卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室开放基金(WK014-003)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 相关作者：高琪陶志勇刘耀宝顾亚萍夏惠更多>>
- 相关机构：蚌埠医学院卫生部更多>>
- 发文基金：卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室开放基金安徽省高校省级自然科学研究项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗疟原虫单抗M26-32 IgM的单体化及其免疫学特性研究被引量：2
- 2014年
- 目的改造IgM类抗疟原虫单抗M26-32为单体IgM亚单位,胶体金标记天然和改造后两种M26-32用于检测疟原虫抗原。方法复苏培养M26-32杂交瘤细胞,接种BALB/c小鼠,收集含有单抗的腹水,用商品HiTrap IgM HP柱纯化腹水中的IgM抗体,并用L-半胱氨酸裂解IgM类M26-32单抗成单体IgM亚单位。经间接免疫荧光检定两种抗体的效价,并用胶体金标记,分别检测恶性疟原虫和间日疟原虫可溶性抗原。结果接种20只小鼠,共采集约80mL单抗腹水,经HiTrap IgM HP柱纯化,获得了纯度较高的M26-32单抗。经L-半胱氨酸裂解后,Native电泳显示天然IgM被裂解为单体亚单位,IFA结果显示,亚单位M26-32与天然五聚体IgM滴度无差别。经胶体金标记后,两种金标抗体均分别能检测1∶100稀释的恶性疟原虫和1∶10稀释的间日疟原虫可溶性抗原。结论建立了L-半胱氨酸裂解IgM类M26-32单抗为单体IgM亚单位及其胶体金标记的方法,为利用M26-32进一步制备相应快速诊断工具奠定基础。
- 陶志勇徐岁夏惠顾亚萍刘耀宝方强高琪
- 关键词：疟疾IGM胶体金
