北京市自然科学基金(7122108)
- 作品数：6 被引量：13H指数：2
- 相关作者：沈弢梁华鲁凤民段昭君许强更多>>
- 相关机构：北京大学中国疾病预防控制中心乌鲁木齐市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠嗜碱性细胞肝内高表达并辅助初始CD4＋T细胞向Th2应答偏极化被引量：1
- 2012年
- 目的比较嗜碱性细胞在小鼠多器官内分布水平，并分析肝脏嗜碱性细胞参与CD4^＋T细胞分化的免疫特征。方法分离小鼠外周血、肝脏、脾脏、肺和淋巴结中单个核白细胞群，比较研究FcsRI^＋CD49b^＋细胞在单个核白细胞中的比例水平。免疫磁珠分选肝脏嗜碱性细胞后体外多种不同细胞因子共培养24h，检测嗜碱性细胞的凋亡水平。IL-3通过渗透压微泵皮下稳定刺激小鼠1周后比较分析嗜碱性细胞在肝脏内白细胞中比例水平。最后检测嗜碱性细胞通过分泌细胞因子的方式影响初始CD4^＋T细胞向Th1／Th2分化状态的特征。结果生理状态下小鼠嗜碱性细胞在肝脏中单个核白细胞中的比例显著高于外周血、脾脏、肺和淋巴结。IL-3在体外体内试验均证明可抑制嗜碱性细胞的凋亡，延长细胞寿命。嗜碱性细胞可通过分泌细胞因子的方式诱导初始CD4^＋T细胞向Th2应答偏极化并抑制Th1免疫应答。结论嗜碱性细胞可增强Th2免疫应答和抑制Th1免疫应答，结合嗜碱性细胞在肝脏中高表达的事实，提示嗜碱性细胞可能参与肝脏特有的生理性免疫耐受状态的构成。
- 许强屠静沈弢
- 关键词：嗜碱性细胞肝脏凋亡
- 静脉吸毒HIV-1感染者Th17/Treg失衡与疾病进展及单核细胞活化水平的相关性研究被引量：5
- 2013年
- 目的了解静脉吸毒HIV-1感染者Th17和Treg细胞百分比及Th17/Treg比例平衡状态,分析其与疾病进展和单核细胞免疫活化的相关性,探讨Th17/Treg比例失衡在HIV致病机制中的作用。方法选取经静脉吸毒感染HIV-1的患者58例,采集静脉血,分离外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞术检测Th17和Treg百分比及Th17/Treg比例。ELISA方法检测血浆中sCD14水平。结果 HIV-1感染者Th17细胞百分比和Th17/Treg比值明显低于健康对照组,差异均有统计学意义(P均<0.01),Th17百分比和Th17/Treg比值与CD4数量呈正相关(P<0.01,r=0.46;P<0.01,r=0.47),与病毒载量呈负相关(P<0.01,r=-0.65;P<0.01,r=-0.69)。HIV-1感染者血浆sCD14水平显著高于健康对照组组(P<0.01),且Th17百分比和Th17/Treg比值与血浆sCD14水平呈负相关(P<0.01,r=-0.54;P<0.01,r=-0.49)。结论 HIV-1感染吸毒人群中Th17和Treg百分比和Th17/Treg比值均明显失衡,且与病毒载量和单核细胞活化标志sCD14均呈负相关,提示Th17/Treg失衡与HIV感染所致病毒复制和免疫活化密切相关。
- 张曼芮宝玲沈弢梁华
- 关键词：TREG细胞吸毒人群
- 基于流式细胞术评价单核细胞介导的抗体依赖性细胞介导的细胞毒效应的方法学建立和应用被引量：2
- 2015年
- 目的：建立基于流式细胞术的评价单核细胞介导的抗体依赖性细胞介导的细胞毒效应的检测方法。方法 PKH26和CFSE染色的P815细胞为靶细胞，与P815特异性抗体孵育形成抗原抗体复合物，加入外周血单个核细胞作为效应细胞，共同孵育后流式细胞术检测 CD3－CD14＋PKH26＋CFSE－细胞群的百分比，并确定最佳效靶比及效应细胞和靶细胞的孵育时间。运用上述方法对23例HCV慢性感染者和22例健康人的单核细胞介导的抗体依赖性细胞毒作用（ antibody depend-ent cellular cytotoxicity ， ADCC）进行比较分析。结果可通过流式细胞技术检测CD3－CD14＋PKH26＋CFSE－细胞群来评价单核细胞介导的ADCC效应，最佳效靶比为10∶1，最佳杀伤孵育时间为4 h。慢性HCV感染者单核细胞介导的ADCC效应较健康对照明显降低（ P＝0．009）。结论本研究建立了基于流式细胞术的单核细胞介导的ADCC效应的检测方法，为病毒感染及药物研发中免疫学评价提供快速、敏感、安全的检测手段。
- 梁华黄向博沈弢邵一鸣
- 关键词：单核细胞流式细胞术
- 早期 HIV-1感染者单核细胞对 TLR 配体反应性研究被引量：3
- 2014年
- 目的：探讨HIV-1早期感染者体内单核细胞的成熟状态和对TLR配体的反应特点，了解HIV-1感染早期单核细胞功能状态和与疾病进展状态的相关性。方法选取35例HIV-1早期感染者和13例HIV阴性的健康人，采血分离外周血单个核细胞（ PBMC ）后纯化出单核细胞，流式细胞术检测单核细胞表面活化／抑制分子表达。用脂多糖（ LPS）和Pam3CSK4分别刺激单核细胞，培养20 h后，流式细胞术检测单核细胞表面活化／抑制分子表达，ELISA方法检测培养上清中促炎细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6的分泌水平。结果 HIV-1早期感染者，单核细胞表面活化分子CD80、CD86、CD40和抑制分子PD-L1表达均升高（除CD86 P＝0．01外，P均＜0．001），CD40表达水平与血浆病毒载量正相关（P＜0．001，r＝0．553）。单核细胞受LPS和Pam3CSK4刺激后，活化成熟能力降低，HLA-DR、CD80、CD86、PD-L1表达增加均较健康对照低（P＜0．001），而促炎细胞因子 TNF-α（LPS：P＝0．004，Pam3CSK4：P＝0．012）和IL-6分泌（LPS：P＝0．006）增加。结论在HIV-1感染早期，单核细胞即处于免疫活化状态，受TLR配体刺激后促炎细胞因子分泌增加可能与HIV-1感染后的微生物移位和免疫活化相关。
- 梁华赵阳阳李丹邵一鸣
- 关键词：人类免疫缺陷病毒单核细胞
- 慢性乙型肝炎患者外周血CD8^+T细胞亚群分布和PD-1表达特征研究被引量：1
- 2014年
- 目的分析慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血中CD8+T细胞及其亚群表面程序性死亡受体-1(PD-1)表达的变化特征及其临床关联性。方法用流式细胞术检测14例CHB患者和15例健康对照者外周血中CD8+T细胞及其亚群初始T细胞(TN)、中央记忆T细胞(TCM)、效应记忆T细胞(TEM)、终末效应记忆T细胞(TEMRA)的频数及细胞表面PD-1的表达水平,同时收集患者一般资料、生化指标和乙型肝炎病毒(HBV)病毒学指标等临床资料。使用SAS 9.1统计软件分析数据,应用Mann-Whitney U test分析组间差异,应用Spearman秩相关进行相关性分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果与健康对照组相比,CHB患者的TEMRA亚群在CD8+T细胞中的频数显著降低(P=0.012),总CD8+T细胞(P=0.018)及其TEM亚群(P=0.004)表面PD-1的表达水平显著上升。相关性研究显示,CD8+TEM细胞表面PD-1的表达水平与HBV DNA载量呈显著正相关(r=0.554,P=0.040)。结论 CHB患者外周血中PD-1阳性的CD8+TEM频数升高,且与外周血中HBV DNA载量呈正相关,提示慢性乙型肝炎患者机体内HBV复制的活跃性可能与外周血中CD8+T细胞的活化状态,特别是其TEM亚群上PD-1的高表达关联。
- 高见王喜红沈弢段昭君黄向博鲁凤民
- 关键词：初始T细胞PD-1
- 慢性HCV感染者外周血中CD56＋T细胞频数、表型和体外细胞毒功能研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨慢性HCV感染者外周血中CD56＋T细胞的频数、表型和体外细胞毒功能特征。方法采用流式细胞术检测33例慢性HCV感染者及21例健康对照者外周血CD56＋T细胞的频数和细胞表面活化性受体NKG2C、CD＋6、NKp46和抑制性受体CD＋58a、NKG2A的表达水平；检测体外未刺激及K562细胞刺激作用下CD56＋T细胞毒效应（CD＋07a）和细胞因子分泌水平（IFN-γ和TNF-α），并分析上述3种CD56＋T细胞功能指标之间的关联性。结果与健康对照相比，慢性HCV感染者外周血中CD56＋T细胞在淋巴细胞中的比例明显降低（P=0．018）。CD56＋T细胞表面的活化性受体NKG2C（P=0．015）、CD＋6（P=0．036）、NKpM6（P=0．001）均有不同程度降低，而抑制性受体CD＋58a、NKG2A未发现有统计学意义的差异（P〉0．05）。体外未刺激情况下，慢性HCV感染者CD56＋T细胞分泌细胞因子IFN-γ和TNF-α均显著弱于健康对照组（P〈0．0001）；在K562细胞刺激作用下，慢性HCV感染者CD56＋T细胞CD＋07a水平及分泌细胞因子IFN-γ和TNF-α均呈显著降低趋势（P〈0．0001），且3种功能指标表达水平密切关联（r〉0．80，P〈0．0001）。结论慢性HCV感染者CD56＋T细胞频数降低，细胞毒能力和重要细胞因子分泌能力均明显减弱。该结果提示显著受损的CD56＋T细胞功能可能与HCV慢性持续性感染有关。
- 段昭君支玉红龙璐刘媛许强沈弢鲁凤民
- 关键词：T细胞细胞毒效应
