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人BAFF-R基因启动子活性的初步研究: 2010年; 目的以B淋巴细胞刺激因子受体BAFF-R基因5'上游区序列为研究对象,初步鉴定、分析该基因的启动子所在区域。方法克隆BAFF-R基因5'侧翼区1823 bp序列,构建8个含有不同长度启动子序列的荧光素酶报告基因表达质粒pGL3-B1～B8,将这8个序列缺失重组质粒与psv-β-gal质粒共转染细胞,检测荧光素酶的相对活性,确定启动子所在区域。结果8个重组质粒中pGL3-B2、pGL3-B3、pGL3-B5、pGL3-B6启动子的活性较低;pGL3-B7启动子的活性最强,pGL3-B8启动子活性最低。结论BAFF-R基因5'端-288～-430、-712～-868和-1420～-1562三个区段可能存在转录沉默子元件,-617～-712和-1277～-1420区段存在转录增强子元件,BAFF-R基因的核心启动子可能位于-1420～+261区域。; 袁宏香钱晶晶王惠民王跃国吴信华祝文彩浦江申娴娟鞠少卿; 关键词：启动子报告基因

B淋巴细胞刺激因子及其受体在多发性骨髓瘤中的表达及其意义被引量：3: 2009年; 目的探讨B淋巴细胞刺激因子（BLyS）及其受体在多发性骨髓瘤（MM）中的表达及其意义。方法采用流式细胞术（FCM）分析人MM肿瘤细胞系KM3及CZ-1细胞表面BLyS及其受体的表达；RT—PCR及Western blot进一步验证BLyS及其受体的表达；采用荧光免疫细胞化学法和激光共聚焦技术鉴定KM3细胞中BEyS蛋白的表达与定位；WST细胞增殖实验检测BLyS对MM肿瘤细胞生长与存活的影响。ELISA及荧光定量-聚合酶链反应（RTQ-PcR）测定MM患者BLyS蛋白与mRNA的表达水平。同时分析乳酸脱氢酶（LDH）、β2微球蛋白浓度与BLys蛋白及mRNA表达水平的关系。结果①MM细胞能够表达BLyS及其受体；②BLyS定位表达于KM3细胞的浆膜上；③BLyS促进MM细胞的生长与存活；④MM患者BLys蛋白或mRNA表达水平显著高于正常对照组（P值均〈0．01）；⑤直线相关分析显示LDH、β2微球蛋白浓度与BLyS蛋白及mRNA表达水平呈显著相关性。结论BLyS及其受体对于MM发生、发展可能起着重要的作用。; 浦江王跃国王梅袁红香鞠少卿; 关键词：多发性骨髓瘤 B淋巴细胞刺激因子乳酸脱氢酶 Β2微球蛋白

IFN-γ和IL-6对多发性骨髓瘤B淋巴细胞刺激因子表达变化的调控研究被引量：2: 2009年; 目的探讨IFN-γ和IL-6对多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）B淋巴细胞刺激因子（BLyS）表达变化的影响及相关机制。方法采用流式细胞术、实时荧光定量PCR、ELISA及Western blot方法分析人MM肿瘤细胞KM3在IFN-γ和IL-6以及相关信号通路特异性抑制剂作用前后BLyS表达水平的变化。结果IFN-γ和IL-6促进KM3细胞BLyS的表达水平；NF—κB抑制剂能够抑制BLyS的表达水平；NF—κB抑制剂BAY11-7082能够完全下调IFN-γ引起的BLyS表达的上调作用；抑制促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）的活性能够下调BLyS的表达水平。结论MAPK与NF—κB信号通路参与了BLyS的表达调节。; 浦江王跃国倪红兵王梅袁宏香鞠少卿; 关键词：多发性骨髓瘤 B淋巴细胞刺激因子核转录因子ΚB 促分裂原活化蛋白激酶

多发性骨髓瘤患者B淋巴细胞刺激因子及其受体的表达水平被引量：10: 2009年; 目的探讨B细胞激活因子（BLyS）及其受体在多发性骨髓瘤（MM）发病中的作用机制.方法用酶联免疫吸附测定法（ELISA）和实时荧光定量聚合酶链反应（RFQ—PCR），对31例MM患者和30名健康人血清BLyS含量、外周血单个核细胞（PBMCs）中BLyS及其受体mRNA含量进行检测;并比较MM患者血清BLyS含量与外周血PBMCs中BLyS及其受体基因表达水平和β2微球蛋白（β2M）的相关性.结果MM患者血清BLyS含量（6．99±3．28g/L）明显高于健康对照组（2．70±1．09g/L，P〈0．01），并与β2M浓度呈正相关性（r=0．954，P=0．000）;77．42%（24/31），93．55%（29/31），90．32%（28/31）的MM患者血清BLyS蛋白和PBMCs中BLyS，B细胞成熟抗原（BCMA）mRNA表达水平较正常人明显增高，并且也与β2M的含量呈正相关;而64．52%（20/31）患者穿膜蛋白活化物（TACI）mRNA表达水平降低.结论MM患者的血清BLyS蛋白浓度和PBMCs中BLyS及其受体基因表达水平有异常改变，说明BLyS及其受体可能参与MM的发病;BLyS及其受体表达水平也许可作为预后的一个指标.; 王金湖倪红兵王旭东浦江杨剑虹鞠少卿; 关键词：B淋巴细胞刺激因子多发性骨髓瘤 B2微球蛋白

NF-κB抑制剂和IFN-γ对BAFF-R基因启动子活性的影响被引量：1: 2010年; 目的:探讨IFN-γ和NF-κB抑制剂对人BAFF-R基因启动子活性的影响。方法:以人全血基因组DNA为模板,PCR方法扩增得到BAFF-R基因转录起始点上游5’端-1562^+261 bp的片段,与荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic连接构建8个序列缺失质粒。将重组质粒瞬时转染人多发性骨髓瘤细胞株KM3,通过检测荧光素酶的相对活性,确定启动子活性最强的区域;分别用NF-κB抑制剂(BAY11-7082)和IFN-γ对活性最强的启动子进行干预,测定并比较荧光素酶的相对活性;同时RT-PCR检测干预前后BAFF-R基因mRNA的表达水平。结果:IFN-γ对BAFF-R基因启动子活性有促进作用并且可以上调BAFF-R mRNA的表达,NF-κB抑制剂(BAY11-7082)对BAFF-R基因启动子活性有抑制作用并且可以下调BAFF-R mRNA的表达。结论:IFN-γ和NF-κB信号通路参与了BAFF-R基因的转录调控,为进一步研究BAFF-R的调节机制提供了基本的依据。; 袁宏香王跃国吴信华倪红兵浦江申娴娟鞠少卿; 关键词：BAFF-R 启动子 IFN-Γ NFΚ-B

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南通市科技局社会发展科技计划项目(S2007035)