国家自然科学基金(30860184)
- 作品数：38 被引量：53H指数：4
- 相关作者：方南洙李钟淑尹多韩岩杨月春更多>>
- 相关机构：延边大学吉林农业科技学院中国农业科学院特产研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金振兴东北老工业基地项目国家教育部“211”工程更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 过氧化氢和谷胱甘肽对延边黄牛体细胞克隆胚胎氧化损伤的影响被引量：1
- 2012年
- 在延边黄牛体细胞克隆胚胎体外培养液中分别添加H2O2和GSH,观察重组胚体外发育情况,探究二者对延边黄牛体细胞克隆胚胎氧化损伤的影响。结果表明:不同时间添加H2O2时0～24 h组卵裂率显著高于其它组(P<0.05),48～72 h组16细胞以上发育率显著低于其它处理组(P<0.05)。不同时间不添加H2O2时48～72 h组16细胞期以上发育率显著高于0～24 h组和24～48 h组(P<0.05),24～48 h组显著高于0～24 h组(P<0.05)。不同时间添加GSH时0～24 h组和24～48 h组卵裂率显著高于对照组、48～72 h组和72～96 h组(P<0.05),对照组16细胞以上发育率显著低于48～72 h组和72～96 h组(P<0.05)。结论:H2O2对延边黄牛体细胞克隆胚胎发育前期的氧化损伤较大,特别是在48～72 h。培养前期添加1 mmol/L的GSH能够有效提高延边黄牛体细胞克隆胚胎体外发育效率,缓解有害应激带来的氧化损伤。
- 杨月春王士勇李钟淑方南洙
- 关键词：过氧化氢谷胱甘肽体细胞克隆
- 延边黄牛核移植胚胎的活性氧含量的测定被引量：3
- 2010年
- 为了研究延边黄牛体细胞克隆胚胎内部的活性氧水平,以延边黄牛孤雌激活胚胎为对照,用2,′7′-二氯荧光素二乙酸酯和二氢乙锭两种染料分别对体细胞克隆胚胎进行染色,测定其内部超氧阴离子和过氧化氢含量。结果表明,2细胞期处理组间超氧阴离子水平差异不显著(P>0.05),其它细胞期体细胞克隆组均显著高于孤雌激活组(P<0.05),过氧化氢水平各细胞期体细胞克隆胚胎均显著高于孤雌激活胚胎(P<0.05)。因此,延边黄牛体细胞克隆胚胎氧化损伤水平显著高于孤雌激活胚胎。
- 杨月春王士勇李钟淑李福俊方南洙
- 关键词：延边黄牛核移植孤雌激活活性氧
- 黑熊-牛异种重构胚最佳供体的研究
- 2011年
- 选用不同代数的黑熊成纤维细胞(3～6、7～9、10～12代)构建异种重构胚,筛选出最佳供体细胞代数,根据卵裂率、多细胞胚发育率、囊胚率评价黑熊成纤维细胞质量。结果表明,7～9代组与3～6代组、10～12代组卵裂率、多细胞胚发育率差异显著,3～6代组和10～12代组差异不显著,3组囊胚率差异均不显著。说明7～9代黑熊成纤维细胞为最佳供体细胞代数,且异种重构胚发育率最高。
- 袁慧敏张旭成王贺高璐方南洙李钟淑李福俊
- 关键词：黑熊成纤维细胞
- 自由基吸收类抗氧化剂对延边黄牛体细胞克隆重构胚发育的影响被引量：1
- 2012年
- 为提高延边黄牛体细胞克隆重构胚发育率,研究了在体外培养液中单独添加不同浓度的自由基吸收类抗氧化剂维生素E(VE)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和亚硒酸钠(SS)对克隆重构胚发育率的影响。试验中选择成熟培养20～22h的卵母细胞,脱颗粒细胞后选择排出第一极体的卵母细胞进行去核与注核操作,然后将融合、激活后的重构胚在添加不同种类不同浓度抗氧化剂的体外培养液中进行培养。结果表明,在卵裂率上,VE的100μmol.L-1组显著高于其他3组(84.58%vs 57.64%、70.87%、67.64%);50和200μmol.L-1组之间无差异,但都显著高于0μmol.L-1组(70.87%、67.64%vs 57.64%)。EGCG的7.5和15μmol.L-1组显著高于加0μmol.L-1组(79.47%、81.67%vs 69.47%)且其他2组间差异不显著。SS的添加,5ng.mL-1组与0和10ng.mL-1组有显著差异(80.44%vs 70.27%、67.16%);与2.5ng.mL-1组差异不显著(80.44%vs 73.92%),且其他2组间差异不显著;在囊胚发育率上,VE的100μmol.L-1组要显著高于其他3组(26.36%vs 13.04%、18.08%、17.26%)。EGCG的15μmol.L-1组显著高于0和30μmol.L-1组(24.86%vs 8.99%、12.10%),和7.5μmol.L-1组无差异。SS的5与0组和10ng.mL-1组有显著差异(23.31%vs 10.32%、12.65%);2.5ng.mL-1组与0和10ng.mL-1l组有显著差异(19.97%vs 10.32%、12.65%)且其他2组间差异不显著。体外培养液中分别单独添加浓度为100μmol.L-1、15μmol.L-1和5ng.mL-1的维生素E,EGCG和亚硒酸钠都能够显著提高延边黄体细胞克隆牛重构胚的发育率。
- 尹多朱玉霞柳海星李钟淑方南洙
- 关键词：延边黄牛体细胞克隆抗氧化剂
- 季节对延边黄牛卵母细胞质量及体细胞核移植胚胎发育的影响被引量：1
- 2012年
- 研究季节对延边黄牛卵巢质量和卵母细胞的数量、质量、体外成熟以及核移植重组胚发育的影响。持续1年采集延边黄牛卵巢,分级卵巢,抽取卵巢表面直径2～8 mm的卵泡内的卵母细胞,收集后进行体外成熟和重组胚的体外培养。结果表明,1级卵巢的比例在春冬季时明显高于秋季(P<0.05),2级卵巢的比例在春夏季高于冬季(P<0.05),秋季的3级卵巢比例最高,与其他季节有显著差异(P<0.05);在秋冬季,平均每个卵巢拣出卵母细胞数高于春夏季(P<0.05),成熟率上,秋季显著高于春夏季(P<0.05),但与冬季并无差异且其他各组间无显著差异(P>0.05);卵裂率上,秋季与春季有差异(P<0.05),但与其他季节无显著差异(P>0.05),囊胚率上,各组之间均无显著差异(P>0.05)。通过研究发现,季节对延边黄牛卵母细胞的可用回收数量及其质量都会产生影响且秋季为延边黄牛体细胞核移植实验最适合季节。
- 尹多柳海星李钟淑许相勋方南洙
- 关键词：卵母细胞体外成熟核移植
- 成熟液中添加巯基物质对延边黄牛体细胞克隆效率的影响
- 随着体细胞克隆技术的不断发展,卵母细胞的体外成熟已成为胚胎工程领域的一项基础性实验。卵母细胞的体外成熟(IVM)不仅是胚胎体外生产的关键一环,还可以为体细胞核移植提供受体卵母细胞。卵母细胞的成熟是一个复杂的动态过程,有许...
- 李丽刘佳丽张宇李钟淑方南洙
- 关键词：延边黄牛体外成熟GSH克隆效率
- 文献传递
- 不同受体胞质对延边黄牛体细胞核移植效率的影响被引量：1
- 2011年
- 为确定延边黄牛体细胞核移植过程中卵母细胞的最佳去核时期,本试验选取体外成熟22 h的中期(MⅡ期)卵母细胞与体外成熟28 h的末期(TⅡ期)卵母细胞进行化学辅助去核操作,并将去核的卵母细胞作为受体构建重构胚,后期观察发育情况。结果显示,M期卵母细胞的显核率与TⅡ期卵母细胞的显核率无显著差异;但是TⅡ期卵母细胞所得重构胚的卵裂率及囊胚率均显著高于MⅡ期卵母细胞所得重构胚的卵裂率及囊胚率。综上所述,卵母细胞体外成熟28 h后的TⅡ期可作为延边黄牛核移植去核操作的理想时期,在TⅡ期卵母细胞中选择化学辅助去核法去核能够提高延边黄牛体细胞克隆的效率。
- 朱玉霞王玉涵李钟淑方南洙
- 关键词：体外成熟延边黄牛
- 延边黄牛体细胞核移植胚胎编码抗氧化酶的基因表达研究被引量：1
- 2016年
- 为研究延边黄牛体细胞核移植(SCNT)胚胎编码过氧化氢酶(CAT)、锰超氧化物酶(Mn-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的mRNA表达情况,以孤雌激活(PA)胚胎为对照,利用反转录PCR扩增延边黄牛SCNT胚胎编码CAT、Mn-SOD和GPx的mRNA,琼脂糖凝胶电泳后使用计算机软件进行半定量分析。结果显示:延边黄牛SCNT胚胎编码CAT的基因在2细胞期开始表达,且与PA胚胎存在显著差异(P<0.05);编码Mn-SOD的基因在8细胞期开始表达,与PA胚胎在16细胞期以上时期差异显著(P<0.05);编码GPx的基因在4细胞期开始表达,与PA胚胎在4细胞期差异显著(P<0.05),8细胞期以上时期差异不显著(P<0.05)。与孤雌激活胚胎的差异表明SCNT胚胎抗氧化酶表达的异常可能是由核移植操作过程所引起的。
- 杨月春王士勇李钟淑方南洙
- 关键词：延边黄牛体细胞核移植孤雌激活抗氧化酶基因表达
- 延边黄牛体细胞克隆胚胎体外培养的初步研究
- 在开展延边黄牛体细胞克隆研究之处,为了确立重组胚体外培养体系,本文以CR1aa培养液为基础研究了0mM、1mM、2mM和3mM四个浓度谷胱甘肽对重组胚体外发育的影响,比较了72h前无血清培养和第五天添加1mg/ml的葡萄...
- 王士勇杨月春李钟淑方南洙李福俊
- 关键词：延边黄牛体细胞克隆体外培养
- 文献传递
- 延边黄牛体细胞克隆胚胎的核型分析
- 为了从细胞遗传学的角度研究延边黄牛体细胞克隆胚胎的染色体,了解其遗传学特性,以期克服克隆动物的生理缺陷,为延边黄牛的繁育提供更为有效的细胞遗传学资料。本试验采用传统的细胞遗传学方法,利用延边黄牛体细胞克隆6～8天后产生的...
- 张宇吴昊方南洙李钟淑
- 关键词：延边黄牛染色体C-带G-带
- 文献传递
