国家教育部博士点基金(20070610146)
- 作品数：6 被引量：41H指数：3
- 相关作者：贾贵清张明鸣伍晓汀杨平陆燕蓉更多>>
- 相关机构：四川大学华西医院成都市新都区第二人民医院四川省医学科学院(四川省人民医院)更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠骨髓间质干细胞的BrdU体外标记和体内示踪研究被引量：2
- 2012年
- 目的探讨骨髓间质干细胞(BMSCs)的体外标记和体内示踪技术。方法分离培养并鉴定大鼠BMSCs,进行5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记后,体外培养被标记的BMSCs,观察其连续传代后的BrdU可标记时间和标记效率;建立大鼠胃黏膜损伤模型,将分离纯化的BrdU标记BMSCs移植到损伤的胃黏膜下,体内观察BrdU对活体移植BMSCs的示踪作用。结果免疫组化显示体外培养大鼠BMSCs的CD44、CD90表达阳性,CD14、CD45表达阴性,显微结构表现出干细胞特征。进行BrdU标记后,标记阳性率随标记时间延长而增高,48h达高峰,72h仍维持高阳性率。终浓度为10μmol/L的BrdU孵育48h、72h阳性标记率高于5μmol/L BrdU组(P<0.05),但与15μmol/L BrdU组阳性标记率差异无统计学意义(P>0.05),并且连续传代培养21d后也可检测到。BrdU可示踪BMSCs在损伤的胃黏膜下局部定植。结论 BrdU在浓度为10μmol/L、标记时间48h至72h标记效率较高;BrdU标记可用于一定时间段内BMSCs移植入体内后定植和生长的动态示踪观察方法。
- 张明鸣贾贵清程惊秋杨平陆燕蓉伍晓汀
- 关键词：5-溴脱氧尿嘧啶核苷骨髓间质干细胞
- 大鼠骨髓间充质干细胞体外两种分离方法和培养条件下生物学特点的比较被引量：17
- 2009年
- 目的:建立并探讨一种体外分离、培养和扩增骨髓间质干细胞的优化方法。方法:采用密度梯度离心法和全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓干细胞,应用倒置显微镜和免疫组化法观察和鉴定骨髓间质干细胞。结果:大鼠骨髓干细胞呈均一的梭形成纤维细胞样,形成集落样生长,显微结构表现出干细胞特征;免疫组化显示CD14、CD45阴性,CD44、CD90阳性。与密度梯度离心法比较,贴壁法获得的骨髓干细胞活性高,增殖力强,克隆形成早,传代时间短。结论:全骨髓贴壁法和密度梯度离心法均可获得高纯度贴壁生长的骨髓干细胞,其中全骨髓贴壁法方法简单易行,骨髓干细胞增殖快,活性好,传代力持久,是一种有实用价值的骨髓干细胞培养方法。
- 张明鸣贾贵清罗婷杨平伍晓汀
- 关键词：骨髓间质干细胞干细胞
- IL-1β和IL-1受体拮抗剂基因多态性与胃癌遗传易感性的相关性研究被引量：3
- 2010年
- 目的研究白细胞介素1β基因(IL-1β)及白细胞介素-1受体拮抗剂基因(IL-1RN)的基因多态性在胃癌患者及正常人群中的分布,分析其各基因型与胃癌易感性的相关性。方法采用病例对照研究方法,收集140例胃癌患者和165名性别、年龄频数匹配的正常健康人外周血或癌旁组织标本,提取DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测,比较各位点基因型。结果 IL-1β基因-31、-511和+3954位点各基因型在胃癌组和对照组中的分布均无显著性差异(P>0.05)。IL-1RN基因发现2R/2R、2R/4R、3R/4R和4R/4R四种基因型,其频率在胃癌患者中分别是0.7%、15.7%、2.9%和80.7%,而在对照组中分别是0、5.5%、0和94.5%,携带2R/4R基因型者发生胃癌的危险是4R/4R基因型的3.37倍,但差异未显示出统计学意义(P=0.557,χ2=2.076)。携带IL-1RN2R等位基因在胃癌患者中的出现频率是8.6%,高于正常人的频率2.7%,表明携带IL-1RN2R等位基因者患胃癌的风险增加3.4倍,但统计分析显示差异未达到统计学意义(P=0.781,χ2=0.494)。结论尚无直接证据证明IL-1β和IL-1RN各基因多态性与胃癌易感性有关,但携带IL-1RN2R等位基因可能提高胃癌患病风险,其潜在作用尚需大样本研究的进一步探讨。
- 李卡杨婕陈增蓉
- 关键词：胃癌基因多态性白细胞介素-1Β
- BMSCs对消化道损伤的修复作用被引量：2
- 2009年
- 目的探讨BMSCs对消化道损伤的修复作用及其机制。方法查阅近年来关于BMSCs对消化道损伤修复作用的文献,并进行回顾和综合分析。结果BMSCs具有自我复制、增殖和多向分化潜能,在消化道损伤修复中作用重大。其可能作用机制为BMSCs能迁移至消化道损伤组织,抑制宿主免疫应答;去分化和再分化;直接分化为消化道上皮干细胞或消化道上皮细胞;与消化道上皮干细胞或成熟上皮细胞融合;参与损伤后微环境的重建。结论BMSCs参与消化道损伤修复,在消化系统疾病的治疗中具有广阔的应用前景。
- 贾贵清张明鸣伍晓汀
- 关键词：BMSCS消化道损伤
- 不同分离及培养方法对大鼠骨髓间充质干细胞生长增殖和生物学特性的影响被引量：16
- 2009年
- 目的探讨获得大量、高纯度、高活性骨髓间充质干细胞(BMSCs)的有效途径。方法用密度梯度离心法和贴壁法分离纯化BMSCs,在无血清、含小牛或胎牛血清以及不同体积分数的胎牛血清的培养基中培养,传代扩增,观察各组细胞形态、生长特性,测定生长曲线,免疫细胞化学染色鉴定表面抗原,电镜观察细胞显微结构。结果密度梯度离心法可获得较纯的原代细胞,但细胞增殖缓慢,容易老化;贴壁法分离的细胞生长增殖迅速,经传代换液,第4代细胞基本纯化;小牛和胎牛血清均能促进BMSCs生长增殖,但在体积分数为0.12的胎牛血清中集落形成率最高(46.50%);细胞表达CD44、CD90,而CD14、CD45阴性;电镜下BMSCs符合干细胞的一般特性。结论经多次换液、严格控制传代消化时间(2～3min)和酶浓度(2.5g/L),采用贴壁纯化法在含体积分数为0.12的胎牛血清L-DMEM培养液中培养可获得大量、高纯度、高活性的BMSCs。
- 贾贵清张明鸣杨平程惊秋陆燕蓉伍晓汀
- 关键词：间充质干细胞细胞培养细胞分离骨髓
- 围手术期应用肠内免疫营养对胃癌术后患者免疫功能和营养状况的药理作用被引量：2
- 2013年
- 目的探讨围手术期强化免疫营养素肠内营养支持对胃癌患者免疫功能和营养状况的影响。方法将2007年3月-2012年12月间24例胃癌术后患者随机分为肠内免疫营养组(研究组)和常规肠内营养组(对照组),每组12例,进行等氮等热量营养支持,术前5 d至术后7 d。测定营养支持前后的血清白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白、T淋巴细胞亚群及血清免疫球蛋白等指标变化。临床观察胃肠功能恢复时间。结果术后两组患者血清蛋白水平和免疫指标多有下降,但研究组术后8 d的血清前白蛋白水平和IgG、CD4/CD8比值较对照组明显增加,研究组胃肠功能恢复时间早于对照组。结论围手术期应用强化免疫肠内营养支持可改善胃癌患者术后营养和免疫状况,促进肠道功能恢复。
- 宁志超
- 关键词：肠内营养胃癌免疫营养
