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筛选大叶蛇葡萄体外抗肿瘤活性物质被引量：5: 2015年; 目的研究大叶蛇葡萄提取物对He La细胞增殖的影响,筛选有效抗肿瘤活性物质。方法采用MTT法检测不同质量浓度的大叶蛇葡萄石油醚、乙酸乙酯及水层萃取物和蛇葡萄素、杨梅素、杨梅苷、槲皮素及槲皮苷分别作用于He La细胞24、48、72 h后对细胞增殖的抑制作用。流式细胞仪检测蛇葡萄素对细胞周期的影响。结果乙酸乙酯萃取物、蛇葡萄素和杨梅素均有不同程度抑制He La细胞增殖的作用,且在一定剂量范围内,具有时效或量效关系;碘化丙啶单染法显示蛇葡萄素作用He La细胞12 h,G0/G1期细胞比率降低,S期细胞比率增加。结论乙酸乙酯提取物、蛇葡萄素和杨梅素对He La细胞增殖有明显抑制作用,且蛇葡萄素可能通过阻滞He La细胞于S期而诱导细胞凋亡。; 桂春黄静程佩佩方玉夏叶张秀桥; 关键词：大叶蛇葡萄蛇葡萄素杨梅素抗肿瘤 HELA细胞细胞周期

大叶蛇葡萄蛋白质组双向电泳分析被引量：2: 2014年; 目的:利用双向电泳法研究大叶蛇葡萄活性成分蛋白表达。方法:采用Tris饱和酚提取和醋酸铵甲醇沉淀大叶蛇葡萄嫩叶中的蛋白质;运用双向电泳法分离蛋白质,并对扫描后的二维凝胶电泳图谱进行分析,得到蛋白质表征图谱。结果:根据各个样品间蛋白点灰度值的比值差异,选择了差异较大的7个蛋白点进行质谱鉴定,鉴定了其中两种蛋白,分别为Hypothetical Protein和Unnamed Protein Product。结论:双向电泳技术的应用为从分子水平研究大叶蛇葡萄活性成分蛋白表达奠定了良好的基础。; 黄静桂春答国政夏叶程佩佩张秀桥; 关键词：大叶蛇葡萄蛋白质组蛋白质提取双向电泳

大叶蛇葡萄不同提取物总黄酮含量测定被引量：4: 2012年; 目的比较不同提取方法所得大叶蛇葡萄提取物的总黄酮含量。方法分别用乙醇加热回流法和渗漉法提取大叶蛇葡萄总黄酮,以蛇葡萄素为对照品,采用紫外分光光度法,在311 nm波长处测定。结果平均加样回收率为99.36%,RSD为1.59%,回流法所得提取物总黄酮的含量为640.74 mg.g-1;渗漉法所得提取物总黄酮含量为672.38mg.g-1。结论该测定方法操作简单,准确可靠,可作为大叶蛇葡萄提取物总黄酮的含量测定方法。渗漉法所得提取物中总黄酮含量略高于回流法。; 何枭宇杨若婧朱志凯江灿张秀桥刘焱文; 关键词：总黄酮

大叶蛇葡萄胶囊中总黄酮含量测定的研究被引量：1: 2013年; 目的建立大叶蛇葡萄胶囊中总黄酮含量的测定方法。方法采用紫外分光光度法进行测定,样品与AlCl3反应,形成络合物,测定波长310 nm。结果以蛇葡萄素为对照,建立的含量测定方法在0.004～0.012 mg.ml-1范围内,溶液吸收度值和蛇葡萄素浓度呈良好线性关系(r=0.999 6),平均加样回收率为98.05%,RSD为1.84%。结论该方法准确、可靠,可用于大叶蛇葡萄胶囊的质量控制。; 朱志凯江灿陈敏张秀桥; 关键词：总黄酮紫外分光光度法

大叶蛇葡萄提取物对SMMC-7721细胞增殖抑制作用的研究被引量：3: 2017年; 目的:研究大叶蛇葡萄叶及嫩茎提取物对SMMC-7721细胞增殖的影响,筛选其有效抗肿瘤活性物质。方法:采用MTT法检测不同质量浓度的大叶蛇葡萄石油醚萃取物部位、乙酸乙酯萃取物部位及水溶性物部位,以及该植物中含有的蛇葡萄素、杨梅素、杨梅苷、大黄素及槲皮素分别作用24、48、72 h后对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用。结果:乙酸乙酯萃取物部位和大黄素均能不同程度地抑制SMMC-7721细胞增殖,乙酸乙酯萃取物部位对细胞的抑制作用在100μg·mL^(-1)时具有一定的时效关系,大黄素对细胞的抑制作用在40、80、160μmol·L^(-1)时也具有一定的时效关系,乙酸乙酯萃取物部位和大黄素作用SMMC-7721细胞72 h的IC_(50)分别为110.81μg·mL^(-1)和53.20μmol·L^(-1)。结论:大叶蛇葡萄提取物具有较好的体外抗肿瘤活性。; 黄静桂春答国政尚祥伟明小芳张秀桥; 关键词：大叶蛇葡萄 SMMC-7721细胞增殖抑制

大叶蛇葡萄类黄酮-3'-羟化酶基因(F3'H)的克隆及生物信息学分析被引量：2: 2021年; 类黄酮-3’-羟化酶(F3’H)是黄酮化合物生物合成过程中的关键酶之一,本研究从大叶蛇葡萄转录组数据库中筛选出类黄酮-3’-羟化酶基因(F3’H),利用RT-PCR等技术克隆了其全长序列,并分析F3’H基因编码蛋白的理化性质和结构特征。结果表明,该序列全长为1718 bp,开放阅读框(ORF)长度为1530 bp,相对分子质量为55.89 kD,编码509个氨基酸,等电点为7.3,分子式为C2(513)H3974N696O705S21,不稳定指数为38.26,为稳定蛋白;脂肪族指数为96.42,总平均疏水性为-0.004,为亲水性蛋白;具有多个磷酸化位点,有信号肽,存在一个跨膜区,亚细胞定位于内质网膜,二级结构以α-螺旋为主。系统进化分析和多重序列比对表明该序列与藤茶的亲缘关系最近。密码子偏性分析表明该基因以G/C结尾的密码子使用频率较高,最适合该基因的异源表达宿主是大肠杆菌。本研究结果为进一步研究大叶蛇葡萄F3’H蛋白功能,以及揭示该植物中具生物活性的黄酮类成分的生物合成机制提供了一定的基础。; 李永华蒲天珍周佩娜方佳慧张秀桥龚玲; 关键词：基因克隆生物信息学分析

不同产地及不同药用部位大叶蛇葡萄中蛇葡萄素和杨梅苷的含量测定被引量：3: 2014年; 目的:建立RP-HPLC同时测定不同产地、不同药用部位大叶蛇葡萄中蛇葡萄素和杨梅苷含量的方法。方法:大叶蛇葡萄样品先用石油醚超声脱脂,再用甲醇超声提取;分析柱选用Angilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液进行洗脱(20∶80,v/v),柱温25℃,流速1.0 mL·min-1,检测波长254nm。结果:蛇葡萄素在16.6~415.0μg·mL-1与峰面积呈现良好的线性关系(r=0.999 8),平均回收率为98.25%,RSD=1.14%(n=6);杨梅苷在1.0~25.5μg·mL-1与峰面积呈现良好的线性关系(r=0.999 5),平均回收率为98.19%,RSD=1.16%(n=6)。结论:蛇葡萄素和杨梅苷成分因产地和药用部位不同,含量差异较大。该方法操作简便、可靠,可为大叶蛇葡萄的质量控制和开发利用提供实验依据。; 陈敏凃媛桂春程佩佩严瀛灏张秀桥; 关键词：大叶蛇葡萄蛇葡萄素杨梅苷

大叶蛇葡萄总黄酮提取物的HPLC指纹图谱研究: 2013年; 目的建立大叶蛇葡萄总黄酮提取物的HPLC指纹图谱。方法用70%乙醇回流提取制备大叶蛇葡萄总黄酮提取物,采用RP-HPLC分析。色谱柱为Angilent TC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸水梯度洗脱,检测波长265 nm,柱温为30℃,进样量为20μl。结果测定了11批大叶蛇葡萄总黄酮提取物的指纹图谱,标定了10个共有指纹峰,方法学考察结果符合指纹图谱技术要求。结论建立的大叶蛇葡萄总黄酮提取物的HPLC指纹图谱,为大叶蛇葡萄总黄酮提取物的质量控制提供了依据。; 江灿陈朋朱志凯陈敏张秀桥刘焱文; 关键词：大叶蛇葡萄总黄酮高效液相色谱指纹图谱

高效液相色谱法测定大叶蛇葡萄胶囊中蛇葡萄素和杨梅素的含量: 2013年; 目的建立大叶蛇葡萄胶囊中蛇葡萄素、杨梅素含量测定的方法。方法采用高效液相色谱法,Agilent C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸水溶液(15∶85);检测波长:275nm;流速:1.0mL/min。结果蛇葡萄素、杨梅素在0.241-3.84μg范围内均与峰面积呈良好的线性关系(r蛇=0.9994,r杨=0.9997),蛇葡萄素平均加样回收率为98.71%,RSD=2.93%;杨梅素平均加样回收率为98.45%,RSD=2.33%。结论该方法准确、可靠,可以用于大叶蛇葡萄胶囊中蛇葡萄素和杨梅素的含量测定。; 桂春朱志凯江灿陈敏涂媛张秀桥; 关键词：蛇葡萄素杨梅素高效液相色谱法

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国家自然科学基金(31170335)

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