国家重点实验室开放基金(SKLVBF2008)
- 作品数：3 被引量：18H指数：1
- 相关作者：斯日古楞周建华罗军荣马学恩刘霄卉更多>>
- 相关机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所内蒙古农业大学江西农业大学更多>>
- 发文基金：国家重点实验室开放基金国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 表达绵羊肺腺瘤病毒跨膜蛋白HepG2细胞系的建立
- 2011年
- 为深入研究绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)与绵羊肺腺瘤病(OPA)发病关系,本研究采用PCR方法从pGEX-4T-1-TM重组质粒中扩增编码JSRV跨膜蛋白(TM)的基因序列,并引入标签多肽HA序列和限制性内切酶位点,将其重组至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建了重组质粒pcDNA-TM-HA。通过转染HepG2细胞并用G418筛选,对稳定表达TM的阳性细胞进行纯化,获得了稳定表达JSRV tm基因的HepG2细胞系。间接免疫荧光及western blot检测结果表明,重组蛋白TM-HA在HepG2细胞中得到正确表达。JSRV TM蛋白稳定表达细胞系的建立为进一步研究该蛋白与JSRV诱导OPA发病关系提供了重要的实验平台。
- 刘霄卉罗军荣斯日古楞周建华马学恩
- 关键词：跨膜蛋白真核表达HEPG2细胞系
- 禽致病性大肠杆菌生物被膜的形成及其影响因素被引量：17
- 2010年
- 为确定影响细菌生物被膜(BF)的形成条件,本研究采用BF体外定性观察和定量粘附性检测两种方法对1株野生禽致病性大肠杆菌(E.coli)在不同环境(培养时间、培养基类型、引导载体类型、营养条件)下产生BF的差异进行了研究。结果显示野生禽致病性E.coli其宿主体外BF最适形成条件是培养时间为48h,培养基为5%TSB、引导载体为平底96孔聚苯乙烯微孔板(美国Corning Costar)。其生长周期为8h时开始起始粘附、24h形成若干微菌落、36h微菌落粘连、48h形成完整的BF、72h细菌脱落开始下一轮的BF生长。糖分和适量的无机盐都可以在一定程度上促进BF的形成和被膜内细菌的粘附性提高。该研究表明禽致病性E.coliBF的形成周期,并为抑制其形成提供了实验依据。
- 欧阳凤菊李兆利赫明雷刘慧芳司微刘思国王春来倪洪波王宇曲娟娟
- 关键词：禽致病性大肠杆菌生物被膜
- 稳定表达绵羊肺腺瘤病毒表面蛋白A549细胞系的建立被引量：1
- 2011年
- 为研究绵羊肺腺瘤病病毒(JSRV)表面蛋白(SU)的致瘤机制,本研究构建稳定表达SU的羊肺细胞A549细胞系。采用PCR方法从含su基因的pGEX-4T-1-SU重组质粒中扩增SU编码序列,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,转染A549细胞。通过G418筛选,对转染阳性细胞进行纯化,获得稳定表达JSRVSU蛋白的A549细胞系。以间接免疫荧光及westernblot鉴定SU的表达状况,并运用共聚焦显微镜确认SU蛋白的亚细胞定位。结果表明,重组蛋白SU在A549细胞中有效表达,而且主要分布于细胞质中。该细胞系的建立为SU生物学功能的体外研究提供了平台。
- 刘霄卉罗军荣斯日古楞周建华马学恩
- 关键词：绵羊肺腺瘤病毒表面蛋白真核表达细胞内定位
- 禽致病性大肠杆菌生物被膜的形成及其影响因素
- 摘要为了确定影响细菌生物被膜(BF)的形成条件,本研究采用BF体外定性观察和定量粘附性检测两种方法 ,对一株野生禽致病性大肠杆菌(E.coli)在不同条件(培养时间、培养基类型、引导载体类型、营养条件)下产生BF的差异进...
- 欧阳凤菊刘慧芳司微王春来赫明雷倪洪波刘思国
- 关键词：禽致病性大肠杆菌生物被膜
- 文献传递
