国家科技重大专项(2014ZX08008-003)
- 作品数：8 被引量：28H指数：3
- 相关作者：张利蒋香菊汪立芹黄俊成杨楠更多>>
- 相关机构：石河子大学新疆农业大学新疆畜牧科学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金新疆维吾尔自治区科技支疆项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 杜泊羊体外胚胎生产效率的影响因素被引量：3
- 2016年
- 为了将绵羊体外胚胎发育技术应用于生产,采用活体采卵-体外受精的方法,对准备淘汰的杜泊羊进行外源激素处理,并对可能影响体外胚胎发育及移植后受胎效率如FSH剂量、公羊个体、获取卵母细胞方式等因素进行研究,结果发现:(1)每只供体注射FSH 240IU或420IU剂量对获得卵母细胞数、胚胎数及体外受精卵裂率没有明显影响(P>0.05);(2)不同公羊个体对卵母细胞体外受精效率有显著影响,但胚胎移植后受胎率没有明显影响(P>0.05);(3)活体采卵与屠宰场采卵方式相比,对卵母细胞的回收没有影响(12.24vs 13.84,P>0.05),但活体采集卵母细胞受精后的平均胚胎数显著低于后者(7.50vs 11.17,P<0.05),卵裂率极显著低于屠宰场采卵方式(60.92%vs 81.75%,P<0.01);(4)上述几组试验对受胎率都没有影响(P>0.05)。由此可见,供体使用240IU的FSH,选择受精效率好的公羊,能显著提高杜泊羊体外胚胎生产效率;离体采集卵母细胞体外发育效率高于活体采卵。
- 陈大勇汪立芹范利宏仇春娟李俊龙黄俊成
- 关键词：杜泊羊体外胚胎生产卵母细胞卵裂率受胎率
- 不同直径卵泡对绵羊卵母细胞体外发育能力的影响被引量：1
- 2014年
- 以屠宰场绵羊卵巢为材料,采用抽吸法收集小卵泡、中卵泡、大卵泡卵母细胞,研究不同卵泡直径对卵母细胞回收效果、比例分布以及对卵母细胞直径、谷胱甘肽(GSH)含量和体外发育能力的影响。结果表明,3种卵泡卵母细胞比例分布差异极显著(P<0.01);3种卵泡卵母细胞的回收率无显著差异(P>0.05),但中、大卵泡卵母细胞可用率极显著高于小卵泡卵母细胞(P<0.01);小卵泡卵母细胞的直径极显著小于中、大卵泡卵母细胞(P<0.01);中、大卵泡卵母细胞成熟培养24 h后GSH含量显著高于小卵泡卵母细胞(P<0.05);经孤雌激活体外培养后,中、大卵泡卵母细胞的成熟率分别极显著(P<0.01)、显著(P<0.05)高于小卵泡卵母细胞,中、大卵泡卵母细胞囊胚率极显著高于小卵泡卵母细胞(P<0.01);中卵泡卵母细胞囊胚细胞总数显著高于小卵泡卵母细胞(P<0.05),但与大卵泡卵母细胞差异不显著(P>0.05)。因此,直径≥2 mm的卵泡的卵母细胞适合体外培养和体外胚胎的生产。
- 张利汪立芹蒋香菊林嘉鹏吴阳升杨楠古丽米热刘莉黄俊成
- 关键词：绵羊卵母细胞孤雌激活
- Cas9技术介导兔和山羊MSTN与CLPG1基因编辑的研究
- 中国是山羊和兔养殖大国，具有丰富的地方品种资源，但是普遍存在着生长速度缓慢和产肉能力低下等缺陷，选育专门化的肉用山羊和兔品种、提高养殖经济效益势在必行。然而，传统的选育方法遗传进展缓慢，费时费力，随着功能主效基因的挖掘和...
- 郭日红
- 关键词：山羊MSTN基因
- 绵羊卵丘细胞直径与卵母细胞质量的相关性被引量：1
- 2014年
- 利用RT-PCR方法,检测不同直径绵羊卵泡卵丘细胞中FSHR、EGFR、GHR、b FGF、CYP19A、AMH基因的mRNA表达规律及卵母细胞孤雌激活后胚胎发育的影响,结果表明,大、中、小卵泡卵丘细胞中都有FSHR、EGFR、GHR、b FGF、CYP19A、AMH的mRNA表达,不同直径卵泡卵丘细胞呈现递增趋势,大卵泡卵丘细胞与中小卵泡的卵丘细胞相对表达量差异显著（P〈0.05）;AMH在直径〉5.0 mm的卵泡卵丘细胞中有所下降。不同大小卵泡卵母细胞经体外培养,结果表明,各卵泡卵母细胞直径组间成熟率不显著,随卵泡直径的增大卵裂率增加,1.0-2.0 mm组与2.1-5.0 mm组卵裂率都显著低于〉5 mm组（P〈0.05）,相互间无差异（P〉0.05）;囊胚率也呈现逐渐增加的趋势,卵泡大于5.0 mm卵母细胞组极显著高于1.0-2.0 mm组（P〈0.01）,2.1-5.0 mm组（P〈0.05）。证实卵丘细胞在绵羊卵母细胞成熟和受精及随后的胚胎发育过程中起重要作用,卵泡直径对卵母细胞发育能力产生影响。
- 古丽米热.阿布都热依木吴阳升林嘉鹏汪立芹张利蒋香菊杨楠唐淑红黄俊成
- 关键词：绵羊卵丘细胞卵母细胞RT-PCR
- TALENs和CRISPR／Cas9诱导绵羊成纤维细胞基因组定点双链断裂提高Rad51基因表达量
- 2015年
- 为检测不同限制性人工核酸内切酶对绵羊成纤维细胞Rad51基因m RNA转录和蛋白表达的影响,本实验将有效切割MSTN(myostatin)基因位点的TALENs和CRISPR/Cas9人工核酸酶电转染到体外培养的绵羊成纤维细胞中诱导产生DNA双链定点断裂,与正常和电转染p Max绿色荧光蛋白报告基因质粒的绵羊成纤维细胞进行对照,采用实时荧光定量PCR和Western Blot方法对不同处理的绵羊成纤维细胞Rad51基因m RNA转录和蛋白质的表达情况进行研究。结果表明:TALENs和CRISPA/Cas9人工核酸酶诱导产生的MSTN基因组DNA双链定点断裂能提高绵羊成纤维细胞Rad51基因表达量。
- 杨娇皮文辉周平李炜杰何高明
- 关键词：同源重组
- BCB染色液对绵羊不同直径卵泡卵母细胞的筛选作用被引量：1
- 2014年
- 为探讨亮甲酚蓝（BCB）染色液对绵羊不同直径卵泡卵母细胞的筛选作用，对筛选后的卯母细胞进行孤雌激活，统计不同组间成熟率、卵裂率及囊胚率的差异。将卵泡直径分为〈2mm、2～5mm、〉5mm共3组，经26μmol／L的BCB染色90min后，结果显示：（1）直径〉5mm卵泡中的卵母细胞阳性率极显著高于5mm以下卵泡组（P〈0．01）；（2）卵泡直径〉5mm中BCB＋组卵母细胞孤雌激活后的体外培养效率显著高于其余2组；（3）不同试验组卵母细胞孤雌激活后获得的囊胚总细胞数在BCB＋组卵母细胞中，直径2～5mm组与〉5mm组间没有显著差异（P〉0．05），但极显著高于直径〈2mm组（P〈0．01）；BcB-卵母细胞在各组间没有显著差异（P〉0．05）；未经染色的卵母细胞中，直径2～5mm组与〉5mm组间没有显著差异（P〉0．05），但显著高于直径〈2mm组（P〈0．05）；此外，〈2mm的卵母细胞，BCB＋组极显著高于对照组和BCB一组（P〈0．01），在直径2～5mm组和〉5mm组，BCB＋组、对照组和BCB-组均差异极显著（P〈0．01）。以上结果说明，直径〉2mm以上卵泡的卵母细胞用BCB染色液筛选后更适合体外培养。
- 张利汪立芹蒋香菊林嘉鹏吴阳升杨楠古丽米热黄俊成
- 关键词：BCB绵羊卵母细胞孤雌激活
- Scd1基因对山羊乳腺上皮细胞脂肪酸合成与代谢的影响
- 引言/目的硬脂酰辅酶去饱和酶1(Stearoyl-CoA desaturase 1,SCD1)在单不饱和脂肪酸的生物合成中发挥重要的功能,但其在奶山羊乳腺上皮细胞的脂肪酸合成与代谢过程中的作用尚不清楚。本研究采用过表达与...
- 任才芳王立中樊懿萱邓明田王锋
- 萨福克羔羊卵泡诱导发育效果的研究被引量：14
- 2015年
- 为稳定并提高萨福克羔羊卵泡发育效率,通过肌肉注射FSH和PMSG的方法,对可能影响萨福克羔羊激素诱导效果如羔羊日龄、体重、健康状况和季节等因素进行研究。结果显示：1）5-6周龄萨福克羔羊经激素处理后的平均卵泡数（114.18vs 22.17）、回收的卵母细胞数（82.54vs 12.83）以及可用卵母细胞数（72.79vs 10.83）极显著高于8-9周龄组（P〈0.01）;2）体重在8-18kg之间的5-6周龄羔羊,不影响处理效果（P〉0.05）;3）有疾病史的羔羊处理效果显著低于健康羔羊组（P〈0.01）;4）春、秋季节对羔羊卵泡发育及回收的卵母细胞数没有影响（P〉0.05）,但春季羔羊卵母细胞体外受精卵裂率（54.31%vs 73.93%）和囊胚率（21.34%vs 35.73%）显著低于秋季（P〈0.05）;5）秋季羔羊胚胎移植受胎率（51.33%vs 26.07%）显著高于春季（P〈0.05）;6）移植早期胚胎或囊胚期胚胎对受胎率没有影响（P〉0.05）。选择5-6周龄、体重在8-18kg之间、无疾病史的萨福克羔羊,能显著提高卵泡发育效率;秋季羔羊卵母细胞发育能力显著高于春季;相同季节内,移植早期胚胎或囊胚期胚胎受胎率间没有差异。
- 汪立芹何宗霖林嘉鹏吴阳升黄俊成
- 关键词：外源激素卵母细胞体外受精胚胎移植
- 克隆山羊脑组织异常的羟甲基化胞嘧啶和基因印记
- 引言/目的羟甲基化胞嘧啶(5-hmC)是DNA去甲基化的中间产物,同时也是一种稳定的表观遗传修饰。5-hmC与基因表达、老化、神经元发育和胚胎发育有关。克隆动物中异常的DNA甲基化已被广泛研究,而克隆动物中特定位点以及全...
- 邓明田刘孜斐张国敏郭日红万永杰王锋
- 羔羊卵巢AMH的免疫组织化学分析被引量：4
- 2014年
- 为探讨AMH在羔羊和成年羊卵巢中时间和空间表达变化,揭示卵泡生长发育调控的机制。收集1月龄羔羊和正常成年羊卵巢,采用HE染色观察卵巢的组织学特征,免疫组化法检测绵羊卵巢AMH蛋白表达分布,RT-PCR技术分析卵巢卵丘细胞中AMH基因的表达变化。结果显示,卵巢HE染色后,对外源激素处理有反应的卵巢存在大量的大直径卵泡,且无中等卵泡和小卵泡,也没有黄体化和排卵;对外源激素没有反应的卵巢仅存在原始卵泡和少量的初级卵泡,无有腔卵泡。免疫组化结果显示,AMH存在于生长期的腔前卵泡和小的有腔卵泡,以及卵丘细胞,大多原始卵泡无AMH的表达,而在原始卵泡向初级卵泡转变,外层的颗粒细胞由扁平向柱状转变时AMH有表达,颗粒细胞存在表达AMH和不表达AMH 2种类型。RT-PCR结果显示,羔羊卵丘细胞的表达量高于成年羊。AMH可能参与卵泡发育的启动、向促性腺激素依赖期的转变等过程的调控,其功能作用还有待于深入研究。
- 蒋香菊吴阳升张利古丽米热.阿不都热依木林嘉鹏汪立芹杨楠唐淑红黄俊成
- 关键词：AMH羔羊卵巢颗粒细胞
