陕西省自然科学基金(2010K15-03-06) 作品数:3 被引量:5 H指数:2 相关作者: 贾战生 张素梅 谢玉梅 张颖 康文臻 更多>> 相关机构: 第四军医大学唐都医院 宝鸡市人民医院 更多>> 发文基金: 陕西省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
基质金属蛋白酶-9与肝纤维化关系的研究进展 被引量:3 2012年 肝纤维化是由于基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)及其组织抑制因子(tissue inhibitor of metalloproteinasas,TIMPs)比例失调,造成细胞外基质大量沉积在细胞间质中,引起的病理改变。目前研究发现MMP-9在肝纤维化形成过程中有诱发和促进作用,但也有一些相反的意见,认为其具有逆转肝纤维化的作用,与肝纤维化呈负相关。因此,本文就近年来对MMP-9功能的研究作一概述。 张素梅 谢玉梅 张颖 贾战生关键词:基质金属蛋白酶-9 肝纤维化 携TIMP-1基因RNAi慢病毒载体感染大鼠HSC-T6细胞抑制目的基因表达 2013年 目的验证构建成功的携基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)基因特异性小干扰RNA的慢病毒载体对目的基因表达的抑制效应。方法以慢病毒质粒感染HSC-T6细胞,在感染6天和8天后,观察慢病毒感染效率;采用定量PCR法检测TIMP-1 mRNA水平变化;采用免疫印迹法检测TIMP-1蛋白表达变化。结果在慢病毒载体感染6天时,TIMP-1 mRNA水平较正常对照组下降约0.668倍[2-ΔΔCt为(0.668±0.046)],下降程度明显高于阴性对照组[2-ΔΔCt为(1.001±0.041),(P<0.05)];在慢病毒感染6天和8天时,RNAi组对TIMP-1蛋白表达具有明显的抑制作用,且以感染第6天为显著。结论构建成功的携TIMP-1基因特异性RNAi慢病毒载体能有效感染HSC-T6细胞,并抑制目的基因的表达。 张素梅 郝春秋 康文臻 彭梅娟 贾战生 谢玉梅关键词:HSC-T6细胞 基质金属蛋白酶组织抑制因子-1 慢病毒 基质金属蛋白酶抑制剂-1基因的RNA干扰载体构建及其抑制效应 被引量:2 2012年 目的构建含有基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)基因特异性RNA干扰序列的慢病毒vshRNA载体,筛选有效靶点序列。方法通过在线软件设计TIMP-1基因的RNA干扰(RNAi)序列,按siRNA设计的优化原则筛选靶序列,构建含有TIMP-1基因特异性慢病毒vshRNA载体。将重组pEGFP-N1-3FLAG-TIMP-1质粒和慢病毒质粒pGCSIL-GFP-shRNA共转染293T细胞,转染48 h后收集细胞,抽提总蛋白进行Western Blot检测,筛选抑制效应较好的质粒。结果依次通过在线软件设计序列、优化筛选、BLAST比对等方法,选择4条作为靶序列,又经Western Blot检测筛选出抑制效应较好的1条序列,其在TIMP-1基因的173~192 nt处。结论成功构建了具有抑制效应的TIMP-1基因特异性RNA干扰序列的慢病毒vshRNA载体,筛选出抑制TIMP-1表达的序列,为抗肝纤维化研究奠定了基础。 张素梅 谢玉梅 郝春秋 康文臻 张颖 姜娜 马力 彭梅娟 贾战生关键词:金属蛋白酶组织抑制剂 RNA干扰 肝硬化