河南省科技攻关计划(112102310206)
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
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- KISS-1对裸鼠胃癌移植瘤生长的抑制作用被引量：1
- 2015年
- 目的探讨KISS-1基因对裸鼠胃癌移植瘤生长的影响。方法通过脂质体介导将pc DNA3.1-KISS-1转染人胃癌细胞BGC-823,用Western blot检测转染前后KISS-1蛋白的表达。将转染pc DNA3.1-KISS-1的BGC-823细胞(转基因组)、转染空质粒的BGC-823细胞(空质粒转染组)和单纯BGC-823细胞(对照组)分别接种于BALB/C裸鼠,构建裸鼠胃癌移植瘤模型,测量肿瘤体积和瘤质量,并绘制肿瘤生长曲线;采用免疫组织化学法和半定量反转录-聚合酶链反应检测肿瘤组织中KISS-1蛋白和mRNA的表达。结果 KISS-1基因成功转入胃癌BGC-823细胞,转基因组KISS-1蛋白的表达较空质粒转染组和对照组显著增加(P<0.05);与空质粒转染组和对照组比较,转基因组裸鼠肿瘤生长速度显著减慢、肿瘤体积显著减小,瘤体质量显著减轻(P<0.05)。结论通过基因转染的方法能表达有活性的KISS-1,并能抑制裸鼠胃癌移植瘤的生长。
- 李娜王洪兴廉莹赵二趁
- 关键词：胃癌KISS-1BGC-823细胞转染裸鼠
- siRNA干扰缺氧诱导因子2α对乳腺癌细胞侵袭能力的影响及相关机制被引量：7
- 2015年
- 目的探讨缺氧诱导因子(HIF)-2αsiRNA对乳腺癌细胞MCF-7侵袭能力的影响及相关机制。方法采用RNA干扰(RNAi)技术沉默已建立的缺氧细胞模型MCF-7细胞中HIF-2α的表达;RT-PCR方法检测转染后MCF-7细胞中HIF-2αmRNA的表达;采用划痕实验和侵袭实验探讨细胞侵袭能力的变化;采用Western印迹和RT-PCR方法检测基质金属蛋白酶(MMP)-2的表达。结果 RNAi结果显示,缺氧+siRNA组HIF-2αmRNA的表达与单纯缺氧组相比均明显降低(P<0.05);转染后划痕实验结果显示,缺氧+siRNA组与单纯缺氧组相比细胞伤口愈合速度明显减慢。Transwell侵袭实验显示,缺氧+siRNA组与单纯缺氧组相比穿膜细胞数显著减少(P<0.05);Western印迹和RT-PCR结果显示,缺氧+siRNA组与单纯缺氧组相比,MMP-2蛋白及mRNA表达均下调(P<0.05)。结论 HIF-2αsiRNA抑制乳腺癌MCF-7细胞侵袭能力的机制之一可能与MMP-2基因的表达下调有关。
- 李娜王洪兴张洁李永真千新来
- 关键词：基质金属蛋白酶-2RNA干扰乳腺癌
- KISS-1和基质金属蛋白酶-9蛋白在胃癌中的表达及意义被引量：2
- 2012年
- 目的探讨肿瘤转移抑制基因KISS-1及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与胃癌侵袭、转移的关系,为研究胃癌的转移机制及临床治疗提供理论基础。方法采用免疫组织化学法检测36例胃癌组织及36例正常胃黏膜组织中KISS-1及MMP-9蛋白的表达情况,分析其与胃癌患者各临床病理指标的关系及二者表达的相关性;采用Western blot法检测不同侵袭能力胃癌细胞株BGC-823(高侵袭)和MKN-28(低侵袭)中KISS-1和MMP-9蛋白的表达。结果KISS-1蛋白在胃癌组织中的阳性表达率显著低于正常胃黏膜组织(P<0.05),并且其低表达与淋巴结转移密切相关(P<0.05);MMP-9蛋白在胃癌组织中的阳性表达率显著高于正常胃黏膜组织(P<0.05),并且其高表达与胃癌的浸润深度和淋巴结转移均密切相关(P<0.05);KISS-1与MMP-9蛋白的表达呈负相关(P<0.05)。KISS-1蛋白在高侵袭胃癌细胞株中的表达低于低侵袭细胞株,但差异无统计学意义(P>0.05);MMP-9蛋白在高侵袭胃癌细胞株中的表达高于低侵袭细胞株,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 KISS-1蛋白的低表达和MMP-9蛋白的高表达可能与胃癌的浸润、转移有关,二者有望成为判定胃癌侵袭和转移能力的指标。
- 王洪兴张洁朱会芳李娜
- 关键词：胃癌KISS-1基质金属蛋白酶-9免疫组织化学法WESTERNBLOT法
- HPV16E6和E7对乳腺癌细胞侵袭能力的影响及其机制
- 2012年
- 目的探讨HPV16E6、E7和E6/E7同时稳定高表达对乳腺癌细胞MCF-7侵袭能力的影响及其机制。方法利用脂质体介导将HPV16E6、E7和全长E6/E7转染MCF-7细胞,利用Western blot检测转染后E6和E7的表达。采用Transwell实验检测MCF-7细胞侵袭能力的变化,RT-PCR法检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA的表达情况。结果在MCF-7-E6细胞克隆中,克隆1表达水平最高;MCF-7-E7细胞克隆中,克隆4表达水平最高;MCF-7-E6/E7细胞克隆中,克隆4表达水平最高。与MCF-7亲本和MCF-7-vect细胞比较,MCF-7-E6和MCF-7-E6/E7细胞穿过小室底膜的细胞数均显著增加(P<0.01)。在MCF-7-E6、MCF-7-E7和MCF-7-E6/E7细胞中MMP-2mRNA表达均显著增加。结论 HPV16E6和E7促进MCF-7细胞体外侵袭能力的机制之一可能是通过诱导MMP-2的表达。
- 李娜冶亚平朱会芳韩芳毅千新来
- 关键词：金属蛋白酶类MCF-7细胞人乳头瘤病毒
