四川省卫生厅研究基金(080328)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 相关作者：崔凡王有为卢洁杨建文卢伟更多>>
- 相关机构：四川省人民医院四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：四川省卫生厅研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 伞枝犁头霉分泌的糖蛋白与人血管内皮细胞凋亡相关被引量：1
- 2011年
- 目的部分纯化伞枝犁头霉分泌的毒力因子，并研究其诱导人血管内皮细胞凋亡的机制。方法用ConALectin亲和层析法纯化伞枝犁头霉分泌的糖蛋白，并在流式细胞仪下检测不同蛋白成分对人血管内皮细胞凋亡的影响。用变性和非变性法去除伞枝犁头霉糖蛋白的糖基，并分别检测其蛋白和寡糖成分诱导凋亡的活性。Westernblot法分析伞枝犁头霉糖蛋白诱导人血管内皮细胞caspase激酶活化情况。用caspase抑制剂检测caspase一8和-9在凋亡反应中的作用。XTT法检测caspase抑制剂能否终止细胞存活率的抑制。结果流式细胞仪分析显示伞枝犁头霉分泌的总蛋白和糖蛋白能以剂量依赖的方式诱导人血管内皮细胞凋亡，而非糖蛋白则无此活性。纯化的去糖基化蛋白和寡糖成分都不能独立诱导人血管内皮细胞凋亡。在凋亡信号传导途径中，caspase-9、-3和细胞色素C显著活化，而caspase-8未见活化。Caspase-9抑制剂能够终止伞枝犁头霉糖蛋白诱导的凋亡反应，而caspase－8抑制剂则无此效应。Caspase-9和-3抑制剂终止了人血管内皮细胞活性下降。结论伞枝犁头霉分泌的糖蛋白具有诱导人血管内皮细胞凋亡的活性。糖蛋白结构的完整性对其诱导凋亡的活性是必需的。内源性凋亡信号传导途径介导了伞枝犁头霉糖蛋白诱导的凋亡反应。
- 崔凡王有为杨戈卢伟卢洁杨建文林昭春
- 关键词：毛霉目糖蛋白人脐静脉血管内皮细胞凋亡
- 马拉色菌属种内基因多态性机制的分析被引量：2
- 2012年
- 目的分析RAPD法对马拉色菌属分型的可靠性,并探讨马拉色菌属种内基因多态性的机制。方法分别用RAPD法和传统的生化法对74株马拉色菌临床株进行分型鉴定,比较两者结果的异同。扩增7株糠秕马拉色菌ITS1区,并进行SSCP分析。结果大部分马拉色菌的RAPD分型结果与生化结果是符合的,但也有9株马拉色菌被归入别的种。同时即便被归入同一类的菌株也存在多态性的RAPD带型。对糠秕马拉色菌的ITS1区进行SSCP分析可看到明显的单链构象差异,而且其差异程度在RAPD分型中得到了印证。结论由此推断种内基因多态性会干扰马拉色菌的分子分型,而ITS1的序列是种内基因多态性的敏感指标。
- 穰真崔凡王有为李薇
- 关键词：马拉色菌属基因分型基因多态性RAPDSSCP
- 阿奇霉素对铜绿假单胞菌生物被膜和毒力因子的干预作用被引量：7
- 2010年
- 目的 研究阿奇霉素对铜绿假单胞菌生物被膜形成及毒力因子分泌的干预作用.方法 2倍稀释法测定最低抑菌浓度（MIC） 结晶紫染色法测定早期黏附 建立PAO1体外生物被膜模型 扫描电镜观察生物被膜形态 连续稀释法进行活菌计数 弹性蛋白-刚果红法测定弹性蛋白酶活性 偶氮酪蛋白法测定蛋白水解酶活性 氯仿萃取法测定绿脓菌素 苔黑酚法测定鼠李糖脂.结果 PAO1阿奇霉素组对载体的黏附低于PAO1空白对照组（P＜0.05） 第3、7天PAO1阿奇霉素组生物被膜少于PAO1空白对照组,且载体活菌计数少于PAO1空白对照组（P＜0.05）.PAO1阿奇霉素组弹性蛋白酶活性、蛋白水解酶活性、绿脓菌素浓度、鼠李糖脂浓度均明显低于PAO1空白对照组（P＜0.01）,弹性蛋白酶活性及绿脓菌素浓度与PA-JP3株组相当（P＞0.05）,而蛋白水解酶活性及鼠李糖脂浓度高于PA-JP3株组（P＜0.05）.结论 阿奇霉素可以抑制铜绿假单胞菌的黏附及其生物被膜的形成,并可以抑制其毒力因子的释放.
- 崔凡王有为杨戈卢伟卢洁杨建文林昭春
- 关键词：铜绿假单胞菌阿奇霉素生物被膜毒力因子
