广东省中医药管理局科研基金(2008098)
- 作品数:2 被引量:3H指数:1
- 相关作者:李育敏费嘉陈万群郭敏谷景义更多>>
- 相关机构:暨南大学更多>>
- 发文基金:广东省中医药管理局科研基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- miRNA-21反义核酸对人淋巴瘤Raji细胞的生长抑制作用研究被引量:1
- 2009年
- 为研究以miRNA-21为靶标的反义核酸(AMO-miR-21)对淋巴瘤Raji细胞的生长抑制作用,使用LipofectamineTM 2000将化学合成的反义核酸转染Raji细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和台盼蓝拒染法检测细胞生长抑制率;实时定量PCR技术检测细胞miRNA-21水平改变;PI和Annexin V双染,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果显示转染Raji细胞48~72h,反义核酸组细胞生长受到明显抑制,反义核酸抑制细胞活性的最佳浓度是0.4μmol/L;细胞内miRNA-21的表达水平明显下调;细胞凋亡明显增加;此外,反义组细胞中抑癌基因Pdcd4的mRNA和蛋白质呈高水平表达.提示以miRNA-21为靶标的反义核酸是人淋巴瘤Raji细胞生长的有效抑制剂和凋亡诱导剂.miRNA-21可能是淋巴瘤治疗的潜在靶标,其通过下调抑癌基因Pdcd4的表达水平发挥抗肿瘤作用.
- 李育敏董大伟唐杰坷霍毅民王丽鹏费嘉
- 关键词:MIRNA-21反义核酸RAJI细胞细胞凋亡
- 靶向抑制微小RNA-21提高白血病细胞对三氧化二砷的敏感性研究被引量:2
- 2010年
- 目的探讨以微小RNA-21(microRNA-21,miRNA-21)为靶标的反义核酸(AMO-miR-21)提高白血病K562细胞对三氧化二砷(As2O3)的敏感性及可能的作用机制。方法利用LipofectamineTM 2000将化学合成的反义核酸转染K562细胞。MTT法检测单独使用AMO-miR-21、As2O3以及两者联合使用对细胞增殖的抑制作用,并计算抑制率和IC50;PI单染检测细胞周期及凋亡;实时定量PCR检测miRNA-21表达水平的改变;免疫荧光法检测miRNA-21候选靶基因PDCD4蛋白表达的改变。结果AMO-miR-21与As2O3联合使用后,IC50从2.10μmol/L降低到1.23μmol/L,敏感性提高到单用As2O3的1.78倍;AMO-miR-21联合As2O3组细胞凋亡明显增加(P<0.05);单独转染AMO-miR-21可显著抑制K562细胞中miRNA-21的表达水平(P<0.01),同时抑癌基因PDCD4蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论AMO-miR-21与As2O3联合使用可提高K562细胞对As2O3的敏感性,为白血病的治疗提供了新的方法。AMO-miR-21通过靶向抑制miRNA-21,进而上调抑癌基因PDCD4的表达而发挥抗肿瘤作用。
- 李育敏谷景义朱雪娇陈万群郭敏姚君琳林春燕费嘉
- 关键词:微小RNA-21反义寡核苷酸三氧化二砷白血病化疗敏感性