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国家自然科学基金(31170283)

作品数:6 被引量:19H指数:3
相关作者:宛晓春陈琪孟祥宇江雪梅史成颖更多>>
相关机构:安徽农业大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目国家教育部博士点基金更多>>
相关领域:农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 6篇中文期刊文章

领域

  • 6篇农业科学
  • 1篇生物学

主题

  • 5篇基因
  • 4篇茶树
  • 2篇酶基因
  • 2篇克隆
  • 2篇基因表达
  • 2篇基因克隆
  • 2篇儿茶
  • 2篇儿茶素
  • 2篇茶氨酸
  • 1篇代谢
  • 1篇油茶
  • 1篇愈伤
  • 1篇愈伤组织
  • 1篇实时定量PC...
  • 1篇特异
  • 1篇特异性
  • 1篇特异性分析
  • 1篇同源性
  • 1篇同源性分析
  • 1篇全长CDNA

机构

  • 5篇安徽农业大学

作者

  • 5篇宛晓春
  • 2篇徐乾
  • 2篇史成颖
  • 2篇江雪梅
  • 2篇孟祥宇
  • 2篇陈琪
  • 1篇张正竹
  • 1篇杨华
  • 1篇汤志近
  • 1篇于淑伟
  • 1篇杨华
  • 1篇李正国

传媒

  • 2篇安徽农业大学...
  • 1篇茶业通报
  • 1篇广西植物
  • 1篇茶叶
  • 1篇核农学报

年份

  • 1篇2018
  • 2篇2015
  • 1篇2014
  • 2篇2013
6 条 记 录,以下是 1-6
排序方式:
茶树茶氨酸代谢相关基因表达组织特异性分析被引量:7
2015年
为了研究茶树中茶氨酸代谢相关基因的组织与表达特性,本研究利用实时荧光定量PCR检测方法探索了茶树(Camellia Sinensis)茶氨酸代谢途径中相关基因:茶氨酸合成酶(TS)、谷氨酰胺合成酶(GS)、谷氨酰胺α-酮戊二酸氨基转移酶(GOGAT)、谷氨酸脱氢酶(GDH)以及与氮素吸收和转化密切相关的亚硝酸还原酶(NiR)、精氨酸脱羧酶(ADC),在不同组织器官及不同发育时期的表达情况。结果表明,TS基因家族成员在茶树的不同器官中均有表达,且差异明显,其中TS1在根中表达量最高,TS2在花中表达量最高,而TS3在单芽和侧根中的表达量均相对较高;而GS、GOGAT基因均明显表现为叶部含量高于根部,说明其主要参与了叶部光呼吸过程释放氨的再同化过程;对于GDH、NiR、ADC等主要参与根部铵态氮吸收与转化的基因则表现为根部含量明显超过叶部。表明茶氨酸合成途径同时受到根部与叶部氮代谢的影响,同时茶氨酸合成酶基因家族成员的表达呈现出明显的组织特异性。本研究有助于从分子水平上分析与认识影响茶树茶氨酸代谢途径相关基因的表达与调控模式,为今后茶树品质遗传改良提供理论基础。
陈琪孟祥宇江雪梅于淑伟宛晓春
关键词:茶树组织特异性
茶树中精氨酸脱羧酶基因的cDNA克隆及序列分析被引量:2
2013年
通过SMARTRACE PCR技术获得了茶树中精氨酸脱羧酶(ADC)的cDNA全长序列,并登录GenBank(登录号为JQ653274)。ADC基因cDNA全长为2 988 bp,开放阅读框(ORF)全长为2 163 bp,共编码720个氨基酸,编码的蛋白质的分子量为77.430 kDa,理论等电点为5.373,其序列中不存在卷曲螺旋结构。ADC蛋白为亲水性非分泌不稳定蛋白,不跨膜运动,无信号肽序列存在,共有41个可能的磷酸化位点,存在于叶绿体基质中,是细胞质蛋白。精氨酸脱羧酶的基因cDNA全长序列的获得,对于进一步研究精氨酸在茶树氮代谢中的作用及茶氨酸代谢途径提供基础。
徐乾史成颖宛晓春汤志近
关键词:全长CDNA基因克隆
茶树茶氨酸合成酶基因的酶活性验证与蛋白三维结构分析被引量:6
2015年
针对NCBI上已登录的茶氨酸合成酶与谷氨酰胺合成酶基因序列进行克隆、原核表达与酶活性验证,利用多种生物信息学数据库和软件,对Cs TS与Cs GS基因进行结构、性质和功能预测,采用同源建模法对蛋白三维结构进行预测,比较并预测催化作用位点的差异;用系统进化树分析从裸子植物到高等被子植物的谷氨酰胺合成酶基因序列,推测其进化的演变过程;通过对原核表达的基因工程菌提取粗酶液进行酶活性测定。结果表明:尽管茶树TS与GS序列高度同源,但是原核表达后的融合蛋白仍然显示了不同的催化能力,蛋白一、二级结构分析显示Cs TS与Cs GS差异不大,但是通过同源建模形成的蛋白三级结构分析显示,Cs TS与Cs GS存在3个催化位点上的差异,这可能是导致其酶活性差异的关键。系统进化分析结果首次确定茶氨酸合成酶应为谷氨酰胺合成酶基因家族成员,按照其细胞定位预测应为胞质型GS,其亲缘关系与同为双子叶植物的葡萄、陆地棉、巴西橡胶树、拟南芥较接近。
陈琪江雪梅孟祥宇张正竹宛晓春
关键词:谷氨酰胺合成酶同源性分析
油茶花青素还原酶基因克隆和体外功能研究被引量:3
2018年
花青素还原酶(ANR)是催化花青素还原形成单体儿茶素的关键酶。油茶(Camellia oleifera Abel.)属于山茶科山茶属植物,其花青素还原酶基因尚未被克隆和功能分析。本研究采用RT-PCR技术,克隆获得了两条油茶花青素还原酶基因的全长序列,CoANR1基因全长1441bp,开放阅读框(ORF)长度为1047bp,编码348个氨基酸残基,与茶树ANR1基因的蛋白序列同源性为97%;CoANR2基因全长1413bp,ORF框长度为1014bp,编码337个氨基酸残基,与茶树ANR2基因的蛋白序列同源性为99%。采用大肠杆菌表达方法获得CoANR1和CoANR2重组蛋白,纯化蛋白经体外酶活检测能够催化矢车菊色素合成儿茶素(C)和表儿茶素(EC),催化飞燕草色素合成没食子儿茶素(GC)和没食子表儿茶素(EGC)。本研究为进一步研究油茶儿茶素合成的分子机制提供了重要的研究基础和理论依据。
黄贝李龙宝吴信洁何周陈子怡姚芳杨华杨华
关键词:油茶儿茶素
茶愈伤组织实时定量PCR分析中内参基因的选取被引量:2
2014年
为了选取合适的内参基因来分析培养基中前体物诱导及对照的茶愈伤组织中茶氨酸代谢相关基因的差异表达,利用Gen Bank上登录的茶树基因序列以及通过构建文库测序所得的基因(具有完整的阅读框)共7个持家基因设计引物。在分析这些引物的扩增效率和特异性后,测定了它们在茶愈伤组织生长过程中(对照和愈伤培养基中添加含氮外源物的情况下)的表达水平。利用ge Norm和Norm Finder软件分析了这些持家基因的稳定性,确定在该条件下合适的内参基因为β-actin和GAPDH。
史成颖李正国徐乾宛晓春
关键词:实时定量PCR内参基因基因表达茶树
Changes on Characteristic Components During Shoots Development in Camellia Sinensis被引量:2
2013年
Fresh leaves of tea cultivar Shuchazao were harvested from five different stages of shoot development including single-bud(SB),one leaf and one bud(BL1),two leaves and one bud(BL2),three leaves and one bud(BL3)and mature leaves(ML,including five leaves).The contents of tea-specific components,including caffeine,catechins and amino acids,in tea leaves were extracted and analyzed using the HPLC technique.The results showed that the content of caffeine in the buds in BL3 stage was generally the highest,while it did not change much in SB,BL1 and BL2 stages.The content of caffeine in the leaves at the same leaf-age was similar in five different development stages.The total contents of catechins in the first leaf were higher than that in the buds in all five development stages,and it was the highest in the first leaf at BL1 stage,but it decreased with the increase of the leaf-age.As far as the monomeric catechins were concerned,non-ester type catechins and ester type catechins can be detected in the buds or leaves in the five development stages.The majority of catechins were epigallocatechingallate(EGCG),which showed a similar variation tendency as that of total catechins.However,the contents of non-ester type catechins such as epicatechingallate(EGC),epicatechin(EC) and gallocatechin(GC) were higher in buds than in leaves,which were opposite to the content variation trends of ester type catechins in the course of shoot development.Theanine was the major amino acids in all development stages of tender shoots,and its content in the stage of single-bud was the highest.The content of theanine in buds was three or four times higher than in leaves,and the older the leaf-age was,the less theanine existed in the leaves.
Jing ZhangHua YangChao-Ling WeiYu-Ling TaiQi ChenXiao-Chun Wan
关键词:酯型儿茶素儿茶素类EGCG茶叶品种
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