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非洲爪蟾卵非细胞体系中星体的组装及其在核膜重建中的作用被引量：2: 2003年; 报道了由微管组成的星体在爪蟾卵细胞提取物中的组装过程、动态变化及其在核膜装配过程中的作用.用精子染色质在爪蟾卵非细胞体系中诱导细胞核重建.在初期阶段,总是在精子染色质基部的中心体周围通过微管装配而形成星体.随着星体的形成,具有DNA复制功能的细胞核逐步装配.当完整的细胞核形成后,星体开始去组装直至消失.在实验体系中加入微管装配特异抑制剂秋水仙素,可以有效地抑制星体的组装,核膜的组装同时受到严重的影响.高浓度的秋水仙素还抑制核膜膜泡的融合.若加入微管稳定剂紫杉醇,微管可以装配,并在染色质周围形成大而稳定的星体.在此情况下,核膜的装配也受到严重影响.观察发现,在此被稳定的星体中,有转运受阻的膜泡存在.基于以上实验结果,认为由微管组成的星体在核膜重建中具有重要的作用,其机制可能是微管参与核膜前体物质向染色质表面的输运.; 杨宁陈忠才卢萍张传茂翟中和唐孝威; 关键词：爪蟾秋水仙素核重建

p53的过量表达能迅速诱导NIH3T3细胞衰老被引量：6: 2000年; 将温度敏感型p53(p53Val135)基因导入NIH3T3细胞进行过量表达, 发现在温度敏感型p53的活性温度(32℃)下培养, NIH3T3细胞迅速表现出与衰老相关的形态特征和生化特性. 这可能是p53过量表达激活了NIH3T3细胞内在的衰老机制从而诱导细胞进入衰老状态.; 胡建成雷颖洪夏卢智刚翟中和; 关键词：P53 NIH3T3 衰老细胞培养

肿瘤坏死因子信号传导的分子机理被引量：20: 2002年; 肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）是一种具有多种生物学效应的细胞因子,其生物学效应包括促进细胞生长、分化、凋亡及炎症诱发等.TNF的生物学效应都是通过细胞表面的两种TNF受体引发的.TNF的信号传导通路主要包括细胞凋亡及转录因子NF-κB和JNK蛋白激酶的激活.这3条信号传导通路之间及各通路内部含有各种调节机制,使TNF的各种生物学功能协调发挥出来.从1994年到现在,对肿瘤坏死因子信号传导通路的分子机理研究取得了一系列突破性进展,在细胞信号传导研究领域中树立了成功的典范.; 查纪坤舒红兵; 关键词：肿瘤坏死因子信号传导 NF-ΚB 细胞因子生物学效应分子机理

诸葛菜去膜精子在爪蟾卵提取物中实现非细胞体系核重建被引量：1: 2002年; 动物爪蟾（Xenopus　laevis）卵提取物诱导植物诸葛菜（Orychophragmus violaceus）去膜精子实现非细胞体系核重建.诸葛菜去膜精子在爪蟾卵提取物中温育30 min左右开始膨大,随着温育时间的延长,膨大的精子染色质逐渐去凝集.电子显微镜观察和荧光显微镜观察均表明重建核有核膜的装配,膜泡在去凝集的染色质周围逐渐融合形成双层核膜.用细胞分级抽提整装电子显微镜技术观察到重建核中有核纤层和核骨架结构的装配.; 卢萍任民翟中和; 关键词：核重建非细胞体系诸葛菜爪蟾

DR4死亡结构域结合蛋白的初步研究: 2002年; 目的克隆DR4死亡结构域的结合蛋白,为进一步研究DR4诱导细胞凋亡的信号传递途径提供条件。方法以TRAIL(TNF-relatedapoptosisinducingligand)死亡受体DR4的死亡结构域(DR4DD)为钓饵,采用酵母双杂交系统筛选人白细胞MATCHMAKERcDNA文库。以DNA自动分析仪测定核苷酸序列,采用计算机软件分析核苷酸的同源性及功能结构域。并用免疫共沉淀方法分析人类甲酰肽受体1(formylpeptidereceptor-like1,FPRL1)在哺乳动物细胞内是否与DR4CD(thecytoplsmicdomainofDR4)特异性地结合。结果获得了两个阳性克隆pADB1和pADB2。DNA序列分析及同源性比较表明,pADB1的插入片段与人FPRL1的mRNA序列具有97%的同源性。pADB2的插入片段与GeneBank中的已知序列无同源性。免疫共沉淀结果表明FPRL1在哺乳动物细胞内可与DR4CD特异性地结合。结论FPRL1可与DR4的死亡结构域特异性结合,推测FPRL1与DR4的结合可能在DR4介导的细胞凋亡信号传导途径中发挥一定的作用。; 李晓玲刘彦信刘士廉郑德先; 关键词：TRAIL 酵母双杂交系统

Primary observations of the existence of Fas-like cytoplasmic death factor in plant cells被引量：1: 2002年; The main activity of Fas is to trigger cytoplasm death program in animal cells. In G2 pea, vacuole plays a pivotal role in inducing cell death in the cytoplasm of long-day (LD) grown apical meristem cells. Expression patterns of the Fas in G2 pea cells revealed that the Fas is mainly localized in the vacuole of cells undergoing programmed cell death (PCD). The Fas expression is corresponding to the initiation of menadione-induced PCD in tobacco protoplasts. The results suggest the existence of the Fas-like mediated cytoplasmic death pathway in plant cells.; Dayong WangYunfei GaoKerning CuiZhonghe Zhai; 关键词：VACUOLE CYTOPLASM

细胞凋亡与NF-κB激活的信号传导研究被引量：12: 2006年; 细胞凋亡是细胞受基因调控的主动死亡方式,对于生物体的正常发育及生理功能的维持具有重要意义。NF-κB是一类在动物细胞中广泛表达的转录因子,其主要生理功能之一是通过诱导凋亡抑制基因的转录,拮抗细胞凋亡的发生。NF-κB的活化调控是细胞生死抉择过程的关键机制之一。现已证明细胞凋亡及NF-κB活化的异常会导致多种人类疾病。本项目从凋亡的执行机制和调控机制两方面入手,对细胞凋亡的机理进行了研究。建立了基于爪蟾卵细胞提取物的非细胞凋亡诱导体系,并利用这一体系,发现爪蟾细胞凋亡特异核酸酶XAD及其特异性的抑制因子IXAD;首次证明磷酸肌酸和核质素在凋亡过程中的作用。克隆了3个新的凋亡诱导基因。在细胞凋亡的调节机制方面,克隆了7个分别作用于NF-κB活化信号通路不同步骤的新的调节基因,发现5个已知蛋白调节不同NF-κB活化途径的新功能。此外,在国际上较早开展了植物细胞凋亡的研究,首次报道体外培养植物细胞凋亡过程中有细胞色素C的释放。; 陈丹英舒红兵翟中和; 关键词：细胞凋亡 NF-ΚB活化

NF-κB激活的调节机理被引量：34: 2003年; NF-κB是广泛存在于各种类型细胞中的一种转录因子.它调节大量与细胞应急反应,如免疫应答、炎症反应和细胞抗凋亡作用相关的基因的转录.NF-κB活化的失调与许多人类病症如类风湿性关节炎、癌症等直接相关,因此NF-κB激活的调节机制一直是细胞生物学及免疫学领域的研究热点.NF-κB通常与抑制因子IκBs相结合,以非活性形式存在于细胞质中,当细胞受到上游刺激因子,如肿瘤坏死因子、白介素-1、细菌脂多糖等的作用时,IκB在激酶复合物IKK的作用下被磷酸化,进而被泛素连接酶复合物E3RSIκB/β-TrCP识别并泛素化,然后被26S蛋白酶体识别并迅速降解.IκB的降解使NF-κB的核定位序列暴露出来,进入核内起始转录.IKK的活化是NF-κB激活信号通路中的关键步骤,同时NF-κB的磷酸化、NF-κB前体的降解等也在其中发挥重要作用.本文重点介绍NF-κB激活调节的经典途径及最新研究进展.; 陈丹英翟中和舒红兵; 关键词：NF-ΚB 细胞生物学转录因子基因免疫学

重组可溶性TRAIL诱导肿瘤细胞凋亡被引量：5: 2001年; 在大肠杆菌系统中表达并纯化了3种不同长度的可溶性TRAIL, 分别为sTRAIL(74～281), sTRAIL (95～281)及sTRAIL(101～281). 细胞凋亡实验表明氨基酸101位前的序列对TRAIL诱导肿瘤细胞凋亡的生物学功能具有抑制作用. sTRAIL(101～281)能在6 h内诱导不同类型的肿瘤细胞凋亡, 但对正常细胞无毒性. 不同类型的肿瘤细胞对TRAIL的敏感程度不同, 一些敏感肿瘤细胞系中部分细胞对TRAIL具有抗性. 根据实验结果提出抗性细胞中可能表达一种或多种半衰期短的、能抑制肿瘤细胞凋亡的蛋白的假说, 并为探索将TRAIL开发成肿瘤治疗药物的可能性奠定了基础.; 李联运胡建成宾亮华李丽霞查纪坤许亮国张震翟中和舒红兵; 关键词：TRAIL 细胞凋亡肿瘤治疗肿瘤细胞肿瘤坏死因子

小鼠牙本质涎磷蛋白(DSPP)基因敲除载体的构建: 2003年; 目的 :构建用于小鼠牙本质涎磷蛋白基因敲除的载体 ;方法 :PCR获得上、下游两条同源臂 ,将同源臂和正、负双向筛选标志按一定顺序克隆到载体 pBluescript中 ,序列测定确认正确后 ,NotI酶切使载体线性化 ;结果 :载体中各部分的排列顺序与预期一致 ;结论 :获得了小鼠牙本质涎磷蛋白基因敲除的载体 ,为以后的工作打下了基础。; 孙汉堂肖明振吴补领费俭; 关键词：小鼠牙本质涎磷蛋白基因敲除

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国家重点基础研究发展计划(G19990539)

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