国家自然科学基金(81371254)
- 作品数：24 被引量：52H指数：5
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- 自制带双侧给药管的多通道在体记录电极对前扣带皮层神经元放电活动的观察被引量：2
- 2016年
- 目的:利用在体多通道电生理学记录技术研究前扣带皮层吻侧部(rostral anterior cingulate cortex,rACC)神经元参与情绪情感活动时的放电特征时,除在rACC脑区埋置多通道电极外,还需同时埋置给药管以观察药物对rACC神经元放电特征的影响。本文将介绍带给药管的多通道在体记录电极的制作及埋置方法。方法:自制带双侧给药管的多通道在体记录电极,所采用给药管材质有三种,分别为金属、表面无涂层的石英玻璃纤维(玻璃裸管)和表面有聚酰胺胶涂层且具一定柔韧性的石英玻璃纤维(玻璃涂层管),然后埋植电极并记录神经电信号,最后插管位置组织定位。结果:盐水被注射到目标脑区,即rACC脑区;电极丝也定位于双侧前扣带皮层吻侧部;用带金属给药管的多通道电极,记录到的神经元放电背景噪音较大(信噪比<3)。用带玻璃裸管的电极可清晰记录到目标神经元的放电活动(信噪比>3),信噪比与金属管组比较[(5.37±1.35)vs(2.35±0.64)],差异有统计学意义(P<0.05),但该玻璃管质硬易碎,不易插入堵丝,也不易在慢性实验中脑部长时间保存。用带玻璃涂层管的电极也可清晰记录到神经元的放电活动(信噪比>3),信噪比与金属管组比较[(5.20±1.21)vs(2.35±0.64)],差异有统计学意义(P<0.05),且易于插入堵丝,便于在动物脑中长时间保留。结论:自制带涂层石英毛细玻璃管的电极成功实现了对某一脑区或核团同步埋植给药管和电极,使得药物干预并记录清醒活动大鼠脑电活动的实验便于进行。
- 秦霞王锐陈晋源王媛彭源舒赵欣秦国华马洋陈建鸣张策张宇
- 关键词：神经元放电
- 电针刺激环跳穴缓解大鼠炎症性疼痛的方法被引量：5
- 2015年
- 目的:介绍电针(electroacupuncture,EA)刺激环跳穴缓解炎性疼痛的实验方法,为探索电针镇痛机制及临床治疗疼痛提供科学依据。方法:(1)雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠左侧足底皮下注射完全弗氏佐剂(Complete Freund’s adjuvant,CFA),建立炎性疼痛模型。(2)介绍电针刺激环跳穴(GB30)的方法。结果:SD大鼠足底皮下注射CFA后脚掌回缩潜伏期明显缩短,电针刺激环跳穴后脚掌回缩潜伏期明显恢复。结论:电针刺激环跳穴可以有效缓解CFA诱导的炎性痛反应。
- 侯苗苗杨洋李振华王媛秦霞王锐张策张宇
- 关键词：电针环跳穴炎性疼痛完全弗氏佐剂
- 不同浓度的完全弗氏佐剂影响大鼠疼痛行为的观察被引量：1
- 2018年
- 目的:观察脚掌注射不同浓度完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)产生的不同强度的伤害刺激对大鼠痛感受和痛情绪反应程度的影响。方法:福尔马林诱导的条件性位置回避(conditioned place avoidance,CPA)的行为测试近来被用于评估痛情绪反应。本实验采用另一种炎性致痛物质CFA在大鼠的脚掌皮下注射使之产生持续性炎性痛,诱导大鼠产生条件性位置回避(conditioned place avoidance,C-CPA)反应。根据在大鼠的脚掌皮下注射不同浓度的CFA将大鼠分为正常(Naive)组,生理盐水(NS)组,1/5 CFA组,1/3 CFA组,1/2 CFA组,之后分别检测各组大鼠的热缩足潜伏期(paw withdrawal latency,PWL)和C-CPA反应。结果:1/3 CFA组和1/2 CFA组匹配后热缩足潜伏期与匹配前比较,均明显减小,即痛阈下降,且两组匹配前与匹配后的差值与生理盐水组相比,差异均有统计学意义(P<0.05);1/3 CFA组的下降值小于1/2 CFA组(P<0.05);1/2 CFA组在匹配后痛侧停留的时间明显缩短,且回避分数与生理盐水组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CFA所诱导的PWL反应和CPA反应的程度与CFA的注射浓度有关,从行为上证实大鼠痛情绪与痛感受的产生存在不同的机制。
- 贾欣代洁琼乔巧玉赵欣王志华关晓雅杜振莹张宇
- 关键词：完全弗氏佐剂
- 大鼠前扣带回皮层吻侧部精确取样的方法
- 2016年
- 目的:自制大鼠脑组织取样模具,精确切取双侧大鼠前扣带皮层吻侧部。方法:(1)自制动物脑组织精确取样模具;(2)在低温下将大鼠脑组织冠状切为脑组织片;(3)按照自制取材模具上的定位标识将已切好的大鼠脑片摆放好,逐步对组织段切割,最终可得到样本量较精确的大鼠前扣带皮层吻侧部样品。之后即可进行该脑区的蛋白、核酸等其他方面的研究。结果:实验中切取不同个体大鼠脑组织的部位和体积基本一致,不同动物个体取样差异小,实验结果可比性更强,且切取的组织大小不因操作者不同而异。结论:自制大鼠前扣带皮层吻侧部精确取样模具的使用简便易行,取样部位、大小一致性好,方法经济可靠,使后续实验结果更准确;该方法可推广应用于大鼠其他脑区的取样或其他小动物脑组织的取样。
- 王媛秦霞陈建鸣王锐赵欣彭源舒马洋秦国华陈晋源李建国张策张宇
- 关键词：脑组织
- 利用膜片钳技术标记脑片神经元的方法被引量：2
- 2021年
- 目的:介绍一种利用膜片钳技术标记脑片神经元形态的方法。方法:利用振动切片机切好实验目标部位的脑片,用含有Neurobiotin TM Tracer的电极内液灌注玻璃微电极,并进行全细胞膜片钳记录;实验结束后将脑片先用4%多聚甲醛固定、漂洗,再用含有Streptavidin-Texas Red和Triton X-100的PB染色,2 h后即可用荧光显微镜观察着色的神经元。结果:将细胞膜电压钳制在-70 mV,阶跃刺激后神经元表现为逐渐增大的膜电流。电流钳模式记录时,阶跃刺激使神经元去极化,达到阈电位后爆发动作电位。荧光显微镜下可看到胞体和主要突起清晰完整的神经元形态。结论:本方法适用于在膜片钳实验后观察所记录的神经元的形态特征,操作方便,图像直观清晰。
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- 关键词：全细胞膜片钳脑片神经元形态荧光标记
- 微丝电极阵列的参考电极内置与外置的对比研究
- 2022年
- 目的:通过对比内置和外置参考电极的微丝电极阵列在记录大鼠脑神经元放电过程中的优缺点,优化微丝电极阵列的制作与埋置,为多通道电生理实时记录系统提供更加实惠、优异的媒介工具。方法:采用镍铬合金丝、电路板、电极引脚和地线(银线)制作16通道的微丝电极阵列,通过内置(参考电极与电极阵列并列排布)或外置(参考电极与地线分别焊接在电极一侧的两端)微丝电极阵列的参考电极,观察对比两种电极在记录大鼠ACC脑区神经元放电中的区别。实验大鼠分为内置组(8只)和外置组(9只),检测指标有信噪比(n=8)、放电幅度(n=380)和放电频率(n=54)。结果:内置与外置参考电极的微丝电极阵列均可顺利记录出大鼠ACC脑区神经元的电信号;与外置组相比,内置组的神经元电信号具有信噪比高(P<0.05)、背景信号幅度小、受噪音干扰小,和放电幅度大(P<0.05)的优点;锋电位放电频率没有显著差异(P>0.05)。结论:在记录大鼠ACC脑区神经元电活动时,内置参考电极的微丝电极阵列记录到更高信噪比、更大放电幅度的电信号,为多通道电生理技术提供更加可靠的工具。
- 张利娜杜相欣张雨彤郭霞郝娜赵欣张宇
- 关键词：参考电极信噪比脑机接口
- 老年大鼠脊髓小胶质细胞分选新方法及功能特征观察
- 2022年
- 目的:建立分离纯化老年大鼠小胶质细胞的改良方法,并初步观察老年大鼠脊髓小胶质细胞的生物学特性。方法:以年轻SD大鼠(2月龄)为对照组,采用胰酶、胰酶替代物和机械网搓法等不同的制备方法,制备大鼠小胶质细胞的单细胞悬液,通过检测细胞纯度、存活率,观察细胞形态特征,分析细胞的炎性功能特征等,确定老年大鼠(20月龄)小胶质细胞的分离纯化方法,观察老年大鼠脊髓小胶质细胞功能特征。结果:胰酶消化所得细胞的存活率低(年轻大鼠83%,老年大鼠60%);机械网搓法虽得到的存活率较高(95%),但是细胞获取率最低(年轻大鼠((0.207±0.020)×10^(6),老年大鼠(0.243±0.023)×10^(6));采用胰酶替代物解离、密度梯度离心方法分选出的老年大鼠脊髓小胶质细胞数量多、活性好、存活率高,细胞纯度可达85%以上,我们采用此方法分选纯化不同年龄大鼠脊髓小胶质细胞,与年轻大鼠相比,老年鼠脊髓组织量大,所需消化液多,但消化时间缩短;与年轻大鼠小胶质细胞相比,老年大鼠脊髓小胶质细胞其胞体较大较圆,突起少且粗短,形态上偏向于激活状态,老年大鼠小胶质细胞促炎因子IL-1β表达降低(P<0.05),而抗炎因子IL-10(P<0.01)表达升高。结论:成功建立胰酶替代物解离结合密度梯度离心法从大鼠脊髓组织中分离纯化小胶质细胞,老年大鼠脊髓内小胶质细胞整体表现出抗炎表型。
- 张雨彤赵欣尹艺儒吴淑芬张利娜杜相欣张宇
- 关键词：老年大鼠脊髓小胶质细胞分离纯化炎性因子
- μ-阿片受体激动剂DAMGO抑制大鼠前扣带皮层NMDA电流的膜片钳实验观察
- 目的:疼痛作为当今社会临床上的一大重要难题,越来越受到了人们的重视。根据国际疼痛研究会(IASP)对疼痛最新定义,疼痛可以分为痛的感觉分辨、痛的情绪反应、痛的认知过程以及社会维度这四大方面。前扣带皮层(anterior ...
- 黄燕云
- 关键词：Μ-阿片受体
- 文献传递
- CFA诱导的大鼠条件位置逃避模型的观察被引量：2
- 2017年
- 目的:大鼠后脚掌注射完全弗氏佐剂(complete freund’s adjuvant,CFA)可诱导产生条件位置回避(conditioned place avoidance,C-CPA)反应,大鼠经过"非痛环境"/"痛环境"适应后,检测形成的C-CPA行为反应可持续多长时间。方法:(1)根据后脚掌注射CFA后观察痛行为的时间,将大鼠随机分为Day3组、Day5组、Day7组、Day10组、Day14组共五个实验组;(2)建立CFA诱导的CPA模型;(3)检测各组大鼠CPA反应;(4)Western-blot检测r ACC脑区痛情绪相关NMDA受体亚基NR1及磷酸化(p-NR1)的表达水平。结果:大鼠后脚掌注射CFA后五组大鼠热痛行为反应随时间无明显变化;CPA反应在Day3组、Day5组、Day7组、Day10组大鼠与注射CFA前相比产生了明显的CPA反应,而Day14组的CPA反应明显减弱;同步Western-blot检测的p-NR1表达也呈现了与行为反应一致的变化趋势。结论:CFA一次注射与环境条件化适应建立的C-CPA模型建成后可维持至少10 d的时间,之后CPA反应逐渐消失,且NMDA受体NR1亚基磷酸化水平与CPA反应的形成有关。
- 马洋秦国华王锐赵欣王志华代洁琼贾欣陈建鸣李建国张策张宇
- 关键词：完全弗氏佐剂环境适应
- P物质对星形胶质细胞胞内钙离子浓度和白细胞介素10释放的作用观察被引量：4
- 2015年
- 目的探讨P物质对星形胶质细胞的直接作用。方法利用原代培养的星形胶质细胞,P物质孵育后,采用免疫细胞化学的方法观察细胞形态的变化,采用细胞内钙离子成像方法记录P物质作用前后胞内钙荧光强度的变化。采用酶联免疫吸附试验检测细胞释放白细胞介素(IL)-10的情况。结果 P物质孵育后,星形胶质细胞表现出激活态的形态学改变,P物质孵育后引起星形胶质细胞内Ca2+浓度增加,星形胶质细胞释放抗炎因子IL-10减少。结论脊髓水平传递痛信号的神经递质P物质可刺激活化脊髓星形胶质细胞,活化的星形胶质细胞通过抑制抗炎因子IL-10的释放,最终导致慢性疼痛的发生。
- 米鹏霞尹艺儒张宇赵欣张策
- 关键词：P物质白细胞介素-10星形胶质细胞CA^2+
