重庆市卫生局医学科研项目(07-2-035)
- 作品数：2 被引量：14H指数：2
- 相关作者：陈建斌杨泽松卢前微葛群芳廖洋更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院重庆医科大学更多>>
- 发文基金：重庆市卫生局医学科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- P38MAPK信号转导通路在大蒜素诱导THP-1细胞凋亡中的作用被引量：11
- 2009年
- 目的:探讨大蒜素诱导THP-1细胞凋亡中P38MAPK及Fas基因表达的变化。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度大蒜素对THP-1细胞增殖抑制率;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术(FCM)检测凋亡率的变化;免疫细胞化学法观察大蒜素处理后细胞内磷酸化P38MAPK(P-p38MAPK)表达及分布变化;Western blot检测大蒜素处理前后细胞内P-p38MAPK和Fas蛋白表达量的变化。结果:MTT显示大蒜素能抑制THP-1细胞增殖,并呈时间-剂量依赖性。其72h中效浓度(IC50)为12.8 mg.L-1。Annexin V-FITC/PI检测凋亡率随大蒜素浓度增加而增加。免疫细胞化学法检测药物处理后P-p38MAPK表达增加,主要分布于细胞核与细胞浆,而阴性对照组仅弱表达。Western blot结果分析P-p38MAPK,Fas蛋白表达量随大蒜素浓度的增加而增加,呈剂量依赖性。其阴性组、72 h的1/2 IC50组、IC50组P-p38MAPK蛋白表达水平(相对灰度值)分别为0.2598±0.0132,0.3612±0.008 3,0.5056±0.0055;Fas蛋白表达水平分别为0.287 4±0.0089,0.426 8±0.0079和0.597 1±0.0109,差别均有显著性意义(P<0.01)。结论:大蒜素可诱导THP-1细胞凋亡,其诱导凋亡机制可能是通过激活P-p38MAPK/Fas途径实现。
- 廖洋陈建斌汤为学葛群芳卢前微杨泽松
- 关键词：大蒜素THP-1细胞细胞凋亡信号转导
- 大蒜素诱导THP-1细胞凋亡的作用及机制被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨大蒜素对急性单核细胞白血病细胞株THP-1凋亡及凋亡基因Fas/FasL表达的影响。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定大蒜素对THP-1细胞增殖抑制率;AO/EB染色观察细胞凋亡形态;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术(FCM)检测凋亡率的变化;FCM检测细胞凋亡率和细胞周期分布;免疫细胞化学法和Western blot观察细胞Fas、FasL蛋白表达。结果:MTT显示大蒜素能抑制THP-1细胞增殖,呈时间-剂量依赖性,72h中效浓度(IC50)为12.8mg/L。Annexin V-FITC/PI检测凋亡率随大蒜素浓度增加而增加。6.4、12.8mg/L大蒜素作用THP-1细胞72h后,FCM检测G0/G1期细胞比率明显上升,而S期比率明显下降,均出现凋亡峰,凋亡率分别为(22.93±2.93)%和(36.73±2.88)%,呈剂量依赖性,与对照组比较有显著差异(P<0.01)。在荧光显微镜下可区分早、晚期凋亡细胞、活细胞和坏死细胞。免疫组化显示大蒜素作用后Fas/FasL蛋白上调,主要分布在细胞浆和细胞膜。Western blot结果显示Fas/FasL蛋白表达量随大蒜素浓度的升高而增加,呈剂量依赖性。0、6.4、12.8mg/L大蒜素分别作用后Fas蛋白表达水平(相对灰度值)分别为0.2874±0.009,0.427±0.008和0.597±0.011;FasL蛋白表达水平分别为0.212±0.014,0.299±0.028和0.409±0.027;差别均有显著性意义(P<0.01)。结论:大蒜素可诱导THP-1细胞发生凋亡,诱导凋亡的机制可能部分与其上调Fas及FasL表达有关。
- 廖洋陈建斌卢前微葛群芳杨泽松
- 关键词：大蒜素THP-1细胞细胞周期FAS/FASL
