国家自然科学基金(81041063)
- 作品数：7 被引量：15H指数：2
- 相关作者：张德志刘丹平杨智洋付文举仲兴更多>>
- 相关机构：辽宁医学院附属第一医院辽宁医学院泰州市第二人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胰岛素样生长因子-1改善糖尿病大鼠骨质疏松及其机制的初步研究被引量：7
- 2014年
- 目的探讨胰岛素样生长因子-1（insulin-like growth factor-1,IGF-1）对糖尿病大鼠骨质疏松的影响及机制。方法取30只体质量220-250 g的雄性3月龄SD大鼠,腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,按随机数字表法分为对照组（正常大鼠腹腔注射PBS）、糖尿病组（糖尿病大鼠腹腔注射PBS）及IGF-1治疗组（糖尿病大鼠腹腔注射IGF-1）,3个月后观察骨源性碱性磷酸酶（bone alkaline phosphatase,BALP）含量、胫骨钙磷含量、胫骨灰与胫骨质量之比、骨形态发生蛋白-2（bone morphogenetic protein-2,BMP-2）表达及胫骨骨密度。结果对照组、糖尿病组及IGF-1组BALP含量分别为（2.42±0.56）、（1.54±0.41）及（2.18±0.62）ng/L,钙含量分别为（5.89±1.21）、（5.41±0.75）及（5.75±1.05）mol/L,磷含量分别为（3.78±0.56）、（3.21±0.47）及（3.67±0.41）mol/L,胫骨灰与胫骨质量比值分别为（67.21±0.81）%、（63.13±0.63）%及（65.81±0.21）%。与对照组相比,糖尿病组BALP含量低,胫骨BMP-2表达少,钙磷含量、胫骨灰重与胫骨质量比值、胫骨密度均下降（P〈0.05）。与糖尿病组相比,IGF-1组BALP含量增加,胫骨BMP-2表达上调,胫骨钙磷含量、胫骨灰重与胫骨质量比值、胫骨骨密度均显著提高（P〈0.05）。结论 IGF-1可增加糖尿病大鼠胫骨钙磷含量、提高胫骨灰重与胫骨质量比值、防止糖尿病大鼠骨质疏松,其机制可能与IGF-1促进骨骼BMP-2表达、提高BALP含量有关。
- 邓子阳刘学政张德志左中夫付云杰刘万鹏
- 关键词：胰岛素样生长因子-1糖尿病骨质疏松
- 四环素对糖皮质激素诱导的骨髓间充质干细胞损伤的保护作用
- 2011年
- 目的探讨四环素对糖皮质激素诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)损伤的保护作用。方法体外建立糖皮质激素诱导大鼠BMSCs损伤模型,分离与体外培养大鼠BMSCs。将大鼠BMSCs分为正常对照组、激素对照组,四环素4、20、100、500μg/ml浓度组。采用吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色法观察四环素对激素诱导的BMSCs凋亡的影响;采用MTT法检测各组BMSCs活性,绘制细胞生长曲线;用免疫组织化学方法对细胞凋亡因子bcl-2、bax进行分析;Western blot测定细胞凋亡因子caspase-3表达。结果吖啶橙/溴化乙锭染色显示细胞损伤为凋亡。四环素对激素抑制BMSCs的增殖有明显保护作用,并与四环素的浓度成一定的量效关系;100μg/ml的四环素能明显阻断激素诱导的BMSCs凋亡,其机制可能与提高bcl-2表达、降低bax、caspas-3表达有关。结论四环素具有保护激素诱导的BMSCs损伤的作用,这为早期干预治疗激素性骨坏死提供了依据。
- 杨智洋张德志仲兴崔凤荣郭涛张男刘丹平
- 关键词：骨髓间充质干细胞糖皮质激素四环素细胞凋亡
- BMSCs/EPCs联合移植治疗兔股骨头坏死的实验研究被引量：1
- 2014年
- 目的检测骨髓来源内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)与骨髓基质细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)移植到股骨头缺血坏死部位促进坏死区局部成骨和成血管能力。方法使用密度梯度离心法分离培养兔BMSCs、EPCs并鉴定。共培养细胞进行碱性磷酸酶活性检测以确定EPCs与BMSCs最佳比例。培养的细胞分成3组植入兔股骨头坏死模型:A组(单独移植BMSCs)、B组(单独移植EPCs)、C组(最佳比例联合移植BMSCs与EPCs),于术后4周对兔股骨头坏死模型进行成骨及成血管指标检测。结果 EPCs与BMSCs的最佳共培养比例为1∶1。与A组及B组相比,C组有着更高的BMP-2蛋白表达和更多的新生血管形成(P<0.05)。组织学检测显示:A组可见类骨质结构;B组可见血管结构,但类骨质生成较少;C组可见类骨质结构,并且可见密集的血管结构。结论以1∶1比例联合移植EPCs和BMSCs到股骨头坏死部位具有很强的成骨以及成血管能力。
- 於绍龙刘丹平赵辉齐鑫张解元
- 关键词：股骨头坏死骨形成血管形成
- 糖皮质激素性骨坏死动物模型的构建
- 2011年
- 目的探讨构建糖皮质激素性骨坏死动物模型的方法。方法 6月龄雌性新西兰兔10只,体质量(2.6±0.5)kg。用16号骨髓穿刺针穿透右侧股骨大粗隆间部骨皮质向骨髓腔内缓慢注射9.68×10-3M地塞米松,50 s注完,之后每间隔24 h于耳缘静脉给予地塞米松7.5 mg/kg,共5次。第8周取右侧粗隆间部骨组织标本进行大体和组织学观察。结果本组10只动物中有5只股骨大粗隆间部可见坏死骨组织,为色泽增白区域及黄色区域(正常骨组织为黄褐色);组织学观察骨组织空骨陷窝形成;小梁骨之间脂肪细胞肥大,脂肪组织增生,压迫、取代红骨髓;骨髓纤维组织增生明显,新生骨形成。结论糖皮质激素大剂量局部注射联合全身应用可成功构建兔糖皮质激素性骨坏死模型。
- 张德志杨智洋刘丹平胡蕴玉孟国林
- 关键词：骨坏死糖皮质激素
- 表达HIF1α^(mu) EPCs增强BMP2转染BMSCs成骨及成血管能力被引量：2
- 2015年
- 目的研究表达突变型低氧诱导因子1α的内皮祖细胞(EPCs)对骨形态形成蛋白2(BMP2)转染的骨髓基质细胞(BMSCs)成骨及成血管的影响。方法密度梯度离心法分离培养兔BMSCs和EPCs并鉴定,MTT法检测不同比例BMSCs/EPCs混合培养时增殖作用,以确定混合细胞比例。实验分为6组:A组(BMSCs);B组(Adv-BMP-2BMSCs);C组(BMSCs+EPCs);D组(Adv-BMP-2 BMSCs+EPCs);E组(BMSCs+Adv-HIF1αmu-EPCs);F组(AdvBMP-2 BMSCs+Adv-HIF1αmu-EPCs)。以Adv-HIF1αmu和Adv-BMP2的最佳转染指数(MOI)分别转染EPCs和BMSCs。Western blot检测HIF-1α和BMP-2蛋白表达。行碱性磷酸酶活性检测;用qRT-PCR检测相关基因的表达,以评价共培养细胞成骨和成血管情况。结果 BMSCs与EPCs以1∶1混合培养增殖能力优于1∶2及2∶1,故该实验混合细胞比例确定为1∶1。Adv-BMP-2 BMSCs和BMSCs组可见BMP-2蛋白表达且表达量高于EPCs和AdvHIF1αmu-EPCs组(P<0.05)。Adv-HIF1αmu-EPCs组可见HIF1α蛋白表达且表达量明显高于Adv-BMP-2 BMSCs、BMSCs及EPCs组(P<0.05)。F组ALP活性以及成骨和成血管相关基因表达高于其他组(P<0.05)。结论表达HIF1αmu的EPCs能够增强Adv-BMP-2 BMSCs成骨和成血管潜能。
- 於绍龙刘丹平赵辉齐鑫张解元李谌
- 关键词：成骨
- 脂多糖对体外培养成骨细胞凋亡影响的初步实验研究被引量：4
- 2014年
- 目的探讨脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)对成骨细胞凋亡的影响。方法体外培养成骨细胞作为细胞模型,对照组采用10%的FBS的DMEM/F12培养液培养,干预组在对照组正常培养1 d后加入10mmol/LLPS培养。取第3代成骨细胞按实验设计分组,于LPS作用后第1、3、5和7天进行形态学观察及成骨细胞增殖的检测,于LPS作用后第3、7、10和14天进行成骨细胞分化指标检测,于LPS作用后第1天采用流式细胞仪对成骨细胞凋亡进行检测。结果两组第1天细胞增殖差异无显著性(P>0.05),干预组第3、5和7天细胞增殖率低于对照组,差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。培养后第3、7、10和14天,对照组细胞碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)逐渐升高,干预组细胞ALP、BGP逐渐降低(P<0.05);同期比较,干预组细胞ALP和BGP含量低于对照组(P<0.01)。对照组成骨细胞第1天自发性凋亡率低于干预组(1.61±0.39)%<(3.14±0.60)%,差异有显著性(P<0.01)。结论一定浓度的内毒素可以诱导体外培养成骨细胞发生凋亡,并使其增殖与分化能力逐渐减弱。
- 付文举张德志仲兴高杨杨智洋
- 关键词：脂多糖成骨细胞细胞增殖细胞凋亡碱性磷酸酶
- 磷酸化PKC-δ对地塞米松诱导大鼠成骨细胞凋亡的影响被引量：1
- 2015年
- 目的观察磷酸化PKC-δ对地塞米松(Dex)诱导的大鼠成骨细胞凋亡的影响。方法取新生SD大鼠颅骨第3代成骨细胞,分为对照组、Dex组(1×10-7mol/L Dex)、PMA预处理组(1×10-7mol/L Dex+100 nmol/L PMA)、Rottlerin预处理组(1×10-7mol/L Dex+2μmol/L Rottlerin),培养24 h后采用MTT法检测细胞增殖活性,采用Annexin-V-FITC/PI染色流式细胞术和吖啶橙/溴乙锭(AO/EB)荧光染色法检测细胞凋亡,采用Western blotting法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3及磷酸化PKC-δ。结果与对照组相比,Dex组细胞增殖活性低,细胞凋亡多,磷酸化PKC-δ、Caspase-3、Bax表达高,Bcl-2表达低(P均<0.05)。与Dex组相比,PMA预处理组细胞增殖活性低,细胞凋亡多,磷酸化PKC-δ、Caspase-3、Bax表达高,Bcl-2表达低(P均<0.05)。与Dex组相比,Rottlerin预处理组细胞增殖活性高,细胞凋亡少,磷酸化PKC-δ、Caspase-3、Bax表达低,Bcl-2表达高(P均<0.05)。结论磷酸化PKC-δ可促进Dex诱导的大鼠成骨细胞凋亡。
- 付文举张德志王国喜刘玉林
- 关键词：成骨细胞
