国家自然科学基金(30860116)
- 作品数：15 被引量：29H指数：3
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- 整合素与1型糖尿病自身免疫反应的关系研究进展被引量：1
- 2011年
- 整合素（integrins）家族是一组细胞表面跨膜异源双体（Heterodimer）的糖蛋白受体,是由α和β两个亚单位通过非共价键连接构成的异二聚体结构。
- 冯乐平孙情乔伟
- 关键词：自身免疫反应整合素1型糖尿病糖蛋白受体异二聚体亚单位
- TSC2在胰岛素抵抗中的作用研究进展
- 2010年
- 刘丹冯乐平梁瑜祯
- 关键词：胰岛素抗药性
- 探讨特异性siRNA靶向FOXO1对NIT-1胰岛β细胞凋亡的影响
- 2019年
- 目的观察小干扰RNA对NIT-1胰岛β细胞增殖和凋亡的影响。方法通过实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测其对FoxO1的抑制情况,MTT法检测细胞增殖和流式细胞仪检测细胞增殖和凋亡以及对胰岛素分泌的影响。结果在不同糖浓度条件下,各组细胞凋亡率均与对照组比较具有明显差异(P<0.05)。结论FOXO1基因是NIT-1细胞存活的负性调节基因,但FOXO1的表达可能与葡萄糖浓度变化不明显。
- 王春霞王春霞夏宁罗静思李莹芳李莹芳冯乐平
- 关键词：胰岛Β细胞小干扰RNA凋亡
- 高浓度葡萄糖对体外培养小鼠胰岛细胞NF-κB的表达及细胞凋亡的影响被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨核因子κB(NF-κB)在高浓度葡萄糖诱导胰岛细胞凋亡中的作用。方法:对分离纯化的小鼠胰腺胰岛细胞进行体外培养,按DMEM培养液里葡萄糖浓度不同,分为6组:G1组(5.6mmol·L-1葡萄糖)、G2组(7.8mmol·L-1)、G3组(11.1mmol·L-1)、G4组(16.7mmol·L-1)、G5组(22.2mmol·L-1)及G6组(27.6mmol·L-1)。采用放射免疫法检测各组胰岛细胞胰岛素分泌水平;免疫组织化学染色法检测NF-κB活性;免疫荧光法检测细胞色素C释放和细胞核染色检测细胞凋亡。结果:当葡萄糖浓度5.6～11.1mmol·L-1时,随着葡萄糖浓度升高,胰岛细胞胰岛素分泌逐渐增加(P<0.05),NF-κB的活性逐渐增加(P<0.05),但此时细胞凋亡未见显著的变化(P>0.05),细胞色素C释放的组间比较差异无显著性(P>0.05)。当葡萄糖浓度≥16.7mmol·L-1时,与葡萄糖浓度≤11.1mmol·L-1各组比较,NF-κB表达明显增加,细胞色素C的释放也逐渐增强(P<0.05),胰岛细胞凋亡百分率同时也呈明显增加趋势(P<0.05)。结论:高浓度葡萄糖可以诱导胰岛细胞NF-κB表达增加,细胞色素C释放增强,同时诱导胰岛细胞凋亡,提示NF-κB的激活与胰岛细胞凋亡可能存在必然的联系,抑制NF-κB活性可能对于保护胰岛细胞有重要作用。
- 梁瑜祯张木勋夏宁杨月莲冯乐平
- 关键词：细胞凋亡高浓度葡萄糖NF-ΚB细胞色素C类
- 高浓度葡萄糖对胰岛细胞的IRS2表达及细胞凋亡的影响被引量：3
- 2009年
- 目的探讨高浓度葡萄糖条件下胰岛细胞胰岛素受体底物2(IRS2)和Bax基因表达和激活情况以及对诱导胰岛细胞凋亡的影响。方法将小鼠胰腺进行分离纯化所得的胰岛细胞进行体外培养,按培养液里葡萄糖浓度不同分为G1组(5.6mmol/L)、G2组(7.8mmol/L)、G3组(11.1mmol/L)、G4组(16.7mmol/L)、G5组(22.2mmol/L)及G6组(27.6mmol/L)。细胞培养至72h后,采用放射免疫法检测各组胰岛细胞胰岛素分泌水平、免疫细胞组织化学法检测IRS2表达、免疫荧光法检测细胞Bax激活和细胞核Hoechst33342染色检测细胞凋亡情况。结果当葡萄糖浓度在5.6～11.1mmol/L时,胰岛素分泌水平升高,IRS2表达和Bax激活分别呈进行性增加,但此时细胞凋亡率无明显改变。随着葡萄糖浓度升高至超过16.7mmol/L时,IRS2表达逐渐减少,胰岛素分泌量明显降低,而Bax激活则逐渐增强,胰岛细胞凋亡率呈明显增加趋势。结论高浓度葡萄糖可以导致胰岛细胞IRS2表达下降,胰岛素分泌量下降;同时Bax激活增强,胰岛细胞凋亡率也明显增加。说明IRS2表达下降与凋亡相关蛋白Bax激活及其胰岛细胞凋亡可能存在必然的联系,而且IRS2表达下降可能是胰岛素分泌减少的原因之一。增强胰岛素信号传导通路中IRS2蛋白的表达可能对于保护胰岛细胞有重要作用。
- 梁瑜祯冯乐平夏宁杨月莲张木勋
- 关键词：胰岛细胞凋亡高浓度葡萄糖BAX
- 高浓度葡萄糖条件下罗格列酮对NIT-1细胞FOXO1、TSC2基因表达及细胞分泌功能的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:研究罗格列酮在不同浓度葡萄糖条件下,对胰岛β细胞增殖凋亡与胰岛素分泌以及叉头转录因子-1(FOXO1)和结节性硬化症-2(TSC2)表达的影响。方法:将NIT-1细胞按每孔5×104个放置于24孔细胞培养板,培养48h后随机分为各处理组:5.6、7.8、11.1、16.7、22.2和27.6mmol.L-1葡萄糖组,继续培养24h后再分别施加1×10-5mol.L-1罗格列酮,分别于干预24和48h后取细胞培养上清液,采用放射免疫法检测胰岛素水平和免疫荧光法检测细胞增殖情况,RT-PCR半定量法检测FOXO1和TSC2mRNA表达水平。结果:①1×10-6～1×10-5mol.L-1罗格列酮可以分别在不同浓度葡萄糖培养条件下使胰岛NIT-1细胞增殖(P<0.05),且这种变化趋势随剂量的增加而增加(即1×10-5mol.L-1罗格列酮组>1×10-6mol.L-1罗格列酮组>1×10-7mol.L-1罗格列酮组)。1×10-5mol.L-1的罗格列酮干预后,可见细胞凋亡百分率增加趋势随着葡萄糖浓度不断升高;②在同一浓度罗格列酮作用下,当葡萄糖浓度为11.1mmol.L-1时,胰岛素分泌水平最高,高于其他各组(均P<0.05),随着葡萄糖浓度增加,胰岛素分泌量逐渐下降(11.1mmol.L-1葡萄糖组>16.7mmol.L-1葡萄糖组>22.5mmol.L-1葡萄糖组>27.6mmol.L-1葡萄糖组),而葡萄糖为5.6mmol.L-1时,胰岛素分泌量最低;③在1×10-5mol.L-1罗格列酮干预后,FOXO1和TSC-2mRNA的表达水平均较未干预组明显下降,且呈现出5.6mmol.L-1组<11.1mmol.L-1组<16.7mmol.L-1组<22.5mmol.L-1组<27.6mmol.L-1组的变化趋势,而且葡萄糖浓度>16.7mmol.L-1的各组均较前面小剂量葡萄糖组(≤11.1mmol.L-1各组)表达明显。结论:罗格列酮可以通过直接影响胰岛β细胞内FOXO1和TSC2表达促进胰岛β细胞的增殖及影响细胞胰岛素分泌功能,提示通过调控FOXO1和TSC2表达,可以直接影响胰岛β细胞的生物学功能,如分泌功能、细胞的增殖与凋亡以及改善胰岛素抵抗状况。
- 乔伟刘丹孙情梁瑜祯冯乐平
- 关键词：葡萄糖罗格列酮
- LiCl对脐带血有核细胞增殖作用和信号传导研究
- 2011年
- 目的探讨不同浓度LiCl对脐带血有核细胞增殖、集落形成以及细胞凋亡的影响,观察在此过程中LiCl对脐带血有核细胞β-catenin表达的作用。方法应用红细胞裂解方法获得脐带血有核细胞,以5 000个/孔细胞接种到96孔板和1×105个/孔细胞接种到24孔板,应用不同浓度（10、20和40 mM）LiCl处理细胞,用MTT方法测定脐带血有核细胞增殖,以1×105个/孔细胞接种24孔细胞培养板,观察LiCl对细胞集落形成的影响;应用Hoechst 33342试剂盒荧光显微镜下检测细胞凋亡和应用Western blotting方法检测脐带血有核细胞β-catenin基因表达情况。结果随着LiCl浓度的不断增加（0～40 mM）和培养时间的不断延长（0~72h）,脐带血有核细胞增殖能力与相应对照组相比不断增加,分别呈现出不同程度的显著性差异（分别P〈0.05和P〈0.01）;应用20 mM浓度的LiCl培养10 d后,发现脐带血有核细胞集落形成能力与对照组相比差异有统计学意义（P〈0.05）,并呈现出明显的抑制细胞凋亡的作用;Western blotting结果发现,LiCl具有明显地诱导β-catenin基因表达的作用。结论 LiCl在一定条件下能够通过激活脐带血有核细胞内Wnt/β-catenin信号传导途径刺激细胞增殖,达到扩增脐带血有核细胞的目的。
- 冯乐平陈再明孙情于冉冉乔伟
- 关键词：LICL脐带血有核细胞细胞增殖
- 白花丹素对人舌癌Tca细胞增殖及凋亡作用的探讨被引量：9
- 2011年
- 目的探讨白花丹抑制舌癌细胞Tca的增殖及对细胞凋亡的影响。方法将舌癌细胞Tca按5×103个/孔的浓度接种于96孔细胞培养板,置于37℃,5%CO2的培养箱中预培养24 h,待细胞80%长满孔底,24 h后将白花丹分别按0.025,0.1,0.2,0.3 mg/ml和0.4 mg/ml分别加入各培养组中,每组5复孔。置37℃、5%CO2培养箱中培养。分别培养48,72,96,120 h后,用酶标仪在490 nm下,MTT染色法测定细胞增殖情况,计算白花丹对肿瘤细胞的抑制率。同时,Hoe-chest33342荧光染色法测定细胞核变化情况,观察细胞凋亡的形态学变化情况。结果随着白花丹浓度的增大和作用时间的延长,白花丹对人舌癌细胞增殖的抑制作用越明显。当药物浓度达0.4 mg/ml时,培养48 h时与其他各组比较有统计学意义(P<0.05或P<0.01),当药物浓度在0.3 mg/ml细胞培养达96 h时,与小于0.3 mg/ml和小于96 h培养时间的其他各组比较均有显著性差异(P<0.05),说明此点是白花丹有效成分抑制肿瘤细胞的一个关键点。细胞培养72 h后Hoechst33342染色发现,随着药物浓度的不断增加,凋亡细胞的数量越来越多。当药物浓度达到0.4 mg/ml时,镜下几乎很少见到完整的细胞核出现,相反出现了大量的细胞和碎片和不完整的细胞核。结论白花丹提取物可以有效抑制肿瘤细胞增长,导致肿瘤细胞大量地细胞凋亡,说明其在肿瘤治疗中具有很大的应用价值。
- 杜泽乡孙情乔伟于冉冉冯乐平
- 关键词：白花丹素舌癌增殖凋亡
- 罗格列酮对不同浓度葡萄糖条件下小鼠胰岛B细胞株NIT-1增殖、凋亡及功能的影响被引量：2
- 2009年
- 目的研究罗格列酮在不同浓度葡萄糖条件下对B细胞株NIT-1细胞增殖、凋亡及胰岛素分泌的影响。方法将NIT-1细胞按5×104个细胞/孔至24孔培养板中培养,根据培养基RPM1640葡萄糖浓度不同分为以下5组:G1组(5.6 mmol/L)、G2组(11.1 mmol/L)、G3组(16.7 mmol/L)、G4组(22.2 mmol/L)及G5组(27.6 mmol/L),继续培养72 h后,分别给予10-5mmol/L罗格列酮干预48 h后,取上清液采用放免法检测各组胰岛素水平;采用免疫荧光法检测凋亡细胞,MTT法检测细胞增殖情况。结果(1)罗格列酮能够明显抑制高浓度葡萄糖诱导的NIT-1细胞凋亡。施加罗格列酮浓度10-5mmol/L 48 h时后,能够明显抑制16.7 mmol/L、22.5 mmol/L和27.6 mmol/L浓度的葡萄糖所诱导的细胞凋亡。(2)罗格列酮能显著增加各浓度葡萄糖组NIT-1细胞的增殖活性。(3)罗格列酮能显著增加各葡萄糖浓度组的NIT-1细胞胰岛素分泌。结论罗格列酮可以通过直接作用于胰岛B细胞调节改善的胰岛B细胞的增殖及功能、抑制凋亡。
- 梁瑜祯冯乐平夏宁罗静思张梦霞黄荷
- 关键词：葡萄糖胰岛B细胞罗格列酮凋亡
- 高浓度葡萄糖对胰岛β细胞株NIT-1细胞Irs2、FoxO1表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨高浓度葡萄糖对胰岛β细胞胰岛素信号通路信号中胰岛素受体底物2(insulin reoeptor substance 2,Irs2)、叉头框转录因子1(forkhead transcription factors O1,FoxO1)表达的影响。方法:胰岛β细胞株NIT-1细胞培养48h后,随机分为不同葡萄糖浓度(5.6,11.1,16.7,22.5,27.6mmol/L)组,继续培养3d后终止,用MTT比色法检测细胞增殖,免疫荧光法检测细胞凋亡,放射免疫分析方法检测胰岛素水平,Real-Time PCR法检测Irs2、FoxO1mRNA变化。结果:(1)在葡萄糖浓度为11.1mmol/L时,NIT-1细胞增殖活性最强、细胞凋亡率最低,胰岛素分泌水平最高。随着葡萄糖浓度升高,细胞增殖活性和胰岛素分泌水平明显下降,细胞凋亡率逐渐增高。当葡萄糖浓度达27.6mmol/L时,细胞增殖活性和胰岛素分泌水平达最低,细胞凋亡率达到最高。(2)葡萄糖浓度为11.1mmol/L时,Irs2mRNA的转录达到最高水平,随着葡萄糖浓度的增高,Irs2mRNA的转录水平呈现逐渐减少趋势;FoxO1基因的mRNA转录水平则随着葡萄糖浓度的增高呈不断增加状态。结论:在高浓度葡萄糖条件下,葡萄糖"毒性"作用通过下调Irs2mRNA表达、增加核内的FoxO1mRNA表达以调节胰岛β细胞的功能及增殖和凋亡,分子间均有其独立的调控机制,同时又相互关联。
- 李莹芳夏宁冯乐平罗静思张梦霞黄荷梁瑜祯
- 关键词：高浓度葡萄糖FOXO1
