福建省发展和改革委员会项目(2004)
- 作品数：3 被引量：20H指数：3
- 相关作者：黄建忠刘海英舒正玉王娟吴松刚更多>>
- 相关机构：福建师范大学福建省农业科学院更多>>
- 发文基金：福建省科技厅重大项目福建省发展和改革委员会项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 酿酒酵母adh2和ald6双基因缺失突变株的构建被引量：7
- 2009年
- 酿酒酵母乙醇合成代谢过程中,阻断或削弱乙醛至乙酸代谢流不但能增强乙醇合成流,同时还能降低发酵乙酸含量。本研究以乙醇脱氢酶Ⅱ(adh2)基因缺陷型酿酒酵母YS2-Δadh2为出发菌株,应用长侧翼同源两步PCR(LFH-PCR)策略构建乙醛脱氢酶Ⅵ(ald6)基因敲除组件,转化酿酒酵母YS2-Δadh2敲除ald6基因,之后转入表达质粒pSH65到阳性克隆中,半乳糖诱导表达Cre重组酶切除Kanr基因筛选标记,最后,传代丢失质粒pSH65获得单倍体ald6基因缺失突变株。利用同样的敲除组件和技术再次敲除其等位基因,最终获得双基因缺失突变株YS2-△adh2-Δald6。发酵实验表明与出发菌株YS2相比,突变株乙酸合成量降低18%,乙醇最高产量提高12.5%。
- 王艳尊雷娟娟江贤章高媛媛李欣蓝灿华陈由强陈如凯黄建忠
- 关键词：酿酒酵母基因敲除
- 长梗木霉内切葡聚糖酶I基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达被引量：9
- 2009年
- 一株纤维素酶高产菌株经ITS序列鉴定并命名为长梗木霉SSL(Trichoderma longi-brachiatum,SSL)。利用RT-PCR的方法从该菌株中克隆出内切-1-4-β-D-葡聚糖酶I的基因(eg1),该基因全长1386bp,编码461个氨基酸。序列分析表明:该基因序列与T.longibrachiatum egl1基因具有90%以上的同源性。将该基因的成熟肽编码序列插入到Pichia pastoris表达载体pPIC9k中,构建重组表达质粒pPIC9k-eg1,转化P.pastoris GS115。重组P.pastoris菌株,经甲醇诱导后,胞外重组内切葡聚糖酶I的活力达73U/mL。SDS-PAGE中出现一条明显加强的蛋白质条带,其分子量大约为58kD。
- 刘海英王娟舒正玉吴松刚黄建忠
- 关键词：分子标记毕赤酵母
- 泽泻种子发芽特性研究被引量：4
- 2005年
- 目的探讨建泽泻种子萌发的特性及发芽条件.方法将泽泻种子置于不同温度下浸种,不同温度、光照条件及不同发芽床上发芽,观察其萌发所需的时间、发芽率或成活率.结果在25 ℃～30 ℃温水中浸种24 h,温度30 ℃,培养皿内置双层纱布的条件适宜泽泻种子萌发,光照条件对泽泻种子萌发无明显影响.结论泽泻种子具有高温、高湿和非光敏特性,创造种子萌发的环境条件可控制和提高种子发芽率和出苗整齐度.
- 陈菁瑛刘波郑伟文张秋芳朱炳耀蔡宣梅杨志敏
- 关键词：萌发发芽率
