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复方芪参提取物对瘢痕疙瘩成纤维细胞内Smad蛋白连接区的影响被引量：5: 2010年; 目的研究复方芪参提取物(CASE)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFs)内Smad蛋白连接区的影响。方法 MTT法检测CASE对新生牛血清(NBS)诱导的KFs增殖的影响;细胞免疫荧光染色法观察不同浓度(7.5、15、30mg/L)CASE对TGF-β1诱导的KFs内Smad2L和Smad3L蛋白磷酸化的影响;人体正常成纤维细胞(NFs)作为对照。结果 CASE(15、30、60mg/L)能够显著抑制NBS诱导的KFs的增殖,其IC50为18.90mg/L;TGF-β1能够诱导KFs内Smad2L和Smad3L蛋白磷酸化,而CASE(7.5、15、30mg/L)对这两种蛋白的磷酸化均具有明显的抑制作用,而TGF-β1对NFs中Smad2L和Smad3L蛋白表达无明显影响。结论 CASE能够抑制KFs细胞的增殖,其作用机制可能与抑制Smad2连接区和Smad3连接区磷酸化有关。; 黄维娟何淑芳杨雁周伏圣方巧云杨森张学军; 关键词：瘢痕疙瘩成纤维细胞转化生长因子-Β1 SMAD蛋白质类

应用SYBR荧光实时定量RT-PCR法检测TGF-β1诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞中PAI-1mRNA表达被引量：3: 2009年; 目的应用SYBR荧光实时定量RT—PCR法检测转化生长因子-β1（transforming growth factor betal，TGF-β1）诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞（keloid fibroblasts，KFS）中纤溶酶原激活物抑制剂-1（plasminogen activator inhibitor1，PAI-1）mRNA的表达。方法体外分离培养KFs，应用不同浓度（1．25～20pmol·L-1）TGF-β1刺激KFs3h或TGF-β1（10pmol·L-1）刺激KFs不同时间（0．5～6h），采用SYBRGreenI荧光实时定量RT—PCR法检测，以B—actin基因作为内参，计算各组PAI-1mRNA的相对表达量。结果与空白对照组相比，TGF-β1能明显诱导KFs中PAI-1mRNA的表达，10、20pmol·L-1浓度组表达比值分别增至4．19及4．44倍（P〈0．01）；TGF-β1（10pmol·L。）的1、2h时问组表达比值分别增至2．29及2．41倍（P〈0．05），3、6h时间组分别增至4．19及5．83倍（P〈0．01）。提示，TGF-β1诱导KFs中PAI=1mRNA表达的最适浓度为10pmol·L-1、最适时间为3h。结论利用SYBR荧光实时定量RT—PCR法检测TGF-β1诱导KFs中PAI-1mRNA的表达，为进一步研究瘢痕疙瘩中TGF-β1信号通路的靶基因调控机制，以及开发治疗瘢痕疙瘩的新药提供了基础。; 何淑芳杨林黄维娟杨雁周伏圣方巧云张安平杨森张学军; 关键词：瘢痕疙瘩纤溶酶原激活物抑制剂-1

黄芪有效部位群对大鼠肌成纤维细胞增殖移行及胞内Smads蛋白磷酸化的影响被引量：4: 2008年; 目的研究黄芪有效部位群（effective fractions of astragalus，EFA）对转化生长因子-β1（transforming growth factorbeta1，TGF-β1）诱导的大鼠肌成纤维细胞（myofibroblast，MFB）增殖、移行及胞内Smads蛋白磷酸化的影响。方法采用MTT法观察EFA不同浓度对新生小牛血清（NBS）或TGF-β1诱导的MFB细胞增殖的影响；浸润小室法观察EFA对TGF-β1诱导的MFB细胞移行的影响；免疫吸附和Westem blot法研究EFA对TGF-β1诱导的MFB细胞内Smads蛋白磷酸化的影响。结果EFA（10-160mg·L^-1）呈浓度依赖性抑制NBS及TGF-βl诱导的MFB细胞增殖；EFA（80mg·L^-1）能明显抑制TGF-β1诱导的MFB细胞移行；EFA（10-80mg·L^-1）呈浓度依赖性抑制TGF-β1诱导的MFB细胞内Smad2C、Smad2L蛋白磷酸化，但各组间Smad2／3蛋白表达水平无差别。结论EFA通过干扰TGF-β／Smad信号转导通路而抑制MFB细胞的增殖、移行从而起到抗肝纤维化的作用。; 何淑芳梁佳玉方佳杨林杨雁张学军; 关键词：肌成纤维细胞 SMAD

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安徽省高校省级自然科学研究项目(KJ2008A30ZC)