国家自然科学基金(N030300301)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- 人工进化丙型肝炎病毒C和E1区噬菌体展示文库的构建及初步筛选
- 2006年
- 目的构建人工进化丙型肝炎病毒(HCV)C和E1区基因噬菌体展示文库,并进行初步筛选。方法应用DNA改组技术进行不同基因型的HCV C和E1区基因的人工进化,克隆于噬菌体载体,以辅助噬菌体M13K07援救后,构建噬菌体展示文库,应用HCV C和E1区单克隆抗体进行初步筛选。随机选取筛选后的20个噬菌体克隆,用高滴度HCV阳性血清通过双抗体夹心酶联免疫吸附法进行抗原抗体结合反应,以正常人血清作为对照。结果人工进化HCV C和E1区噬菌体展示文库库容达1．64×106,重组率为0．86。以C和E1区单克隆抗体淘筛4轮,噬菌体展示文库得到特异性富集。筛选获得12个阳性克隆。结论所构建的噬菌体展示文库的库容和多样性符合筛选的要求。筛选获得的阳性克隆具有较好的抗原抗体结合反应活性,表现出较好的亲和力。
- 赵甫涛贾战生李谨革王春雨魏欣李光玉白雪帆
- 关键词：细菌噬菌体肽库
