023029)
- 作品数：4 被引量：28H指数：4
- 相关作者：许彩民杨洋孙义民潘华珍董华更多>>
- 相关机构：中国协和医科大学军事医学科学院中国医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金北京市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 一种同时提取细胞总RNA和总蛋白的方法被引量：11
- 2005年
- 应用TRIzol法分步提取总RNA和总蛋白,提取的总RNA亮度强、完整,提取的总蛋白与经常规RIPA裂解液提取的全蛋白的质量相当。验证了从同一批次处理的细胞中同时提取总RNA和总蛋白进行检测分析是可行的,而且确保了实验条件的一致性,缩短了实验周期。
- 董华王军军应天翼李霆王恒樑许彩民
- 关键词：TRIZOL法总RNA总蛋白
- 小剂量亚硒酸钠和全反式维甲酸联合使用诱导NB4细胞的凋亡及分化被引量：7
- 2002年
- 目的 研究小剂量亚硒酸钠 (2～ 5 μmol/L)与全反式维甲酸 (ATRA)联合使用对人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡及分化的影响。方法 采用膜联蛋白Ⅴ (Annexin Ⅴ )荧光标记试剂盒检测细胞的磷脂酰丝氨酸 (PS)外翻率和DNA片段化的琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡 ,通过流式细胞术检测粒系分化细胞表面特异抗原CD11b表达 ,NBT还原实验检测细胞分化。结果 阴性对照组细胞PS外翻率为 1.2 % ,5 μmol/L亚硒酸钠处理NB4细胞 4 8h后PS外翻率为 0 .8% ,0 .1μmol/LATRA诱导 4 8h后PS外翻率为 2 .0 % ,与对照组相比 ,差异均无显著性 ,而两者联合作用NB4细胞 2 4 ,36 ,4 8h后的PS外翻率分别达到 18.3%、2 5 .9%、5 0 .0 % ,DNA电泳呈典型的梯形带。小剂量 (2 μmol/L)亚硒酸钠没有诱导NB4细胞分化的能力 ,但其与 0 .1μmol/L的ATRA联合使用同单独使用 0 .1μmol/L的ATRA相比 ,CD11b表达阳性细胞率进一步增加 ,NBT还原能力也进一步增强。结论 小剂量的亚硒酸钠与ATRA联合使用可诱导NB4细胞发生凋亡及分化。
- 孙义民左路许彩民沈悌潘华珍张之南
- 关键词：亚硒酸钠全反式维甲酸细胞分化NB4细胞株急性白血病
- 亚硒酸钠诱导的人白血病耐药细胞株MR_2的生长抑制及凋亡被引量：5
- 2002年
- 本文以人急性髓系白血病M3 型耐药细胞株 (抗全反式维甲酸ATRA)MR2 为研究对象 ,通过细胞生长增殖分析 ,细胞凋亡相关指标的检测 ,细胞内活性氧自由基含量的测定等 ,探讨亚硒酸钠对MR2 细胞的凋亡诱导作用及其作用机制。结果发现 :(1 )亚硒酸钠浓度大于 1 0 μmol L时对细胞株有明显的生长抑制作用 ,大于 2 0 μmol L时有明显的凋亡作用 ,并呈剂量时间依赖性增加。 40 μmol L的亚硒酸钠作用细胞 60h后 ,可使凋亡百分率超过 80 % ;(2 )亚硒酸钠作用细胞一定时间后可使胞内自由基水平增加 ,并在 2 4h时出现最大值。以上结果表明亚硒酸钠对MR2
- 孙义民许彩民朱圣韬张晓玲王健杨洋潘华珍
- 关键词：亚硒酸钠凋亡自由基白血病
- 活性氧激活线粒体凋亡通路是亚硒酸钠诱导NB4细胞凋亡的重要机制被引量：7
- 2007年
- 目的探讨亚硒酸钠诱导NB4细胞凋亡过程中,活性氧引起的线粒体膜电位丧失及凋亡作用的相关机制。方法用活性氧荧光探针DCFH-DA探测经亚硒酸钠诱导的NB4细胞内活性氧的含量。流式细胞术检测细胞凋亡率及线粒体膜电位变化。Western blot检测胞浆中细胞色素C含量的变化及细胞总蛋白中Bcl-xl、Bax和Bid的含量变化及切割行为。同时应用活性氧清除剂MnTmPy及活性氧激活剂BSO预处理细胞,观察Bid及凋亡的变化。结果活性氧清除剂MnTmPy可有效抑制亚硒酸钠诱导的NB4细胞凋亡、线粒体膜电位丧失及Bid的切割;而BSO可促进线粒体膜电位丧失。结论亚硒酸钠诱导NB4细胞凋亡的可能机制是通过刺激细胞产生活性氧,一方面下调抗凋亡蛋白Bcl-xl,另一方面激活线粒体打孔蛋白Bax和Bid,损伤线粒体使膜电位降低,促使线粒体释放细胞色素C。
- 卫玮韩兵社关丽英黄方冯磊杨洋许彩民
- 关键词：活性氧细胞凋亡线粒体膜电位
