国家自然科学基金(30873015)
- 作品数：5 被引量：29H指数：2
- 相关作者：梁后杰彭秋平童晶涛何金霞江恒更多>>
- 相关机构：第三军医大学西南医院解放军第94医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 糖酵解代谢在恶性肿瘤细胞中的特异性表型及其意义被引量：24
- 2009年
- 活跃的糖酵解代谢是恶性肿瘤细胞显著的生化特征。即使在有氧条件下,恶性肿瘤细胞糖酵解代谢仍明显活跃,这一特殊生化表型,被称为Warburg效应。临床上已利用Warburg效应,通过正电子发射断层显像(PET)技术来诊断恶性肿瘤,而探索通过干预糖酵解代谢途径来治疗恶性肿瘤的策略正备受关注。本文就恶性肿瘤细胞糖酵解活跃的机制,War-burg效应在恶性肿瘤诊断及靶向性治疗中的作用作一综述。
- 彭秋平梁后杰
- 关键词：糖酵解恶性肿瘤
- RNA干扰PDK-1对5-FU诱导结肠癌细胞凋亡的促进作用被引量：4
- 2012年
- 目的探讨以丙酮酸脱氢酶激酶-1(pyruvate dehydrogenase kinase isozyme 1,PDK-1)为靶标的短发夹RNA(shRNA)与化疗药5-氟尿嘧啶(5-FU)联合应用对人结肠癌LS174T细胞的促凋亡作用。方法针对PDK-1序列设计3段干扰序列及1个阴性对照,分别构建pGenesil.1-PDK-1重组质粒表达载体及pGenesil.1-NC阴性对照载体,利用脂质体分别将质粒转染入LS174T,并用G418对细胞进行药物筛选,并通过Real-time PCR和Western blot检测有干扰序列的有效性。MTT实验检测5-FU对干扰组和对照组细胞生长、增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 Real-time PCR和Western blot证实3个干扰组均抑制PDK-1表达,其中最大敲减效率超过70%。MTT实验结果显示,经5-FU同样处理48 h后,PDK-1干扰的LS174T细胞生长抑制率较对照组显著增高(P<0.05);流式细胞仪结果显示,干扰组细胞凋亡率较对照组增高(P<0.05)。结论 PDK-1 shRNA能特异性下调LS174T细胞中PDK-1的表达,PDK-1干扰联合5-FU可促进结肠癌细胞化疗诱导凋亡。
- 谢贛丰梁后杰童晶涛何金霞
- 关键词：结肠肿瘤化学治疗
- AMPK的激活调节COX-2对HT-29细胞增殖和凋亡的影响
- 2009年
- 目的:研究AMPK的激活在结肠癌HT-29细胞中对COX-2表达的影响,并探讨其对细胞增殖和凋亡的作用。方法:用Western Blot方法检测AMPK的激活对COX-2表达的影响,MTT法检测不同浓度、时间的AMPK激活剂AICAR和选择性COX-2抑制剂塞来昔布作用下的细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,用MTT法检测二者联合对细胞增殖的影响。结果:AMPK被激活后COX-2蛋白表达减少,随着AICAR和塞来昔布作用浓度、时间增加,细胞存活率呈剂量和时间依赖性下降,塞来昔布组和AICAR组凋亡细胞增多,早期凋亡细胞及晚期凋亡细胞比例均高于对照组(P<0.05),AICAR和塞来昔布联用后细胞的存活率为(23.0±0.82)%,均低于AICAR组(54.0±2.86)%和塞来昔布组(57.0±2.54)%。结论:AMPK激活可以抑制COX-2表达对人结肠癌HT-29细胞产生增殖抑制和凋亡诱导效应,AICAR和塞来昔布二者联用具有协同作用。
- 陈琦邹岚梁后杰
- 关键词：AMPKAICARCOX-2塞来昔布
- 阻断己糖激酶-Ⅱ基因表达对结肠癌化疗的影响及其机制
- 2009年
- 目的:观察阻断己糖激酶-Ⅱ(HK-Ⅱ)基因表达对结肠癌LoVo细胞化疗敏感性的影响及其机制。方法:应用质粒介导的短发夹RNA(shRNA)真核表达法特异性阻断HK-Ⅱ基因表达。通过半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法分析RNA干扰效应。MTT法检测氟尿嘧啶(5-FU)和奥沙利铂(L-OHP)对LoVo细胞的半数抑制浓度(IC50);底物比色法测定半胱氨酸蛋白水解酶(caspase)-3活性;Western印迹法检测胸苷酸合成酶(TS)表达变化。结果:RNA干扰技术特异性下调结肠癌LoVo细胞HK-Ⅱ基因表达,mRNA和蛋白质水平的表达抑制率分别为72.1%和71.2%。阻断HK-Ⅱ基因表达后,结肠癌LoVo细胞5-FU和L-OHP的IC50值分别为(4.70±0.40)μg/ml和(6.27±0.59)μg/ml,均明显低于正常培养细胞的(11.93±0.15)μg/ml和(9.77±0.60)μg/ml(P<0.01);与正常培养细胞相比,RNA干扰的LoVo细胞caspase-3活性明显增高,TS蛋白表达下降。结论:阻断HK-Ⅱ基因表达可能通过活化caspase-3和降低TS表达的途径来增加结肠癌LoVo细胞化疗敏感性。
- 彭秋平潘凤边志衡李建军周进明周琪梁后杰
- 关键词：结直肠肿瘤己糖激酶糖酵解RNA干扰化学治疗
- 抑制PDK对人结肠癌细胞增殖和化疗敏感性影响及其机制的探讨被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨抑制丙酮酸脱氢酶激酶(PDK)对结肠癌细胞增殖和化疗敏感性的影响及可能机制。方法:应用MTT法观察PDK抑制剂(DCA)对人结肠癌细胞化疗增敏效应;应用Hoechst33258染色通过激光共聚焦显微镜观察DCA诱导的LoVo细胞凋亡;用流式细胞术观察DCA诱导的细胞凋亡、线粒体膜电位和Ca2+通道开放的情况。结果:抑制PDK(DCA)能明显影响结肠癌细胞增殖,其中90mmol/LDCA刺激SW620、LoVo、HT29、LS174T和293T细胞48h后,活性细胞率分别为(23.90±2.79)%、(5.90±1.31)%、(32.82±4.50)%、(29.72±3.03)%和(84.86±0.50)%。与小剂量DCA(2.5和5mmol/L)联合作用LoVo细胞48h,低剂量5-FU(5mmol/L)的活性细胞率由(66.03±3.95)%分别降至(50.78±2.05)%和(39.8±2.86)%;而低剂量奥沙利铂(0.5mmol/L)的活性细胞率由(71.18±0.62)%,分别降至(58.24±3.27)%和(53.17±2.65)%。30mmol/LDCA作用4种结肠癌细胞48h后,LS174T、SW620、HT29、LoVo和293T凋亡的发生率分别为(22.27±1.75)%、(14.42±2.36)%、(25.55±0.78)%、(13.20±1.58)%和(10.73±1.49)%。30mmol/LDCA作用LoVo细胞48h后,线粒体膜电位值由4.04±1.47下降为2.09±0.86;胞内Ca2+浓度下降了83.6%。结论:抑制PDK能抑制结肠癌细胞增殖活性,增加化疗敏感性。该作用可能是通过线粒体功能异常引起结肠癌细胞凋亡。
- 童晶涛谢赣丰欧娟娟萨日娜江恒梁后杰
- 关键词：细胞增殖
