湖北省自然科学基金(2011CDA079)
- 作品数：13 被引量：34H指数：4
- 相关作者：李晓华李阳杨振飞郭佳谭晖更多>>
- 相关机构：中南民族大学安徽省天长中学华中师范大学更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金国家大学生创新性实验计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 抗农作物病原真菌微生物的筛选及其聚酮合酶基因的分析被引量：1
- 2014年
- 以5种农作物病原真菌为指示菌,从湖北省神农架地区的土壤中筛选得到1株抗真菌放线菌,命名为ⅡR21菌株.经过形态观察、培养特征、生理生化分析和16S rDNA序列同源性分析,初步鉴定该菌株属于链霉菌属.发酵液稳定性研究表明：ⅡR21菌株发酵液在-20℃～80℃范围内具有较强的稳定性;在pH 4.0～7.0范围内,ⅡR21菌株发酵液的抑菌活性比较稳定;紫外光照射对发酵液的抑菌活性没有影响.对放线菌ⅡR21菌株中Ⅰ型PKS基因族中KS基因进行PCR扩增和分析,与其他KS序列相似性比较低,与其系统分类最近的Streptom yces natalensis相似性达77％.
- 郭佳吴金龙唐颜苹谭晖赖树锦李阳杨振飞陶新园陈鑫李晓华
- 关键词：链霉菌RDNA
- 一株产纤维素酶菌株的筛选及酶学性质被引量：3
- 2012年
- 以羧甲基纤维素钠为惟一碳源,从土壤中筛选出一株产纤维素酶的菌株XW-13,其摇瓶培养液的CMC酶活力为15.05μg/mL,滤纸酶活力为15.13μg/mL。酶学性质试验表明,该酶的最适反应pH 7.0,在pH 5.0～9.0时有较好的稳定性,酶活力保持60%以上。该酶的最适反应温度为40℃,在温度为20℃时基本稳定,保温2 h仍有80%以上的活力。在化合物浓度为0.2 mg/mL的条件下,NH4+、Na+、Fe2+、K+、Ca2+、Mn2+、Zn2+、Mg2+和Li+对酶活力有增进作用,Hg+和Cu2+对酶活力有抑制作用。
- 高剑锋李文鑫李汇龙耿旭梅谭晖郭佳李晓华
- 关键词：酶学性质
- 土壤类型对烟田土壤中微生物的影响被引量：2
- 2013年
- 对不同类型的烟田土壤中细菌、固氮菌、放线菌及真菌进行分离,对不同微生物种群进行数量和多样性分析。结果表明,不同类型烟田土壤中,黄棕壤中细菌和固氮菌数量均高于紫色土。黄棕壤烟田土壤中细菌、固氮菌、放线菌及真菌变化速率分别高于紫色土中4种微生物变化速率;在黄棕壤烟田土壤中,细菌、固氮菌、放线菌及真菌变化速率呈现递减规律。黄棕壤中4种微生物根土比之和高于紫色土。黄棕壤中细菌与真菌数量的比值(B/F)几乎都高于紫色土。黄棕壤根际土中微生物菌群多样性指数与非根际土中微生物菌群多样性指数之比高于紫色土。
- 许汝冰李进平孔文李长影郭佳胡功军陈良存李晓华
- 关键词：土壤类型
- 尼古丁降解菌SCUEC1菌株的分离及其降解基因被引量：8
- 2017年
- 【目的】分离并鉴定1株具有尼古丁降解能力的细菌,研究其尼古丁降解特性并对其降解基因进行分析,为尼古丁微生物降解提供基础。【方法】从烟草种植地土壤中分离1株具有尼古丁降解能力的细菌,通过16S r RNA基因和生理生化特性对该菌株进行鉴定,检测该菌株尼古丁降解率与生长量的关系,并进一步对该菌株进行尼古丁浓度耐受性测定,采用高通量测序技术对菌株进行全基因组测序,BLAST比对分析尼古丁降解相关基因。【结果】筛选到1株具有尼古丁降解能力的细菌,经鉴定命名为根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumerficience)SCUEC1菌株,根癌土壤杆菌SCUEC1菌株尼古丁降解率可达到94.81%,该菌株在尼古丁浓度为0.50–5.00 g/L范围内生长良好且有较高的尼古丁降解能力。对根癌土壤杆菌SCUEC1菌株全基因组序列进行BLAST比对分析,推测该菌株的尼古丁降解代谢途径与中间苍白杆菌SYJ1菌株的尼古丁降解途径相似。【结论】本研究揭示了Agrobacterium tumerficienceSCUEC1菌株具备尼古丁降解特性,初步推测出尼古丁降解相关基因和降解代谢途径,为尼古丁微生物降解提供基础。
- 梅枫孔雯李阳马婷婷皮婷何冬兰程国军刘涛李晓华
- 关键词：尼古丁降解特性代谢途径
- 烟碱降解菌SCUEC2菌株的分离及其降解特性被引量：4
- 2015年
- 以烟碱为惟一碳源,从湖北省襄阳市烟草种植土壤中分离得到1株烟碱降解菌,为蒙氏假单胞菌(Pseudomonas monteilii)SCUEC2。在30℃下,180 r/min摇床培养,烟碱质量浓度为1.00 g/L时,发酵10 h后烟碱降解率达到88.80%。在30℃下,180 r/min摇床培养48 h,烟碱质量浓度为6.00 g/L时,烟碱降解率为82.59%;烟碱质量浓度为7.00 g/L时,烟碱降解率和菌株生长呈下降趋势,烟碱降解率为18.94%。SCUEC2菌株发酵液经HPLC检测,结果显示,烟碱的保留时间为5.25 min左右,在培养到16 h时,烟碱峰峰面积明显减小,并在保留时间为11.79 min左右处出现一个新色谱峰,表明有中间代谢产物产生。
- 李阳杨振飞马婷婷陈涛龚传清李永辉李晓华
- 关键词：烟碱生物降解降解特性
- 烟碱降解菌DAB2菌株的筛选、鉴定和降解特性被引量：8
- 2013年
- 以烟碱为唯一碳源,从湖北省襄阳烟叶种植土壤中分离得到了一株烟碱降解菌,命名为DAB2,经形态观察、生理生化分析和16S rDNA序列分析,初步鉴定该菌株为中间苍白杆菌(O.intermedium).当培养基中烟碱质量浓度为1.0 g/L,DAB2菌株生长良好,烟碱降解率为88.42%;当烟碱质量浓度为3.0 g/L,降解率为52.46%;当烟碱质量浓度高于6.0 g/L时,菌株生长和烟碱降解率均呈下降趋势,烟碱降解率低于10.36%.DAB2菌株在烟碱质量浓度为1.0 g/L的烟碱培养基中培养,不同时间样品紫外扫描显示:0 h只有259nm处有吸收波峰,8 h时259nm处波峰降低,在230nm和290nm处出现了新峰,表明产生了中间产物.
- 李晓华杨晓潼翟贵发郭利王晓丽
- 关键词：烟碱生物降解RDNA
- 具有抗稻瘟病菌活性的链霉菌ⅠT2菌株的分离鉴定及其att B位点的分析被引量：2
- 2019年
- 以稻瘟病菌NO-1为指示菌,从神农架地区土壤中筛选得到一株微生物,命名为ⅠT2.通过形态、生理生化研究和16S rDNA基因序列同源性比对,初步鉴定为链霉菌属.不同发酵条件对链霉菌ⅠT2菌株发酵液抑菌活性的影响研究表明,链霉菌ⅠT2菌株较适合的发酵条件为:发酵温度26.5~30℃,发酵转速150 r/min,发酵时间48 h.利用PCR扩增获得ⅠT2菌株的att B位点序列,链霉菌ⅠT2菌株的att B位点序列长277 bp,与S.griseus M095的att B位点核心区域的序列的相似度为97%,具有发生交换的核心区域5′-TT.含有ΦC31 att P位点的整合型质粒pSET152可通过att P位点与链霉菌ⅠT2菌株通过其染色体上的att B位点发生位点特异性重组.
- 李晓华黄粤马婷婷皮婷姚家成夏珍珍冯喆温馨
- 关键词：稻瘟病菌位点特异性重组
- 稀有放线菌小单孢菌与大肠杆菌接合转移体系的构建被引量：1
- 2015年
- 为将外源基因导入小单孢菌,建立小单孢菌(Micromonospora)与大肠杆菌两亲接合转移方法,将包含小单孢菌内源质粒pJTU112复制区的4.7kb片段插入质粒pOJ260的BamHⅠ酶切位点,构建了能在大肠杆菌和小单孢菌中复制的穿梭载体pSCU207,将质粒pSCU207转化大肠杆菌ET12567/pUZ8002,再与小单孢菌LXH20进行两亲接合转移,挑取接合转移子,并进行验证。结果表明:质粒pSCU207通过大肠杆菌与小单孢菌新鲜菌丝之间接合转移导入小单孢菌中,并可稳定遗传;大肠杆菌与小单孢菌新鲜菌丝之间的最佳接合转移体积是40μL和400μL。
- 陈鑫杨振飞朱芮肖延辉郭利王晓丽李晓华
- 关键词：小单孢菌质粒稳定性
- 根癌土壤杆菌SCUEC1菌株尼古丁降解代谢中agnE基因的克隆与功能鉴定被引量：3
- 2018年
- 【目的】本研究对尼古丁降解菌根癌土壤杆菌SCUEC1菌株中agnE基因进行克隆表达,并对agnE基因表达蛋白进行功能鉴定。【方法】通过PCR扩增获得agn 全长基因(1029 bp),构建重组质粒pET28a-agnE,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株进行异源表达,采用SDS-PAGE检测重组蛋白。以2,5-二羟基吡啶作为反应底物,在检测波长320 nm下测定反应液吸光度值,进一步研究温度、pH值和金属离子对AgnE蛋白酶活性的影响。【结果】克隆得到基因agnE,构建了p ET28a-agnE重组质粒并进行了表达,AgnE蛋白分子量为42.0 kDa,表达蛋白以包涵体形式存在于细胞中。酶促反应0、5、10、20 min时反应液吸光度分别为0.6170、0.2273、0.0907、0.0667。在pH 8.0、温度20°C下,AgnE蛋白具有较高的2,5-二羟基吡啶双加氧酶活性,且Fe2+对酶活性具有明显的促进作用。【结论】明确了Agn E蛋白具有2,5-二羟基吡啶双加氧酶活性。
- 皮婷姚家成黄粤夏珍珍梅枫何冬兰程国军刘涛李晓华
- 抗真菌土壤放线菌的筛选鉴定、发酵培养基优化及发酵液稳定性研究被引量：4
- 2012年
- 以6种农作物病原真菌为指示菌,从湖北省神龙架地区的土壤中筛选得到1株抗真菌放线菌,命名为ⅡB21。经过形态观察、生理生化分析和16 S rDNA序列同源性分析,初步鉴定该菌株属于链霉菌属(Streptomyces)。通过单因素和正交试验确定优化后的发酵培养基配方为蔗糖10.00 g/L,牛肉膏4.00 g/L,K2HPO4 3.00 g/L,MgSO4 0.75 g/L,KH2PO4 1.00 g/L。发酵液稳定性试验表明,发酵液在30℃下达到最大抑菌活性,抑菌圈直径为41.16 mm,在4～60℃下具有较好的热稳定性,其抑菌圈直径均为最大抑菌活性的72.10%以上;发酵液在pH 3.0～10.0具有较好的酸碱稳定性,其抑菌圈直径均在最大抑菌活性的74.95%以上;发酵液中抑菌活性物质在紫外光照射下具有较好的稳定性。
- 谭晖李汇龙李文鑫吴金龙高剑锋余丕宁段颖李晓华
- 关键词：RDNA培养基优化发酵液
